A contagem celular é uma técnica empregada para se monitorar a reprodução de
células em meios de cultivo de interesse em ensaios biológicos. Um sistema de
análise por injeção em fluxo foi desenvolvido para a contagem de células como uma
alternativa ao sistema convencional, câmara de Neubauer. O método é baseado na
proporcionalidade entre o sinal de sulfato de bário e das células. Apesar das
diferenças nas propriedades físicas, foi possível estabelecer uma relação entre os
sistemas de fluxo. No sistema FIA para determinação de sulfato, foi obtida a
seguinte equação para curva analítica: S = 0,0087Csulfato + 0,000458. Para o
Saccharomyces cerevisiae a curva analítica obtida foi S = 4,01 x 10-11CS.cerevisiae +
0,0018 e a relação entre os sistemas foi CS.cerevisiae = 2,17 x 108CSulfato + 0,002258.
Os limites de detecção e quantificação foram, respectivamente, 2,37 x 108 células L-1
e 7,90 x 108 células L-1. O método foi comparado com os resultados obtidos na
câmara de Neubauer e não existiram diferenças significativas a um nível de
confiança de 95% (teste-t pareado). A determinação com a câmara de Neubauer
apresentou menor precisão que o sistema FIA. Além disso, o método permite a
monitoração do crescimento microbiano. As principais vantagens do sistema FIA
foram a alta freqüência, a seletividade, exatidão e repetibilidade satisfatórias / Cell count is a procedure that has been used in screening of cell reproduction in
different types of inquiry and science areas. A system of flow injection analysis (FIA)
was developed for cell counting how an alternative to conventional system, the
Neubauer Chamber. The method is based on the proportionality between the barium
sulfate and the cell signals. In spite of differences in the physical properties, it was
possible to establish a relationship among the flow systems. In the sulfate FIA
system, it was obtained the following equation for calibration curve: (S 0.0087Csulfate +
0.000458). The Saccharomyces cerevisiae calibration curve obtained was: S = 4,01 x
10-11CS.cerevisiae + 0.0018 and the relationship between the systems was: CS.cerevisiae =
2,17 x 108CSulfate + 0.002258. The limits of detection and quantification was
respectively equal to 2.37 x 108 cells L-1 and 7.90 x 108 cells L-1. The method was
compared with results obtained in the Neubauer chamber and there was no
significant difference at confidence level of 95% (paired t-test). The determination
with classical Neubauer chamber presented lower precision than the FIA system.
Besides this, the method has permitted the screening of microbial proliferation. The
main advantages of FIA system were the high analytical frequency, the selectivity,
accuracy and repeatability satisfactory
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:10.254.254.39:tede/298 |
| Date | 04 August 2008 |
| Creators | PESSÔA, Gustavo de Souza |
| Contributors | LUCCAS, Pedro Orival, http://lattes.cnpq.br/3672437413599685, SIQUEIRA, Antônio Martins de, PEREIRA FILHO, Edenir Rodrigues, SILVA, Paulo Márcio Faria e |
| Publisher | Universidade Federal de Alfenas, Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Brasil, UNIFAL-MG, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UNIFAL, instname:Universidade Federal de Alfenas, instacron:UNIFAL |
| Rights | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
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