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Aplicação de polímeros como matrizes no desenvolvimento de biossensores e na purificação de proteínas

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Previous issue date: 2006 / Atualmente, vários estudos têm sido direcionados à tentativa de melhoramento do
desempenho dos biossensores. Os polímeros condutores e não condutores têm sido
utilizados tanto no aprimoramento dos diferentes modos de transdução de sinais biológicos
quanto na disponibilização de grupos químicos para imobilização de biomoléculas. Neste
trabalho, a utilização do polímero quitosana depositado sobre ouro para imobilização de
imunoglobulinas G foi avaliada a partir do método de ELISA e através de um biossensor
piezoelétrico, o qual é composto por uma microbalança de cristal de quartzo. Com a
presença do polímero, absorbâncias três vezes mais altas foram obtidas e a alteração na
freqüência de ressonância do cristal após a imobilização dos anticorpos aumentou de
14.19% (±2.43) para 24.34% (±0.75). A prata epoxy, polímero condutor, foi utilizada na
fabricação de eletrodos de trabalho para construção de um biossensor amperométrico para
detecção de lactato desidrogenase. Outros compostos como grafite e
tetracianoquinodimetano também foram utilizados na composição da pasta condutora. Na
voltametria cíclica, com NADH e glutaraldeído adsorvidos na superfície do eletrodo, uma
corrente anódica foi gerada em 0.5V na presença da lactato desidrogenase e piruvato devido
à oxidação eletroquímica do NADH. Os eletrodos mostraram ser reproduzíveis nas
condições eletrolíticas testadas apresentando boa sensibilidade (1.5μA (U/L)-1). Entretanto,
o potencial encontrado pode levar a uma baixa seletividade do biossensor em decorrência
da oxidação de espécies interferentes presentes no soro. A enzima lactato desidrogenase foi
pré-purificada a partir de sistemas bi-fásicos aquosos compostos de citrado de sódio e
polietilenoglicol que é um polímero inerte. Um planejamento fatorial foi utilizado nas
análises estatísticas e a massa molecular do polímero foi a variável que apresentou maiorinfluência sobre o fator de purificação e rendimento da lactato desidrogenase. A enzima
apresentou o maior fator de purificação de 7.9, com rendimento de 100% de sua atividade

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/2048
Date January 2006
CreatorsFerreira Frade de Araújo, Rosângela
ContributorsLuiz de Lima Filho, José
PublisherUniversidade Federal de Pernambuco
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
Sourcereponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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