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Protocolo para avaliação da expressão gene ABL sob estresse radioativo

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Previous issue date: 2008 / As crescentes aplicações das radiações ionizantes, associadas à evolução das técnicas de
análises moleculares, têm despertado grande interesse para identificação de marcadores
moleculares de irradiação ocupacional ou acidental. Alguns genes envolvidos na resposta
molecular ao estresse radioativo foram identificados pela alteração de sua capacidade de
expressão. Entretanto, os métodos comumente utilizados para avaliação da expressão
gênica são laboriosos e de alto custo. Neste trabalho, o gene ABL foi utilizado como base
no estabelecimento de um protocolo para avaliação da expressão gênica em linfócitos, após
irradiação gama. Para tanto, foram testadas amostras de sangue periférico de indivíduos
sadios após 3, 6 e 12 horas de irradiação com doses de 1 e 3 Gy a partir de uma fonte de
Cobalto-60. A técnica de avaliação empregada foi a de Reação em Cadeia da Polimerase
em Tempo Real, tendo o fluoróforo Sybr green como intercalante de DNA. Em todas as
etapas, amostras não irradiadas foram empregadas como controle. O RNA foi extraído dos
linfócitos totais e o cDNA, sintetizado pelo método de transcrição reversa. Com base no
protocolo desenvolvido, foi possível identificar um aumento na expressão do gene ABL na
dose de 1 Gy, após seis horas. Entretanto, não foram evidenciadas variações
estatisticamente significantes dos níveis de expressão desse gene nas demais condições
analisadas. O protocolo estabelecido nessa pesquisa mostrou-se de fácil reprodução e
rápido. Os recursos empregados para avaliação de sua eficácia constataram a
confiabilidade do método, sugerindo sua aplicação em análises tanto dos níveis de
expressão do gene ABL, quanto em investigações de genes candidatos a biomarcadores
moleculares de exposição à radiação ionizante

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/9821
Date31 January 2008
CreatorsCoeli de Barros Correia Melo, Fárida
Contributorsde Jesus Amaral, Ademir
PublisherUniversidade Federal de Pernambuco
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Sourcereponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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