Létude comparatif entre lAlmanaque Brasileiro Garnier, publié entre 1903 et 1914, et lAlmanach Hachette, édité entre 1894 et 1980, cherche corroborer lengendre anuel des cités idéales, Paris et Rio de Janeiro, par lacte poétique recupérateur du Beau, pour la tessiture du Sublime, dans le meilleur des mondes possibles. Cest la fabrication incessante de ce microcosme mystique-poétique qui permet aux lecteurs acquerir une vie protégée des problématiques modernes, puisque dans cette cloche en verre onirique ils subissent une thérapeutique des maux contractés dans la foule caotique environnante, puis guéris, puissent voir la vraie beauté du monde. Cest le rôle de tirer les échelles des yeux, de la Paidéia Poétique quotidienne, pour la conquête de lacuité de vision, qui permet la plainte du Laid symbolisé par les malheurs de la modernité, ce qui permet lédification de ce paradis terrestre pour lexpérience du Temps Sacré concernant la nouvelle Création. Cette recupération du principe du monde, par la Poiésis, traduit le véritable âge dor de la soi-disant Belle Époque brésilienne et française, dans laquelle les citoyens vivent un temps déternelle bonaventure, avec toute sorte dabondance et de jouissance, caractérisée par linfinité dalmanaquias pour leur ravissement à partir du Pays de Cocagne et de lEldorado. Cest labondance de nourriture poétique, servie sur la grande table de la Terre sans Maux dalmanach, qui agit sur le corps et lesprit comme tonique regénérateur de la plenitude perdue, laquelle symbolise linfini récupéré par lengendrement ininterrompu du Sublime dans les Républiques des délices de lEldorado, pas celui des Amériques, mais de tous les continents qui composent ce site merveilleux. / O estudo comparativo entre o Almanaque Brasileiro Garnier, publicado entre 1903 e 1914, e o Almanach Hachette, que esteve em circulação entre 1894 e 1980, busca aferir o engendro anual das cidades ideais, Paris e Rio de Janeiro, por meio do ato poético resgatador do Belo, para tessitura do Sublime, no melhor dos mundos possíveis de almanaque. É a feitura incessante de tal microcosmo místico-poético que permite aos leitores uma vida resguardada das problemáticas modernas, posto que dentro de tal redoma onírica passam por um processo terapêutico de cura dos males contraídos na massa caótica circundante, para então, sãos, poderem enxergar a verdadeira beleza do mundo. É, pois, o papel de tirar as escamas dos olhos, da Paidéia Poética diária, para alcance da acuidade de visão, que possibilita a denúncia do Feio simbolizado pelas mazelas da modernidade, o que permite a edificação de tal empírio terrestre, para a vivência do Tempo Sagrado advindo da nova Criação. Tal resgate do princípio do mundo, pela Poiésis, traduz a verdadeira idade de ouro na chamada Belle Époque brasileira e francesa, onde seus cidadãos vivem um tempo de eterna boa ventura, com toda sorte de abundância e de regozijo, caracterizada pela infinidade de almanaquias para deleite proveniente do Pays de Cocagne e do Eldorado. É a fartura de alimento poético, servido periodicamente na grande mesa da Terra sem Males de almanaque, que age no corpo e no espírito como tônico resgatador da plenitude perdida, simbolizadora da infinitude reconquistada, pela tessitura ininterrupta do Sublime, nas Repúblicas das delícias do Eldorado, não das Américas, mas de todos os continentes que compõem tal sítio maravilhoso.

Orientador: George Shigueki Yasui / Resumo: O uso de peixes estéreis é uma alternativa viável para evitar a introgressão emecossistemas naturais. Adicionalmente, esses peixes podem ser utilizados comoreceptores em transplantes de células germinativas para subsequente conservação deespécies ameaçadas. O presente trabalho teve como objetivo estabelecer um protocoloeficiente para produção massal de peixes estéreis combinando hibridação e manipulaçãocromossômica. Para tal, oócitos de Astyanax altiparanae foram fertilizados com sêmende A. fasciatus, A. schubarti, Hyphessobrycon anisitsi e Oligosarcus pintoi. Metade dosovos fertilizados receberam choque de temperatura 40°C para indução da triploidização.Os cruzamentos intraespecíficos diploide e triploide serviram como controle. Taxas defertilização e sobrevivência foram verificadas nos estágios de desenvolvimentoembrionário (clivagem, blástula, gástrula, segmentação e eclosão), assim como aporcentagem de larvas normais e anormais. O status de ploidia das larvas foi confirmadopor citometria de fluxo. Nove meses após a fertilização, 16 machos e 16 fêmeas de cadacruzamento foram sacrificados para remoção das gônadas e subsequente análisehistológica e verificação de esterilidade. Adicionalmente, amostras de nadadeiras foramcoletadas, fixadas e diafanizadas para verificação da presença de caracteres sexuais(espículas). Não foi observada diferença significativa (P> 0,05) nas taxas de fertilização,sobrevivência nos diferentes estágios de desenvolv... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

O estudo comparativo entre o Almanaque Brasileiro Garnier, publicado entre 1903 e 1914, e o Almanach Hachette, que esteve em circulação entre 1894 e 1980, busca aferir o engendro anual das cidades ideais, Paris e Rio de Janeiro, por meio do ato poético resgatador do Belo, para tessitura do Sublime, no melhor dos mundos possíveis de almanaque. É a feitura incessante de tal microcosmo místico-poético que permite aos leitores uma vida resguardada das problemáticas modernas, posto que dentro de tal redoma onírica passam por um processo terapêutico de cura dos males contraídos na massa caótica circundante, para então, sãos, poderem enxergar a verdadeira beleza do mundo. É, pois, o papel de tirar as escamas dos olhos, da Paidéia Poética diária, para alcance da acuidade de visão, que possibilita a denúncia do Feio simbolizado pelas mazelas da modernidade, o que permite a edificação de tal empírio terrestre, para a vivência do Tempo Sagrado advindo da nova Criação. Tal resgate do princípio do mundo, pela Poiésis, traduz a verdadeira idade de ouro na chamada Belle Époque brasileira e francesa, onde seus cidadãos vivem um tempo de eterna boa ventura, com toda sorte de abundância e de regozijo, caracterizada pela infinidade de almanaquias para deleite proveniente do Pays de Cocagne e do Eldorado. É a fartura de alimento poético, servido periodicamente na grande mesa da Terra sem Males de almanaque, que age no corpo e no espírito como tônico resgatador da plenitude perdida, simbolizadora da infinitude reconquistada, pela tessitura ininterrupta do Sublime, nas Repúblicas das delícias do Eldorado, não das Américas, mas de todos os continentes que compõem tal sítio maravilhoso. / Létude comparatif entre lAlmanaque Brasileiro Garnier, publié entre 1903 et 1914, et lAlmanach Hachette, édité entre 1894 et 1980, cherche corroborer lengendre anuel des cités idéales, Paris et Rio de Janeiro, par lacte poétique recupérateur du Beau, pour la tessiture du Sublime, dans le meilleur des mondes possibles. Cest la fabrication incessante de ce microcosme mystique-poétique qui permet aux lecteurs acquerir une vie protégée des problématiques modernes, puisque dans cette cloche en verre onirique ils subissent une thérapeutique des maux contractés dans la foule caotique environnante, puis guéris, puissent voir la vraie beauté du monde. Cest le rôle de tirer les échelles des yeux, de la Paidéia Poétique quotidienne, pour la conquête de lacuité de vision, qui permet la plainte du Laid symbolisé par les malheurs de la modernité, ce qui permet lédification de ce paradis terrestre pour lexpérience du Temps Sacré concernant la nouvelle Création. Cette recupération du principe du monde, par la Poiésis, traduit le véritable âge dor de la soi-disant Belle Époque brésilienne et française, dans laquelle les citoyens vivent un temps déternelle bonaventure, avec toute sorte dabondance et de jouissance, caractérisée par linfinité dalmanaquias pour leur ravissement à partir du Pays de Cocagne et de lEldorado. Cest labondance de nourriture poétique, servie sur la grande table de la Terre sans Maux dalmanach, qui agit sur le corps et lesprit comme tonique regénérateur de la plenitude perdue, laquelle symbolise linfini récupéré par lengendrement ininterrompu du Sublime dans les Républiques des délices de lEldorado, pas celui des Amériques, mais de tous les continents qui composent ce site merveilleux.

Made available in DSpace on 2017-07-21T19:26:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Moises Souza Santos.pdf: 6452966 bytes, checksum: 0cca031e2fe3425ee7f63672b4643f3b (MD5) Previous issue date: 2014-02-27 / Fundação Araucária de Apoio ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Paraná / This work report on a study of the chimera states in networks composed by logistic maps whose interaction between them may have two types of couplings (nonlocal and power law). The Lyapunov exponents and a derivative of this quantity, the Kolmogorov-Sinai entropy, were used as analysis tool to calculate the average time of “life” or collapse time of chimera for nonlocal case with different sizes of networks. For coupling power law the results show that when it has nonlocal features it is also possible to see chimera states through the network. We also calculate the probable existence of regions of chimeras within the parameter space for both cases. Since the chimera dynamic states occurs when coexist regions that are chaotic and periodic in time, we obtained the region of the parameter space where this behavior occurs. We show the probable relations between the chimera states and the global order parameter that provides information on how the sites of a coupled network are related. / Neste trabalho foi realizado um estudo dos estados quimera em redes compostas por mapas logísticos cuja interação entre os mesmos pode ser de dois tipos de acoplamentos (não-local e lei de potência). Utilizamos como ferramenta de análise os expoentes de Lyapunov e uma quantidade derivada deste, a entropia de Kolmogorov-Sinai, para calcular o tempo médio de “vida” ou tempo de colapso de quimera para o caso não-local em redes de diferentes tamanhos. Para o acoplamento lei de potência mostramos que quando este possui características nâo-locais a rede também pode exibir estados quimera. Além disso calculamos as prováveis regiões de existência de quimeras dentro do espaço dos parâmetros para ambos os casos. Uma vez que a dinâmica de estados quimera ocorre quando coexistem regiões que são periódicas e caóticas no tempo, obtivemos a região, no espaço de parâmetros, onde este comportamento ocorre. Mostramos as relações prováveis que existem entre os estados quimera e o parâmetro de ordem global que fornece informações sobre o quão relacionados estão sítios de uma rede acoplada.

Submitted by Maria Beatriz Vieira (mbeatriz.vieira@gmail.com) on 2017-10-18T12:27:24Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_livia_budziarek_eslabao.pdf: 1788001 bytes, checksum: c14f927ac7e6babdc2bd66cf80275556 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-10-23T11:12:08Z (GMT) No. of bitstreams: 2 dissertacao_livia_budziarek_eslabao.pdf: 1788001 bytes, checksum: c14f927ac7e6babdc2bd66cf80275556 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-10-23T11:12:21Z (GMT) No. of bitstreams: 2 dissertacao_livia_budziarek_eslabao.pdf: 1788001 bytes, checksum: c14f927ac7e6babdc2bd66cf80275556 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-23T11:12:30Z (GMT). No. of bitstreams: 2 dissertacao_livia_budziarek_eslabao.pdf: 1788001 bytes, checksum: c14f927ac7e6babdc2bd66cf80275556 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-03-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / A imunocontracepção é reconhecida como um dos principais novos métodos contraceptivos para o controle e o manejo da fertilidade em diferentes espécies animais. Dentre os potenciais alvos utilizados em vacinas contraceptivas, o hormônio liberador de gonadotrofinas (GnRH) é considerado um dos mais atrativos. O GnRH é um decapeptídeo hipotalâmico que apresenta um papel central na reprodução de mamíferos. Entretanto, devido à sua baixa imunogenicidade, é necessário associar o GnRH com uma molécula carreadora capaz de estimular o sistema imune como, por exemplo, a subunidade B da enterotoxina termolábil de Escherichia coli (LTB). O presente estudo visou avaliar o potencial imunocontraceptivo de duas quimeras LTB/GnRH em camundongos machos da linhagem BALB/c. Os camundongos foram divididos aleatoriamente em oito grupos experimentais. O grupo LTB/GnRH-P recebeu a quimera expressa em P. pastoris. O grupo LTB/GnRH-P/A recebeu a quimera expressa em P. pastoris adsorvida em adjuvante oleoso. O grupo LTB/GnRH-E recebeu a quimera expressa em E. coli. O grupo LTB/GnRH-E/A recebeu a quimera expressa em E. coli adsorvida em adjuvante oleoso. O grupo LTB recebeu a proteína LTB expressa em E. coli. Os grupos Controle e Controle/A não receberam nenhum antígeno vacinal. O grupo Vacina comercial recebeu vacina comercial anti-GnRH utilizada em bovinos. A resposta imune humoral foi avaliada pela técnica de ELISA indireto e o potencial imunocontraceptivo foi avaliado por meio da quantificação de testosterona sérica e das análises histológicas das gônadas dos animais. Os grupos que receberam os antígenos LTB/GnRH (25 μg por vacina) apresentaram níveis de IgG total significativamente superiores quando comparados aos grupos controle, mostrando que ambos os antígenos são imunogênicos. Os grupos LTB/GnRH-P e LTB/GnRH-P/A apresentaram as maiores absorbâncias nos dias 28 (1,11 ± 0,09) e 42 (1,44 ± 0,04), respectivamente. Além disso, o grupo LTB/GnRH-P/A apresentou níveis de testosterona significativamente menores ao controle a partir do dia 28 (192 ng/dl ± 254,55). Os grupos LTB/GnRH-E e LTB/GnRH-E/A também obtiveram os maiores níveis de anticorpos nos dias 28 (0,33 ± 0,005) e 42 (1,44 ± 0,08), respectivamente. O grupo LTB/GnRH-E/A apresentou níveis de testosterona significativamente menores ao controle a partir do dia 28 (<12 ng/dl ± 0). Os resultados da histologia mostraram que ambos os antígenos causam alterações na espermatogênese, sendo que o antígeno expresso em E. coli foi relacionado com as maiores alterações nas gônadas. O presente estudo mostrou quimeras produzidas através da fusão da LTB com uma única molécula de GnRH é capaz de induzir a geração de resposta imune humoral, bloqueio das funções endócrinas relacionadas com a reprodução e alterações teciduais nas gônadas de camundongos machos. / Immunocontraception is recognized as one of the major new contraceptive methods for the control and management of fertility in different animal species. Among the potential targets used in contraceptive vaccines, gonadotropin-releasing hormone (GnRH) is considered one of the most attractive. GnRH is a hypothalamic decapeptide that presents a central role in mammalian reproduction. However, due to its low immunogenicity, it is necessary to associate the GnRH with a carrier molecule capable of stimulating the immune system such as, for example, the B subunit of Escherichia coli heat-labile enterotoxin (LTB). The present study aimed to evaluate the immunocontraceptive potential of two LTB/GnRH chimeras in male BALB/c mice. Mice were randomly divided into eight experimental groups. The LTB/GnRH-P group received the chimera expressed in P. pastoris. The LTB/GnRH-P/A group received the chimera expressed in P. pastoris adsorbed in oil adjuvant. The LTB/GnRH-E group received the chimera expressed in E. coli. The LTB/GnRH-E/A group received the chimera expressed in E. coli adsorbed in oil adjuvant. The Control and Control/A groups did not receive vaccine antigen. The Commercial vaccine group received an anti-GnRH commercial vaccine used in cattle. The humoral immune response was evaluated by indirect ELISA and the immunocontraceptive potential was assessed through the quantification of serum testosterone and the histological analysis of animal’s gonads. The groups that received LTB/GnRH antigens (25 μg per vaccine) presented total IgG levels significantly higher when compared to the control groups, showing that both antigens are immunogenic. The LTB/GnRH-P and LTB/GnRH-P/A groups showed higher absorbances at days 28 (1,11 ± 0,09) and 42 (1,44 ± 0,04), respectively. Furthermore, the LTB/GnRH-P/A group presented testosterone levels significantly lower to the control from day 28 (192 ng/dl ± 254,55). The LTB/GnRH-E and LTB/GnRH-E/A groups also obtained the highest antibody levels at days 28 (0,33 ± 0,005) and 42 (1,44 ± 0,08), respectively. The LTB/GnRH-E/A group presented testosterone levels significantly lower to the control from day 28 (<12 ng/dl ± 0). The results from histology showed that both antigens cause changes in spermatogenesis, wherein the antigen expressed in E. coli was associated with major changes in gonads. The present study showed that chimeras produced through the merge of LTB with a single GnRH molecule is capable to induce the generation of humoral immune response, block of the endocrine functions related to reproduction, and tissue alterations in the gonads of male mice.

Made available in DSpace on 2016-06-17T14:14:16Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1914 bytes, checksum: 7d48279ffeed55da8dfe2f8e81f3b81f (MD5) Tese_Fred_Luciano_Neves_Santos.pdf: 7174621 bytes, checksum: af4e9021f0c8974198df6ec268ccfaf9 (MD5) Previous issue date: 2016 / Made available in DSpace on 2016-07-05T22:07:11Z (GMT). No. of bitstreams: 3 Tese_Fred_Luciano_Neves_Santos.pdf.txt: 436440 bytes, checksum: 1d22503c32c1f332f780c4197a546123 (MD5) Tese_Fred_Luciano_Neves_Santos.pdf: 7174621 bytes, checksum: af4e9021f0c8974198df6ec268ccfaf9 (MD5) license.txt: 1914 bytes, checksum: 7d48279ffeed55da8dfe2f8e81f3b81f (MD5) Previous issue date: 2016 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil / O diagnóstico da doença de Chagas crônica (DCC) baseia-se em metodologias que usam em sua fase sólida antígenos brutos, semipurificados ou recombinantes, podendo resultar em baixa sensibilidade ou reação cruzada. Uma forma para resolver este problema é o uso de quimeras formadas por epítopos conservados e repetitivos de diferentes estruturas parasitárias em uma única molécula. O nosso objetivo foi caracterizar e avaliar o uso de quimeras em imunoensaios para o diagnóstico da DCC. As quimeras, IBMP-8.1, IBMP-8.2, IBMP-8.3 e IBMP-8.4 foram purificadas por meio de cromatografia e sua pureza avaliada por SDSPAGE. Ensaios de dicroísmo circular (DC) e espalhamento dinâmico da luz (EDL) foram usados para avaliação do raio hidrodinâmico das quimeras, avaliação de sua estabilidade e escolha do sistema tampão que oferecesse o menor estado de agregação molecular. Ensaios sorológicos para detecção de anticorpos anti-Trypanosoma cruzi através de ELISA foram realizados utilizando um painel de 857 amostras positivas para a DCC e 689 negativas. Para avaliação de reação cruzada foram usadas 1079 amostras de diversas doenças endêmicas no país. A purificação foi eficiente uma vez que o SDS-PAGE indicou ausência de degradação das quimeras. As análises de DC e EDL mostraram que as quatro quimeras apresentaram menor tendência de agregação em tampão carbonato pH 9,6, sendo, assim, este o sistema para a sensibilização das placas. Os ensaios sorológicos revelaram valores elevados de sensibilidade (Sen) e especificidade (Esp) para a molécula IBMP-8.4 (Sen-99,3%; Esp- 100%). O desempenho para as demais moléculas foi satisfatório, ficando os valores de Sen e Esp acima de 94%. As moléculas IBMP-8.1, IBMP-8.2, IBMP-8.3 e IBMP-8.4 apresentaram respectivamente 0,46%, 0,85%, 0,46% e 0,37% de reação cruzada. Os resultados apontam que as quimeras atingiram os critérios de proficiência do Ministério da Saúde podendo, dessa forma, ser utilizados em ensaios diagnósticos para a DCC. Chronic Chagas disease (CCD) diagnosis is based on serological methods employing crude, semipurified or recombinant antigens, which eventually may result in low sensitivity or crossreactivity. An alternative method for solving this problem is the use of chimeric molecules composed by conserved and repetitive epitopes of distinct parasite structures. Our objective was to evaluate the use of chimeras in immunoassays for the diagnosis of CCD. The chimeras IBMP-8.1, IBMP-8.2, IBMP-8.3 and IBMP-8.4 were purified by chromatography and their purity assessed by SDS-PAGE. Circular dichroism (CD) and dynamic light scattering (DLS) were used to assess the hydrodynamic radius of the chimeras, to evaluate their stability and to select the buffering system that offers the lowest state of molecular aggregation. Serological tests for detection of anti-Trypanosoma cruzi were performed by ELISA using a panel of 857 positive and 689 negative serum samples for CCD. Cross-reactivity was assessed by using 1079 serum samples from patients with unrelated diseases. The purification was efficient since SDS-PAGE indicated the absence of degradation of chimeric proteins. Analyses of CD and DLS showed that the four chimeras had low aggregation tendency in carbonate buffer, pH 9.6. Serological testing showed high values of sensitivity (Sen) and specificity (Spe) for IBMP-8.4 (Sen-99.3%; Spe-100%). The performance of other molecules was satisfactory, being the Sen and Spe values above 94%. Cross-reaction was observed in 0.46%, 0.85%, 0.46% and 0.37% of the samples tested against IBMP-8.1, IBMP-8.2, IBMP-8.3 and IBMP- 8.4, respectively. The results indicate that the chimeras reached the Brazilian Ministry of Health proficiency criteria and may thus be used in diagnostic assays for CCD.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:21:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 5135.pdf: 1934880 bytes, checksum: 392e2dc3d6c55b9eb87de4bb33adec6d (MD5) Previous issue date: 2013-02-05 / Universidade Federal de Sao Carlos / The sugarcane bagasse is a lignocellulosic material that can be converted into ethanol by action of cellulases and xylanases. These enzymes act synergistically to convert cellulose and hemicellulose into glucose. In order to obtain an enzyme that can perform dual function, a chimeric enzyme cellulase-xylanase denominated ThEg3Xyn3, was constructed by gene fusion in our laboratory. The fusion was performed by binding the C-terminus of an endoglucanase from Trichoderma harzianum to the N-terminus of a xylanase of the same fungus, separated by a linker. The chimeric enzyme was recombinantly produced in Pichia pastoris and purified for kinetic and biochemical characterization. The chimera demonstrated activity of both enzymes with maximum activity at 38 °C and pH 6.0, under these conditions, cellulolytic and xylanolytic activity was greater than of the parental enzymes. The results demonstrate that the chimeric enzyme can be efficient in hydrolysis of the biomass and satisfactory for the production of ethanol by the process of simultaneous saccharification and fermentation. / O bagaço da cana-de-açúcar é um material lignocelulósico que pode ser convertido em etanol pela ação de celulases e xilanases. Essas enzimas atuam sinergicamente para converter celulose e hemicelulose em glicose. A fim de obter uma enzima capaz de realizar dupla função, uma enzima quimérica celulase-xilanase denominada ThEg3Xyn3, foi construída em laboratório. A fusão foi realizada pela ligação do C-terminal de uma endoglucanase do fungo Trichoderma harzianum ao N-terminal de uma xilanase do mesmo fungo, separadas por um linker. A enzima quimérica foi recombinantemente produzida em Pichia pastoris e purificada para caracterização cinética e bioquímica. A quimera demonstrou atividade de ambas as enzimas com atividade máxima a 38 °C e pH 6,0, sob estas condições, a atividade celulolítica e xilanolítica foi maior do que das enzimas parentais. Os resultados demonstram que a enzima quimérica pode ser eficiente na hidrólise da biomassa e satisfatória para a produção de etanol pelo processo de sacarificação e fermentação simultâneas.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:37:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_alceu_santos_junior.pdf: 1787319 bytes, checksum: 33ba7f2289b9ac4a868e567f7462444a (MD5) Previous issue date: 2013-02-22 / The intracellular protozoan Neospora caninum, is considered the main causative agent of abortion in cattle. Infection occurs by ingestion of sporulated oocysts in the environment, first occurs systemic parasitemy characterizing acute phase of infection and subsequent chronic phase with formation of tissue cysts, thus persisting the infected and the asymptomatic host. Diagnosis is made by serologic tests. Currently, there are no data to ensure the effectiveness of commercial vaccine available for cattle. Apical complex antigens of the parasite are being studied, since they have an important role in infection. The rhoptries, secretory glands present in this region of the parasite N. caninum, play an important role in invasion and formation of parasitophago vacuoles, these properties have generated interest in its use in experimental vaccine formulations. Experimentally it showed partial results of protection in challenge, when fused to other proteins of this protozoan, the protection was increased, suggesting that antigens fusion is effective for protection against N. caninum. This work produced a new chimeric antigen, originated from the fusion of ROP² N. caninum with the B subunit of heat labile enterotoxin of Escherichia coli. The construction of the chimera was accomplished by cloning in sequence where ROP² gene was inserted directly into the N-terminus of LTB. The construction ROP²/LTB was expressed in E. coli strain BL 21 (DE3) StarTM where it presented a size of approximately 24kDa. The fusion antigen did not impair the antigenicity when tested against positive bovine serum by immunofluorescence, the Western blot technique, therefore, show great potential for use as a recombinant vaccine. / O protozoário intracelular Neospora caninum, é considerado principal agentes causadores de aborto em bovinos. A infecção ocorre pela ingestão de oocistos esporulados no ambiente, inicialmente ocorre parasitemia sistêmica caracterizando fase aguda da infecção e posteriormente fase crônica com formação de cistos teciduais, permanecendo assim o hospedeiro infectado e assintomático. O diagnóstico é feito através de provas sorológicas. Atualmente, não há dados que assegurem a eficácia da vacina comercial disponível para bovinos. Antígenos do complexo apical do parasito estão sendo estudados, pois apresentam papel importante na infecção. As roptrias, glândulas secretoras presente nesta região do parasito N. caninum, desempenham papel importante na invasão e formação do vacúolo parasitófago, essas propriedades produziram interesse na sua utilização em formulações de vacina experimentais. Experimentalmente apresentou resultados parciais de proteção ao desafio, quando fusionada a outras proteínas deste protozoário, aumentou a proteção, sugerindo que fusão de antígenos é eficiente para proteção contra N. caninum. O presente trabalho produziu um novo antígeno quimérico, originado da fusão entre ROP² de N. caninum com a subunidade B, da enterotoxina termolábil de Escherichia coli. A construção da quimera foi realizada por clonagem em sequência, onde gene ROP² foi inserido diretamente na porção N-terminal da LTB. A construção, ROP²/LTB, foi expressa em cepa E. coli BL 21 (DE3) StarTM onde apresentou tamanho de aproximadamente 24kDa. A fusão de antígeno não prejudicou a antigenicidade quando testado frente a soro bovino positivo por Imunofluorescência, na técnica de Western blot, portanto, apresentando grande potencial para ser utilizado como vacina recombinante.

Submitted by Eunice Novais (enovais@uepg.br) on 2018-04-18T18:15:46Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Santos, Moises Souza.pdf: 3654988 bytes, checksum: 6bcf0d0867a3d40291ae626664114a49 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-18T18:15:46Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Santos, Moises Souza.pdf: 3654988 bytes, checksum: 6bcf0d0867a3d40291ae626664114a49 (MD5) Previous issue date: 2018-03-01 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A importância do estudo de estados quimera em redes neuronais reflete no fato destes possuírem uma forte ligação com alguns tipos de anomalias diagnosticadas no cérebro, por exemplo, epilepsia,mal de Parkinson e Alzheimer. Neste trabalho, realizamos um estudo da aplicação dos gráficos de recorrência, em sua versão espacial, na caracterização da coexistência de estados coerentes e incoerentes em sistemas dinâmicos acoplados. Utilizamos um modelo constituído de osciladores de fase para uma primeira abordagem da matriz de recorrência. Nossos resultados indicam que os diagnósticos quantitativos, baseados no gráfico de recorrência, detectam não só a existência de estados quimera como também estados sincronizados e dessincronizados que por ventura emergem na rede. Sobre esse aspecto, mostramos que a análise via recorrência espacial é superior à utilização do parâmetro de ordem global pós-colapso de estados quimera. Este cenário ocorre em algumas situações onde a rede exibe quimera e esta subitamente desaparece do sistema, que passa a exibir um comportamento sincronizado na frequência de seus osciladores. Neste caso, o parâmetro de ordem global não identifica esta mudança de comportamento sendo necessário uma interpretação via outro diagnóstico. Também utilizamos a rede de conectividade cortical de gato, como forma de acoplamento, e distinguimos duas formas de estados híbridos: uma quimera com a região incoerente em dinâmica temporal de spikes e outra quimera onde a região incoerente apresenta dinâmica temporal de bursts. Identificamos que este último caso de estados quimera possui maior robustez com relação à perturbação externa aplicada no sistema.Concluímos que a região de quimera com bursts necessita de uma intensidade de perturbação duas vezes superior que a região de spikes para deixar de existir na rede de neurônios. / A importância do estudo de estados quimera em redes neuronais reflete no fato destes possuírem uma forte ligação com alguns tipos de anomalias diagnosticadas no cérebro, por exemplo, epilepsia, mal de Parkinson e Alzheimer. Neste trabalho, realizamos um estudo da aplicação dos gráficos de recorrência, em sua versão espacial, na caracterização da coexistência de estados coerentes e incoerentes em sistemas dinâmicos acoplados. Utilizamos um modelo constituído de osciladores de fase para uma primeira abordagem da matriz de recorrência. Nossos resultados indicam que os diagnósticos quantitativos, baseados no gráfico de recorrência, detectam não só a existência de estados quimera como também estados sincronizados e dessincronizados que por ventura emergem na rede. Sobre esse aspecto, mostramos que a análise via recorrência espacial é superior à utilização do parâmetro de ordem global pós-colapso de estados quimera. Este cenário ocorre em algumas situações onde a rede exibe quimera e esta subitamente desaparece do sistema, que passa a exibir um comportamento sincronizado na frequência de seus osciladores. Neste caso, o parâmetro de ordem global não identifica esta mudança de comportamento sendo necessário uma interpretação via outro diagnóstico. Também utilizamos a rede de conectividade cortical de gato, como forma de acoplamento, e distinguimos duas formas de estados híbridos: uma quimera com a região incoerente em dinâmica temporal de spikes e outra quimera onde a região incoerente apresenta dinâmica temporal de bursts. Identificamos que este último caso de estados quimera possui maior robustez com relação à perturbação externa aplicada no sistema.Concluímos que a região de quimera com bursts necessita de uma intensidade de perturbação duas vezes superior que a região de spikes para deixar de existir na rede de neurônios

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:32:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_carla_pohl_sehn.pdf: 1038153 bytes, checksum: 075d58210f65d23825bbd6f9adff7315 (MD5) Previous issue date: 2010-07-29 / The association of vaccine antigens to potent immunological adjuvants is a key strategy to improve the performance of subunit vaccines. Adjuvants are components that, when used in combination with a specific antigen, induce more immunity that the antigen alone. Microbial products have been used as adjuvant, including the B subunit of the thermo labile entherotoxin of Escherichia coli (LTB), which is atoxic. LTB is known by its great efficiency as mucosal immunity adjuvant and this activity depends on the shape of the antigen combination (co-administered or fused), on the immunization route (mucosal or parentheral) and the dosage. This study aims to evaluate the adjuvant activity of recombinant LTB (rLTB), both as chimeric and coadministered orally or intramuscularly, using the major fimbrial unit type 1 (FimA) of Salmonella Enteritidis as antigen. BALB/c mice were immunized orally or intramuscularly with three doses of rLTB or PBS (controls) or rFimA, rFimA associated with Freund's incomplete adjuvant (rFimA+AI, i.m. immunized animals), co-administered or fused to LTB (chimera). The levels of total systemic antibodies, IgG1, IgG2a and IgA anti-rFimA were measured by ELISA and an animal protection assay against S. Typhimurium infection was performed. The results show that rLTB only showed adjuvant activity that resembled the commercial adjuvant when coadministered intramuscularly to rFimA and for totals antibody production. These results confirm that the action of adjuvant rLTB is influenced by the shape of binding to the antigen (fused or co-administered) and route of administration. Immunizations did not induce protection of mice challenged with S. Typhimurium, but survival time was greater among animals immunized with only the rFimA and rFimA+AI. Furthermore, the total antibody titer, IgG1 and IgG2a obtained by the chimeric form, both orally as intramuscularly, were similar to those obtained by the animal only immunized with rFimA. These results suggest that rFimA has a possibility of having an adjuvant capability rFimA. / A associação de antígenos vacinais a potentes adjuvantes imunológicos é uma estratégia fundamental para melhorar o desempenho de vacinas de subunidade. Adjuvantes são substâncias que, usadas em combinação com um antígeno específico, induzem mais imunidade que o antígeno sozinho. Produtos microbianos, como a subunidade B da enterotoxina termolábil de Escherichia coli (LTB), que é atóxica, têm sido utilizados com esse propósito. A LTB é reconhecida por sua grande eficiência como adjuvante da imunidade de mucosa e essa capacidade depende da forma de combinação ao antígeno (co-administrada ou fusionada), da via de imunização (mucosa ou parenteral) e da dose administrada. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a atividade adjuvante da subunidade B recombinante da enterotoxina termolábil de Escherichia coli, fusionada ou co-administrada, por via oral (v.o.) ou intramuscular (i.m.), utilizando a subunidade fimbrial principal recombinante da fímbria tipo 1 (FimA) de Salmonella Enteritidis como antígeno. Para isso, camundongos BALB/c foram imunizados v.o. e i.m. com 3 doses de rLTB, PBS (controles) ou rFimA, ou rFimA associada a adjuvante de Freund incompleto (rFimA+AI, animais imunizados via i.m.), co-administrada ou fusionada a LTB (quimera). Os níveis de anticorpos sistêmicos totais, IgG1, IgG2a e IgA anti-rFimA foram mensurados por ELISA e um ensaio de proteção animal contra infecção por S. Typhimurium foi realizado. Os resultados obtidos demonstraram que a rLTB apresentou atividade adjuvante estatisticamente semelhante a do adjuvante comercial somente quando co-administrada i.m. a rFimA e em relação a produção de anticorpos totais. Esses resultados confirmam que a ação adjuvante da rLTB é influenciada pela forma de ligação ao antígeno (fusionada ou co-administrada) e pela via de administração. As imunizações não induziram proteção de camundongos desafiados com S. Typhimurium, porém o tempo de sobrevivência foi maior entre os animais imunizados somente com a rFimA e rFimA+AI. Além disso, os níveis de anticorpos totais, IgG1 e IgG2a obtidos pela forma quimérica imunizada tanto v.o. quanto i.m., foram semelhantes àqueles obtidos pelos animais imunizados somente com a rFimA. Os resultados obtidos apontam para uma possível atividade adjuvante da proteína rFimA.