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Avaliação histológica e bioquímica tardia em ratos Wistar após o clampeamento do pedículo hepático : modelos experimentais / Late biochemical and histological evaluation in Wistar rats after clamping of the hepatic pedicle : experimental models

Orientadores: Ilka de Fátima Santana Ferreira Boin, Artur Udelsmann / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-27T00:05:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2015 / Resumo: A oclusão vascular temporária do fluxo hepático é um dos procedimentos essenciais nas cirurgias hepáticas. Muitas pesquisas relacionadas à isquemia e reperfusão (I/R) em ratos Wistar, seja através de interrupção por pouco tempo, ou período maior, têm demonstrado sérias complicações causadas por lesões de I/R. Pesquisas demonstram grandes alterações metabólicas e fisiológicas quando analisadas durante, ou nas primeiras horas após o experimento. O objetivo deste trabalho foi avaliar as alterações hepáticas morfológicas e bioquímicas tardias, ocorridas após pinçamento total ou parcial do hilo hepático em ratos Wistar. Um total de 26 ratos Wistar, machos, peso médio 315,5 ± 61,5g foram utilizados em dois estudos. No primeiro estudo, 12 ratos foram divididos em dois grupos: Grupo Pinçamento do Ducto Biliar Comum (PDBC; n=6) foram submetidos à anestesia com tiopental sódico iv, à incisão abdominal até 2cm, tendo o ducto biliar isolado, dissecado e pinçado por 10 minutos. Após este tempo, a pinça foi retirada e a incisão fechada. Grupo Operação Simulada I (OSI; n=6) em condições de normalidade, os animais foram submetidos unicamente à anestesia e laparotomia e, posteriormente, a exames de controle. Nos dois grupos após o 28ºdia foram realizadas biópsias hepáticas e exames bioquímicos seguidos de eutanásia dos animais. Observamos que 83% dos animas do grupo PDBC apresentaram dilatação do colédoco, com alterações histológicas hepáticas: proliferação ductular, formação de septos, focos de necrose do parênquima, com formação de micro abcessos e alterações dos exames bioquímicos, quando comparados aos animais do grupo OSI (p < 0,05). No segundo estudo, 14 animais foram anestesiados com ketamina 5% (30mg/Kg) e xylazina 2% (30mg/Kg) via intraperitoneal. No grupo clampeamento intermitente do pedículo hepático (CIPH; n=7) os animais foram submetidos à incisão em U no abdome; o pedículo hepático foi isolado, dissecado e submetido a pinçamento, com micro pinça, intermitente por 4 ciclos de 5 minutos de isquemia, seguidos de 5 minutos de reperfusão, e a incisão foi fechada. No Grupo Operação Simulada II (OSII; n=7) os animais foram submetidos à anestesia, laparotomia e manipulação do pedículo hepático e,posteriormente, ao controle dos exames. Em todos os animais no 35o dia, após jejum de 12 horas, foi realizada nova anestesia para coleta da biópsia hepática e sangue para dosagem de alanina amino transferase (ALT) e de aspartato amino transferase (AST). A análise estatística foi realizada pelo teste Mann-Whitney para comparação de médias com significância de 5%. Observamos que todos os animais do grupo CIPH apresentaram dilatação do colédoco e aumento significativo nas enzimas hepáticas (p<0,05). Na avaliação histológica constatamos proliferação ductular (100% dos casos), septos porta-porta (42,8%), formação de nódulos (42,8%), focos de necrose (14,2%) e rolhas de bile (14,2%). No grupo OSII estas alterações não foram encontradas. Concluímos que o pinçamento do ducto biliar (10 minutos) foi suficiente para gerar importantes alterações morfológicas hepáticas e do colédoco, confirmadas através de análise enzimática e histológica, podendo, portanto, ser utilizado como modelo de obstrução biliar, visando estudos semelhantes. Constatamos, também, que o pinçamento intermitente do pedículo hepático provocou lesões semelhantes na árvore biliar e no parênquima hepático / Abstract: The temporary vascular occlusion of the hepatic blood flow is one of the essential procedures in hepatic surgery. Many researches are related to ischemia and reperfusion (I/R) in rats, either through interruption for a short time period or higher and all has shown serious complications caused by I/R injury. Researches have demonstrated, in the early analysis severe metabolic and physiological disorders but there are not reports about hepatic injuries after late analysis. The objective was to assess the morphological and biochemical hepatic late alterations occurring after total or partial hepatic pedicle clamping, in Wistar rats. A total of 26 male Wistar rats, weighting 315.6 ±61.9g were used in two studies. In the first, 12 rats were distributed into two groups: bile duct clamping group (BDCG; n = 6); anesthetized with thiopental sodium; with bile duct dissection, isolation and clamped for 10 minutes. After this time, the clamp was removed and the incision was closed. In simulated operation group I (SOGI; n = 6) the animals were submitted solely to anesthesia and laparotomy and subsequently control exams.On the 28th day, liver biopsies and biochemical exams were performed. All animals were sacrificed while still under anesthesia. We observed that 83% of the animals of BDCG group showed dilation of the common bile duct with hepatic histological changes such as ductular proliferation, septa formation, parenchymal foci of necrosis with formation of micro abscesses and changes of biochemical tests when compared to SOGI (p<0.05).In the second study, 14 animals were anesthetized with ketamine 5% (30mg/kg) and xylazine 2% (30mg/kg)intraperitoneally. In intermittent Hepatic Pedicle Group (IHPC; n = 7) the animals had the hepatic pedicle isolated, dissected and submitted to clamping applying 4 cycles of 5 minutes of ischemia followed by 5 minutes of reperfusion, and the incision was closed.In group operation simulated II (SOGII; n = 7), the animals were anesthetized, laparotomy and manipulation of the hepatic pedicle were performed. On the 35th day, after 12 hours fasting, anesthesia wasinduced for liver biopsy and serum alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) collection. The Mann-Whitney test for comparison of means with significance of 5% was used. In result all the animals of IHPC group had a dilated common bile duct and the significant increase in hepatic enzymes (p <0.05). In histological evaluation we found ductular proliferation (100% of cases), septa port-portal (42.8%), nodules formation (42.8%), foci of necrosis (14.2%) and bile plugs (14.2%). In the group SOGII these changes were not found. We conclude that the short clamping time of the bile duct (for 10 minutes) was enough to cause major hepatic and bile duct morphological changes confirmed by enzymatic and histological analysis, and may therefore be used as biliary obstruction model in order to similar studies. We also noted that the intermittent clamping of the hepatic pedicle caused similar injuries in the biliary tree and in the hepatic parenchyma / Doutorado / Fisiopatologia Cirúrgica / Doutora em Ciências

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.unicamp.br:REPOSIP/312714
Date02 December 2015
CreatorsJorge, Gracinda de Lourdes, 1958-
ContributorsUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS, Udelsmann, Artur, 1949-, Boin, Ilka de Fatima Santana Ferreira, 1953-, Junior, Orlando de Castro e SIlva, Silva, Renato Ferreira da, Guillaumon, Ana Terezinha, Strucchi, Raquel Silveira Bello
Publisher[s.n.], Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Ciências Médicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Cirurgia
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
Format52 p. : il., application/pdf
Sourcereponame:Repositório Institucional da Unicamp, instname:Universidade Estadual de Campinas, instacron:UNICAMP
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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