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Previous issue date: 2008-11-13 / A tuberculose (TB), doen?a infecto contagiosa, causada pelo Mycobacterium tuberculosis, ? a maior causa de morte por agente infeccioso do mundo. O aumento da incid?ncia de cepas multi-resistentes (MDR-TB) e extensivamente resistentes (XDR-TB) tem contribu?do para o aumento do n?mero de mortes. Por este motivo, h? a necessidade de estudos para identificarmos, no metabolismo da micobact?ria, poss?veis alvos para o desenvolvimento de drogas capazes de combater estas novas cepas. Em bact?rias, as rotas de interconvers?o de nucleot?deos pirimid?nicos s?o importantes em in?meros processos essenciais, incluindo a bios?ntese de DNA, RNA e fosfolip?dios. O gene (cmk, Rv1712) que codifica a enzima citidina monofosfato quinase (CMK) foi descrito, por homologia de seq??ncia, no genoma de M. tuberculosis. Neste trabalho o gene cmk foi amplificado por PCR e clonado em vetor de express?o. A prote?na CMK foi expressa em grande escala e purificada. O produto homog?neo desta purifica??o sofreu seq?enciamento N-terminal e espectrometria de massa. Os resultados da cin?tica em estado estacion?rio mostraram que o gene cmk de M. tuberculosis codifica a prote?na monom?rica CMK, que fosforila preferencialmente CMP e dCMP, e que UMP ? um substrato pobre. Estes resultados refor?am a presen?a de uma nucleot?deo monofosfato quinase espec?fica para UMP em M. tuberculosis. Os par?metros cin?ticos fornecidos pelo ensaio e an?lise dos gr?ficos de duplo-rec?proco mostraram que a enzima forma um complexo tern?rio e que seu mecanismo ? seq?encial. Um poss?vel papel para a enzima CMK ? discutido.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:tede2.pucrs.br:tede/5326 |
| Date | 13 November 2008 |
| Creators | Thum, Caroline |
| Contributors | Basso, Luiz Augusto |
| Publisher | Pontif?cia Universidade Cat?lica do Rio Grande do Sul, Programa de P?s-Gradua??o em Biologia Celular e Molecular, PUCRS, BR, Faculdade de Bioci?ncias |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da PUC_RS, instname:Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul, instacron:PUC_RS |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 8198246930096637360, 600, 600, 36528317262667714 |
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