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Previous issue date: 2010-07-29 / The association of vaccine antigens to potent immunological adjuvants is a key
strategy to improve the performance of subunit vaccines. Adjuvants are components
that, when used in combination with a specific antigen, induce more immunity that
the antigen alone. Microbial products have been used as adjuvant, including the B
subunit of the thermo labile entherotoxin of Escherichia coli (LTB), which is atoxic. LTB
is known by its great efficiency as mucosal immunity adjuvant and this activity
depends on the shape of the antigen combination (co-administered or fused), on the
immunization route (mucosal or parentheral) and the dosage. This study aims to
evaluate the adjuvant activity of recombinant LTB (rLTB), both as chimeric and coadministered
orally or intramuscularly, using the major fimbrial unit type 1 (FimA)
of Salmonella Enteritidis as antigen. BALB/c mice were immunized orally or
intramuscularly with three doses of rLTB or PBS (controls) or rFimA, rFimA
associated with Freund's incomplete adjuvant (rFimA+AI, i.m. immunized animals),
co-administered or fused to LTB (chimera). The levels of total systemic antibodies,
IgG1, IgG2a and IgA anti-rFimA were measured by ELISA and an animal protection
assay against S. Typhimurium infection was performed. The results show that rLTB
only showed adjuvant activity that resembled the commercial adjuvant when coadministered
intramuscularly to rFimA and for totals antibody production. These
results confirm that the action of adjuvant rLTB is influenced by the shape of binding
to the antigen (fused or co-administered) and route of administration. Immunizations
did not induce protection of mice challenged with S. Typhimurium, but survival time
was greater among animals immunized with only the rFimA and rFimA+AI.
Furthermore, the total antibody titer, IgG1 and IgG2a obtained by the chimeric form,
both orally as intramuscularly, were similar to those obtained by the animal only
immunized with rFimA. These results suggest that rFimA has a possibility of having
an adjuvant capability rFimA. / A associação de antígenos vacinais a potentes adjuvantes imunológicos é uma
estratégia fundamental para melhorar o desempenho de vacinas de subunidade.
Adjuvantes são substâncias que, usadas em combinação com um antígeno
específico, induzem mais imunidade que o antígeno sozinho. Produtos microbianos,
como a subunidade B da enterotoxina termolábil de Escherichia coli (LTB), que é
atóxica, têm sido utilizados com esse propósito. A LTB é reconhecida por sua
grande eficiência como adjuvante da imunidade de mucosa e essa capacidade
depende da forma de combinação ao antígeno (co-administrada ou fusionada), da
via de imunização (mucosa ou parenteral) e da dose administrada. O objetivo do
presente trabalho foi avaliar a atividade adjuvante da subunidade B recombinante da
enterotoxina termolábil de Escherichia coli, fusionada ou co-administrada, por via oral
(v.o.) ou intramuscular (i.m.), utilizando a subunidade fimbrial principal recombinante
da fímbria tipo 1 (FimA) de Salmonella Enteritidis como antígeno. Para isso,
camundongos BALB/c foram imunizados v.o. e i.m. com 3 doses de rLTB, PBS
(controles) ou rFimA, ou rFimA associada a adjuvante de Freund incompleto
(rFimA+AI, animais imunizados via i.m.), co-administrada ou fusionada a LTB
(quimera). Os níveis de anticorpos sistêmicos totais, IgG1, IgG2a e IgA anti-rFimA
foram mensurados por ELISA e um ensaio de proteção animal contra infecção por S.
Typhimurium foi realizado. Os resultados obtidos demonstraram que a rLTB
apresentou atividade adjuvante estatisticamente semelhante a do adjuvante
comercial somente quando co-administrada i.m. a rFimA e em relação a produção
de anticorpos totais. Esses resultados confirmam que a ação adjuvante da rLTB é
influenciada pela forma de ligação ao antígeno (fusionada ou co-administrada) e
pela via de administração. As imunizações não induziram proteção de camundongos
desafiados com S. Typhimurium, porém o tempo de sobrevivência foi maior entre os
animais imunizados somente com a rFimA e rFimA+AI. Além disso, os níveis de
anticorpos totais, IgG1 e IgG2a obtidos pela forma quimérica imunizada tanto v.o.
quanto i.m., foram semelhantes àqueles obtidos pelos animais imunizados somente
com a rFimA. Os resultados obtidos apontam para uma possível atividade adjuvante
da proteína rFimA.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpel.edu.br:123456789/1274 |
| Date | 29 July 2010 |
| Creators | Sehn, Carla Pohl |
| Contributors | CPF:94034451068, http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4701057T9&dataRevisao=null, Dellagostin, Odir Antônio, CPF:42251850015, http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4723107D9, Conceição, Fabrício Rochedo, Aleixo, José Antonio Guimarães, Moreira, Ângela Nunes |
| Publisher | Universidade Federal de Pelotas, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, UFPel, BR, Biotecnologia |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPEL, instname:Universidade Federal de Pelotas, instacron:UFPEL |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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