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Estudo imunoistoquímico dos processos das reabsorções radiculares fisiológica e inflamatória de dentes decíduos

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Odontologia / Made available in DSpace on 2013-03-04T20:53:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1
305391.pdf: 14996835 bytes, checksum: 31d2bf6c91cf1c9a54fb59562700b0a3 (MD5) / Este estudo foi realizado com o objetivo de analisar, histologicamente, as características morfológicas e comparar a expressão imunoistoquímica de fatores envolvidos na reabsorção radicular: RANKL (ligante do receptor ativador do fator nuclear kappa B) e OPG (osteoprotegerina), e na inflamação: iNOS (óxido nÌtrico sintase induzida) e MMP-9 (metaloproteinase da matriz 9) do ligamento periodontal e polpa de dentes decíduos com reabsorção fisiológica com aqueles com reabsorção radicular patológica inflamatória. Dez dentes decíduos hígidos com reabsorção fisiológica (grupo I), dez com reabsorção radicular patológica inflamatória (grupo II) e dez dentes permanentes (controle negativo) (grupo III) foram coletados, processados histologicamente e corados por meio da técnica de hematoxilina e eosina (HE), para caracterização tecidual, e submetidos a reação imunoistoquímica para detecção da expressão de iNOS, MMP-9, OPG e RANKL. Os resultados foram documentados utilizando câmera digital, acoplada ao microscópio de luz. Para a análise dos níveis de expressão dos marcadores, a intensidade total de pixels nas áreas de marcação foi determinada e os índices foram apresentados como densidade óptica (DO) utilizando o aumento de 400x. Os dados foram expressos como média erro padrão da média (EPM) de 10 dentes por grupo. A avaliação estatística dos resultados foi realizada através da análise de variância (ANOVA) de uma via, seguido do teste post hoc de Student Newman-Keuls. Valores de P menores a 0,05 (p<0,05) foram considerados estatisticamente significantes. Nos locais onde o ligamento periodontal e a polpa ainda estavam preservados, as características estruturais e morfológicas foram semelhantes tanto em dentes decíduos com reabsorção fisiológica como naqueles com reabsorção radicular patológica inflamatória associada e nos elementos permanentes. Contudo, o nível de iNOS, no ligamento periodontal e polpa dos dentes do grupo II foi significativamente maior (p<0,05). Em relação à expressão de RANKL, no ligamento dos dentes do grupo II foi estatisticamente superior quando comparado, tanto ao observado no grupo I (p<0,05), como no grupo III (p<0,001). Ainda, houve diferença expressiva entre os grupos I e III, onde o grupo I apresentou maior expressão (p<0,001). O nível de RANKL no tecido pulpar dos dentes do grupo II também foi significativamente maior, quando comparado aos demais grupos (p<0,05). A expressão de OPG nos dentes do grupo II foi menor em relação aos demais grupos, tanto no ligamento periodontal (p<0,001) quanto no tecido pulpar (p<0,05). O nível de MMP-9 no ligamento periodontal dos dentes do grupo II foi estatisticamente maior, quando comparado, tanto ao observado no grupo I (p<0,001) como no grupo III (p<0,05) enquanto que na polpa não houve diferença entre os grupos. Pode-se concluir que o ligamento periodontal e a polpa de dentes decíduos com reabsorção fisiológica apresentam características estruturais e morfológicas semelhantes àqueles com reabsorção radicular patológica inflamatória associada e dentes permanentes, quando comparadas áreas sem reabsorção. O ligamento periodontal e a polpa de dentes decíduos com reabsorção radicular patológica inflamatória parecem apresentar características estruturais e moleculares que podem estar associadas a uma maior susceptibilidade à reabsorção radicular, quando comparado aos dentes decíduos com reabsorção radicular fisiológica. O tecido pulpar dos dentes decíduos parece ter participação ativa no processo de reabsorção radicular, seja este fisiológico ou inflamatório. / The aim of this study was to analyze, histologically, morphological characteristics, and to compare the immunohistochemical expression of factors related to root resorption: RANKL (ligand of the receptor activator of nuclear kappa B fator) and OPG (osteoprotegerin), as well as to inflammation: iNOS (inducible nitric oxide synthase) and MMP-9 (matrix metalloproteinase 9) in periodontal ligament and pulp tissues of primary teeth with physiological root resorption and those undergoing pathological inflammatory root resorption. Ten healthy primary teeth with physiological root resorption (GI), 10 teeth undergoing pathological inflammatory root resorption (GII) and 10 permanent teeth (negative controls) (GIII) were collected, histologically processed and stained with H&E for tissue characterization or submitted to immunohistochemistry for the detection of iNOS, MMP-9, OPG e RANKL expressions. Data were documented using a digital camera attached to a light microscope. To analyze the expression levels of the studied molecules, total intensity of pixels in areas showing immunoreactivity was determined and data were presented as optical density (O.D.) using a 400x magiification. Data were expressed as mean ± standard error of the mean (SEM) of 10 teeth per group. Statistical evaluation of the results was performed by one-way analysis of variance (ANOVA), followed by Student Newman-Keuls#s post hoc test. P values less than 0.05 (p<0.05) were considered as statistically significant. In areas where the periodontal ligament and the pulp were still preserved, morphological and estructural characteristics of those tissues were similar in both primary teeth with pysiological root resorption and those undergoing pathological inflammatory root resorption, as well as in the permanent teeth. However, the level of iNOS, in the periodontal ligament and pulp of GII specimens was significantly higher (p<0.05). Regarding the expression of ANKL, it was statistically more expressed in the periodontal ligament of GII teeth, comparing to GI (p<0.05) and GIII (p<0.001). Moreover, there was a significant difference between GI and GIII, where GI presented higher expression (p<0.001). The level of RANKL in the pulp tissue of teeth from GII was also significantly higher when compared to the other two groups (p<0.05). OPG expression in teeth of GII was lower compared to the other groups, both in periodontal ligament (p<0.001) and pulp tissue (p<0.05). The level of MMP-9 in the periodontal ligament of GII teeth were statistically higher, when compared to GI (p<0.001) and GIII (p<0.05) while there was no difference in pulp among groups. It may be concluded that the periodontal ligament and pulp tissues of primary teeth undergoing physiological root resorption show similar structural and morphological characteristics as teeth with pathological inflammatory root resorption and ermanent elements, when considering not resorbed areas. These tissues in primary teeth undergoing pathological inflammatory root resorption seem to have molecular characteristics that may be related to a higher susceptibility to root resorption, when compared to physiologically resorbing teeth. The pulp tissue of deciduous teeth seems to have an active participation in the process of root resorption, both physiological and pathological inflammatory root resorption.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufsc.br:123456789/99484
Date January 2012
CreatorsSantos, Bianca Zimmermann dos
ContributorsUniversidade Federal de Santa Catarina, Cordeiro, Mabel Mariela Rodríguez, Bosco, Vera Lúcia
PublisherFlorianópolis
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
Format178 p.| il., grafs.
Sourcereponame:Repositório Institucional da UFSC, instname:Universidade Federal de Santa Catarina, instacron:UFSC
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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