Tese (Doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Pós-Graduação em Patologia Molecular, 2012. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2013-06-12T16:14:53Z
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2012_PerlaFabiolaAraujo.pdf: 2398314 bytes, checksum: 643aa548a229087115e257fc8fc91617 (MD5) / A primeira microepidemia pelo Trypanosoma cruzi na Amazônia brasileira foi publicada em 1969 e, desde então, outras têm sido observadas em famílias residentes em vários municípios dos Estados daquela região. Em 2007 e 2009 foram identificados casos clínicos de doença de Chagas aguda (DCA) em famílias dos municípios de Barcarena e Breves, Estado do Pará. Este estudo mostrou anticorpos da classe IgG contra antígenos do T. cruzi em 35,7% (39/109) das pessoas, sendo
29,5% (13/44), 26,6% (4/15), 20,6% (6/29), respectivamente, das famílias A, B, e C
residentes no município de Barcarena, e em 76,1% (16/21) da família D do município de Breves; em 66,6% (14/21) dos casos dessa família foram identificados anticorpos IgM anti-T. cruzi. Os resultados de PCR com iniciadores de nDNA do parasito foram positivos em 76,1% (83/109) dos casos: Família A, 77,2%; B, 100%; C, 75,8% e D, 57,1%. De grande interesse, em 21 casos de DCA o exame parasitológico positivo foi convalidado pela PCR com iniciadores de nDNA de T. cruzi. Ademais, nas células germinativas do sêmen foi confirmada infecção ativa pelo T. cruzi, também presente nas células somáticas do sangue, pela PCR com
iniciadores específicos de nDNA e kDNA. Adicionalmente, 16,5% (18/109) casos
positivos apenas para kDNA, sem a infecção ativa, retiveram seqüências de minicírculos integradas no genoma. Nesses 18 casos as mutações de kDNA foram transferidas para as progênies pela reprodução sexuada. Com esse respeito, a diferença de 53% (44/83) entre os resultados obtidos pela PCR para nDNA e
aqueles dos testes imunológicos contra antígenos de T. cruzi tem importância
epidemiólogica ainda não apreciada em outra investigação. Pois, a presença de
nDNA e kDNA foi encontrada na ausência de anticorpos contra antígenos de T. cruzi
nos hospedeiros tolerantes aos antígenos do parasito. Ademais, em todos esses
casos de infecção ativa também ocorreu transferência vertical de seqüências de
minicírculos de kDNA do T. cruzi pela reprodução sexuada e as mutações foram
prontamente identificadas no genoma humano. Então, a larga diferença entre os
resultados de testes imunológicos e de PCR pode ser explicada pela aquisição da
infecção via sexual ou transplacentária, durante a fecundação ou na fase inicial da
gestação, antes do desenvolvimento do sistema imune do embrião, e o indivíduo
nasce tolerante aos antígenos de T. cruzi. As mutações de kDNA foram identificadas
nos cromossomos, e o principal sítio de integração foi retrotransposon LINE-1 em 70% (301/430) das quimeras identificadas. Em 83,3% (50/60) dos casos as
mutações ocorreram no gene do receptor olfatório OR1-17, e em apenas 16,6%
(10/60) foram encontradas em genes com outras funções reconhecidas. O achado
mais relevante neste estudo foi a documentação de transmissão do kDNA e do
nDNA do T. cruzi pela reprodução sexuada. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / By 1969, a microepidemic of Trypanosoma cruzi was recognized in the Brazilian Amazonia, and lately they have been constantly reported in families from several counties in the region. By 2007 and 2009, clinical cases of acute Chagas disease were identified in families living in counties of Barcarena and Breves, Estado do Pará. The exams revealed IgG antibodyes against T. cruzi antígens in 35,7%
(39/109) cases of the study population: Family A, 29,5% (13/44); B, 26,6% (4/15); C,
20,6% (6/29) of Barcarena county, and Family D, 76,1% (16/21) of Breves; Anti-T.
cruzi IgM antibody was identified in 66,6% (14/21) of family D cases. The PCR
assays with specific nDNA primer sets yielded positive results in 76,1% (83/109)
cases: Family A, 77,2%; B, 100%; C, 75,8%; and D, 57,1%. Of interest, 21 cases
showing symptoms of acute Chagas disease had parasitologic demonstration of T.
cruzi and these were convalidated by the PCR assays with nDNA primer sets. Moreover, germline cells from male gametes showed T. cruzi nDNA and kDNA as well as somatic mononuclear cells from blood. Additionally, 16,5% (18/109) of kDNA positive cases in absence of active infection retained the minicircle sequences in the genome. In these cases the kDNA mutations were vertically transfered to progenie by sexual reproduction. With this respect, the reported differences 53% (44/83) between results of antibody assays and those obtained by PCR with primer sets to T. cruzi nDNA have broad epidemiologic importance not yet reported by previous investigation. The presence of nDNA and kDNA was documented in the absence of
antibody against T. cruzi antigens in hosts’ immue tolerant to the parasite antigens.
Furthermore, vertical transfer of T. cruzi minicircle occurs by sexual reproduction in
every case nDNA and kDNA are present in the course of an active infection. Insofar,
the reported differences herein can be explained by the acquisition of the infection
during fecundation or in the early gestational period, via sexual transmissão or
transplacenta from mother to offspring before embryo immune system development;
and the newborn becomes tolerant to T. cruzi antigens. The kDNA mutations were
identified in several chromosomes, and the main integration hotspot was LINE-1 in
70% (301/430) cases. The mutations entered at the olfactory ORI-17 gene in (50/60)
cases (83,3%) and in (10/60) cases (16,6%) they were found in genes with annotated
functions. A highly relevant finding in this study was the documentation of transmission of kDNA, and of nDNA from T. cruzi active infection by sexual reproduction.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.unb.br:10482/13316 |
| Date | 20 December 2012 |
| Creators | Araújo, Perla Fabíola de |
| Contributors | Nitz, Nadjar, Teixeira, Antônio Raimundo Lima Cruz |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UnB, instname:Universidade de Brasília, instacron:UNB |
| Rights | A concessão da licença deste item refere-se ao termo de autorização impresso assinado pelo autor com as seguintes condições: Na qualidade de titular dos direitos de autor da publicação, autorizo a Universidade de Brasília e o IBICT a disponibilizar por meio dos sites www.bce.unb.br, www.ibict.br, http://hercules.vtls.com/cgi-bin/ndltd/chameleon?lng=pt&skin=ndltd sem ressarcimento dos direitos autorais, de acordo com a Lei nº 9610/98, o texto integral da obra disponibilizada, conforme permissões assinaladas, para fins de leitura, impressão e/ou download, a título de divulgação da produção científica brasileira, a partir desta data., info:eu-repo/semantics/openAccess |
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