Nenhuma / 3-Desoxi-3-[18F]Fluor-Timidina (18FLT) é um análogo radioativo do nucleosídeo
timidina usado desde 1998 em exames de tomografia por emissão de pósitrons (PET) para
diagnóstico de vários tipos de tumores, como de mama, pulmonar, colorretal, cerebral, entre
outros. Seu uso amplia a cobertura dos exames PET em diagnóstico de câncer, já que existem
limitações da [18F]Fludesoxiglicose (18FDG), o radiofármaco PET mais usado no mundo
atualmente. Para implementação da produção de 18FLT, na Unidade de Pesquisa e Produção
de Radiofármacos do Centro de Desenvolvimento da Tecnologia Nuclear (UPPR/CDTN), o
módulo de síntese de 18FDG foi adaptado usando-se 3 protocolos nos quais se variou a
concentração de etanol (0; 8 e 10% V/V). Também foram desenvolvidos testes de Controle de
Qualidade, como pH, determinação de catalisador, determinação de etanol e acetonitrila,
pureza química e radioquímica, entre outros. A formulação foi avaliada in vitro quanto a sua
segurança, pelos ensaios de viabilidade metabólica (MTT) e toxicidade clonogênica, e quanto
a sua eficácia para a detecção de tumores pelo ensaio de interação (Binding). Os rendimentos
corrigidos obtidos da síntese de 18FLT foram 6,52%; 253% e 233% para o 1, o 2 e o 3
protocolo, respectivamente. O produto do protocolo 3 (Etanol 8%) apresentou menor
citotoxicidade no teste in vitro MTT do que o do segundo (Etanol 10%). Além disso, a
formulação de 18FLT e as impurezas químicas presentes na mesma não afetaram a
clonogenicidade das células testadas. Com base nestes resultados o protocolo 3 foi escolhido
como a síntese padrão de 18FLT. A interação da 18FLT com as linhagens celulares foi
saturável, com ligação específica maior que 90%, atestando a eficácia do radiofármaco na
detecção de tumores. A afinidade do radiofármaco 18FLT por células de glioblastoma humano
(U87MG) foi da ordem de 0,24 μmol/L (Kd). Por fim, constatou-se que quantidades
adicionais de timidina e clorotimidina, duas impurezas presentes na formulação, reduziram
significativamente a interação de 18FLT (IC50 ~ 1 - 34 μmol/L) com as células tumorais, o que
pode reduzir sua eficácia para o diagnóstico. Assim, sugere-se que um valor máximo seja
estabelecido para a concentração destas impurezas como um dos critérios de Pureza Química
de 18FLT, baseando-se no ensaio de eficácia de interação. Portanto, a UPPR/CDTN está apta a
fornecer rotineiramente o radiofármaco 18FLT para estudos não clínicos e clínicos, de acordo
com os requisitos de Boas Práticas de Fabricação de Medicamentos exigidos pela ANVISA. / 3-Deoxy-3-[18F]Fluorothymidine (18FLT) is a Thymidine radioactive analog that is
being used since 1998 for cancer diagnostics by Positron Emission Tomography (PET) for
several types of cancer, as breast, lung, colorectal, brain, among others. Its use extends
coverage of PET scans in diagnosis of cancers in certain organs and tissues, since there are
limitations of [18F] Fludeoxyglucose (18FDG), which is the most used PET
radiopharmaceutical in the world today. An 18FDG synthesis module was adapted to
implement 18FLT production in Research and Production Unit of Radiopharmaceuticals from
Center of Nuclear Technology Development (UPPR/CDTN). Three protocols were used
varying the concentration of ethanol (0%, 8% and 10%). Quality control tests were also
developed, as pH, catalyst determination, ethanol and acetonitrile determination, chemical and
radiochemical purity, amongst others. The formulation was evaluated in vitro for its safety,
using the metabolic viability (MTTs assay) and clonogenic toxicity assays, and for its
effectiveness in tumors, using the binding test. The corrected yields were 6.52%; 253%; and
233% for the first, second and third synthesis protocols, respectively. The third protocol
(Ethanol 8%) was found to be less cytotoxicity comparing to the second one (Ethanol 10%).
Furthermore, 18FLT chemical impurities and the entire formulation did not affect the
clonogenicity of the cells in Clonogenic Assay. Based on these results the protocol 3 was
chosen as the standard 18FLT synthesis. The interaction of 18FLT with the cell lines was
saturable, with specific binding higher than 81%, confirming the effectiveness of the
radiopharmaceutical in tumor detection. The affinity between 18FLT and human glioblastoma
cells (U87MG) was found to be 0.24 μmol/L (Kd). Finally, it was found that additional
quantities of thymidine and chlorothymidine reduced significantly 18FLT interaction (IC50 ~ 1
- 34 μmol/L) with tumor cells, which can reduce its effectiveness in PET diagnosis. For this
reason it is suggested that a maximum value must be set for the concentration of these
impurities in the 18FLT Chemical Purity quality control test based in efficacy binding assays.
Therefore, CDTN is able to routinely provide 18FLT radiopharmaceutical for clinical and non
clinical studies, according to the Brazilian Good Manufacturing Practices for
Radiopharmaceuticals required by ANVISA.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:bdtd.cdtn.br:200 |
| Date | 22 August 2014 |
| Creators | Leonardo Tafas Constantino do Nascimento |
| Contributors | Raquel Gouvêa dos Santos, Maria José Neves, Cristina Maria Moriguchi Jeckel, José Domingos Ardisson |
| Publisher | CNEN - Centro de Desenvolvimento da Tecnologia Nuclear, Belo Horizonte, CTRA - Programa de Pós-Graduação em Ciência e Tecnologia das Radiações, Minerais e Materiais, CDTN, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações do CDTN, instname:Centro de Desenvolvimento da Tecnologia Nuclear, instacron:CDTN |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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