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Expressão heteróloga, purificação e caracterização de proteínas transmembrana de Mycoplasma hyopneumoniae / Heterologous expression, purification and characterization of transmembrane protein of Mycoplasma hyopneumoniae

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Previous issue date: 2008-11-27 / Mycoplasma hyopneumoniae is the etiological agent of swine enzootic pneumonia
(EP), one the most common respiratory diseases of pigs worldwide. The disease is
characterized by retarded growth rate in animals of mid-finishing to slaughter age,
causing significant economic losses to swine production. Vaccination is the most
cost-effective strategy for the control of this disease. However, the vaccines against
the disease available on the market have a high production cost and only offer partial
protection, not preventing the establishment from infection and the presence of pigs
carriers. This issue highlights the need for the use of new strategies aiming at
circumventing this problem. The recombinant DNA technology is an important tool for
the development of vaccines. The publication of the sequence of three genomes of M.
hyopneumoniae, two pathogenic strains (232 and 7448) and a non-pathogenic (J) is
helping the researches, and accelerating the process of identification of new
antigenic proteins. From the sequence data and proteomic analysis, it was possible
to identify coding sequences (CDS) of transmembrane proteins. These antigens were
cloned and expressed using E. coli as an expression system. A total of seven
recombinant proteins were purified and evaluated regarding immunogenicity in mice
and antigenicity with sera from animals with EP. All the antigens evaluated were able
to induce a significant immune response in mice. The evaluation of antigenicity
properties revealed the proteins reacted with sera from pigs infected with M.
hyopneumoniae. The recombinant proteins evaluated in this study may be of value to
use in the development of vaccines and tests for immunodiagnosis of swine enzootic
pneumonia. / Mycoplasma hyopneumoniae é o agente etiológico da pneumonia enzoótica suína
(PES), uma das doenças respiratórias de suíno mais comum em todo o mundo. Ela
é caracterizada por retardo no desenvolvimento em animais na fase de crescimento
e terminação, causando perdas econômicas consideráveis na indústria suinícola. A
vacinação parece ser a forma mais efetiva de controlar a PES, entretanto, as vacinas
contra a doença disponíveis no mercado apresentam um elevado custo de produção
e conferem uma proteção parcial, não impedindo o estabelecimento da infecção e
nem a presença de suínos portadores. Desta forma, surge à necessidade da
utilização de novas estratégias visando contornar este problema. A tecnologia do
DNA recombinante constitui uma ferramenta importante para o desenvolvimento de
vacinas. As publicações das seqüências de três genomas de M. hyopneumoniae, duas
cepas patogênicas (232 e 7448) e uma não patogênica (J) estão contribuindo com
pesquisas e, acelerando o processo de identificação de novas proteínas
imunogênicas. A partir dos dados gerados e da análise proteômica complementar,
foi possível a identificação de seqüências codificadoras (CDS) de proteínas
transmembrana. Estas seqüências foram clonadas e expressas em E. coli. Um total
de sete proteínas recombinantes foram purificadas e avaliadas quanto à
imunogenicidade em camundongos e à antigenicidade frente a soros de suínos com
PES. Todas as proteínas avaliadas foram capazes de induzir uma resposta imune
significativa em camundongos. O estudo das propriedades antigênicas revelou que
estas são reconhecidas pelo soro de suínos infectados com M. hyopneumoniae. As
proteínas recombinantes avaliadas neste estudo poderão ser de valia para utilização
como vacinas de subunidade e em testes de imunodiagnóstico da PES.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpel.edu.br:123456789/1262
Date27 November 2008
CreatorsMarchioro, Silvana Beutinger
ContributorsCPF:42251850015, http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4723107D9, Conceição, Fabrício Rochedo, CPF:91985757087, http://lattes.cnpq.br/9342312279387017, Dellagostin, Odir Antônio
PublisherUniversidade Federal de Pelotas, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, UFPel, BR, Biotecnologia
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguageEnglish
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Repositório Institucional da UFPEL, instname:Universidade Federal de Pelotas, instacron:UFPEL
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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