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Previous issue date: 2010-04-27 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Tuberculosis (Tb) is an infectious disease of international distribution. Problems in the
diagnosis, as time requirement and high costs for implementation in public health care,
increases the number of the disease cases. Specifically about the most important antibiogram
assays, the “nitrate reduction assay” (MRN) provides faster results (7 to 14 days) than the
“proportion method (MP)” (28 days), however this last one is considered as “gold standard”
by the World Health Organization. The aim of this work was to evaluate modification in the
method of nitrate reduction (MRN), used to check the sensitivity of M. tuberculosis strains to
primary drugs administered for the treatment of TB, as an alternative to reduce costs and to
simplify this methodology, in order carry out it in the primary health care to verify the
resistance of TB. It was evaluated the accuracy (2X2 table) and agreement (observed
agreement and Kappa) between the MP and six variations of NRM: two sources of nitrate
(NaNO3 and KNO3); and three different media for solid cultivation (Middlebrook 7H10,
Löwenstein-Jensen and Ogawa). The drugs evaluated were: isoniazid (INH), rifampicin (RIF),
streptomycin (STR) and ethambutol (EMB); and the tests were conducted with: a strain of
Mycobacterium tuberculosis H37Rv (standard sensitivity), four resistant strains (different
patterns of resistance to each drug) and twenty-four clinical isolates with unknown antibiotic
susceptibility results. Under the studied conditions, excellent reproducibility and agreement
was obtained between the original NRM and the MP, confirming that the original NRM is an
alternative to antibiogram assays. In the assays carried out with modified MRN (potassium
nitrate was substituted by sodium nitrate) it was obtained faster results and full agreement
comparing with the results of the MP and the original MRN, indicating that this modified
medium could be used in antibiogram assays in the basic care health, since sodium nitrate is a
nitrogen source cheaper and more easily obtained. The result of the assays using STR, in all
variations of the MRN, indicates that are necessary further evaluation, especially using OG
medium. The Middlebrook medium presented recurrent contamination making impossible to
carry out analysis. / A Tuberculose (Tb) é uma doença infecto-contagiosa de caráter mundial, sendo que a demora
no seu diagnóstico é um dos fatores que intensificam o número de casos da doença. Os
métodos de diagnóstico convencionais demandam tempo e possuem custo elevados,
dificultando sua implantação nos laboratórios da rede básica de saúde. Entre os métodos de
antibiograma se destaca o método de redução de nitrato (MRN), que propicia um resultado
mais rápidos (de 7 a 14 dias) que o método das proporções (MP-28 dias), considerado padrão
ouro pela Organização Mundial de Saúde. O presente trabalho tem como objetivo, avaliar
modificações no método de redução de nitrato (MRN), utilizado para verificação da
sensibilidade de cepas de M. tuberculosis aos principais fármacos administrados na
terapêutica da Tb, como alternativa de baixo custo e de fácil realização pela rede básica de
saúde na verificação da resistência de Tb. No presente estudo, foi avaliada a acuidade (tabela
2X2) e concordância (concordância observada e índice Kappa) entre o MP, e seis variações de
MRN, nas quais foram utilizadas duas fontes de nitrato (KNO3 e NaNO3), acrescido a três
diferentes meios sólidos de cultivo, Middlebrook 7H10, Lowenstein-Jensen (LJ) e Ogawa
(OG). Os fármacos testados foram isoniazida (INH), rifampicina (RIF), estreptomicina (STR)
e etambutol (EMB) e os testes foram realizados com cepa de Mycobacterium tuberculosis
H37Rv (padrão de sensibilidade), quatro cepas (padrões de resistência diferentes a cada
fármaco) e vinte e quatro isolados clínicos com resultado de antibiograma desconhecido.
Devido a excelente reprodutibilidade e concordância do MRN original com o MP para os
quatro fármacos testados pode-se confirmar que o MRN é uma metodologia alternativa na
detecção de isolados de M. tuberculosis resistente aos principais fármacos utilizados na
terapêutica da Tb. O resultado de total concordância do MRN modificado pela substituição do
nitrato de potássio pelo nitrato de sódio com o MP e com o MRN original para os fármacos
RIF, INH e EMB, indica que a modificação é uma ótima alternativa para a rede básica de
saúde, visto que a fonte de nitrogênio é de fácil aquisição pelos serviços de saúde. Além disso,
mostrou ser mais rápido na liberação dos resultados. Os resultados do fármaco STR,
executado em todas as modificações do MRN, indicam a necessidade de avaliações futuras
em suas concentrações, principalmente quando utilizado no meio de OG. O meio
Middlebrook apresentou freqüentes contaminações em todos os ensaios realizados, não sendo
possível realizar sua análise.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:http://localhost:tede/4835 |
| Date | 27 April 2010 |
| Creators | Canto, Eveleise Samira Martins |
| Contributors | Salem , Julia Ignez, Sadahiro, Aya, Salem, Júlia Ignez, Naveca, Felipe Gomes, Nogueira, Patrícia Puccinelle Orlandi |
| Publisher | Universidade Federal do Amazonas, Programa de Pós-graduação em Ciências da Saúde, UFAM, Brasil, Faculdade de Medicina |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAM, instname:Universidade Federal do Amazonas, instacron:UFAM |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | -8840929574560075891, 600 |
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