Thèse numérisée par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal. / L'échec de la transplantation est dû en partie aux dormnages causés par la
préservation à froid et la réperfiision à chaud lors de l'intervention. Parmi les hypothèses
retenues pour expliquer ces dommages, on retient la formation des radicaux libres et les
perturbations du pH, du calcium et du volume cellulaire. L'ajout de certaines substances
dans le milieu de préservation a permis de prolonger de 6h à 24h la survie de l'organe.
Malgré le développement de solutions de préservation qui diminuent le gonflement
cellulaire des foies à transplanter, les dommages de la reperfusion chaude ne sont pas
abolis. Il se peut donc, que l'hypothermie anoxique altère les mécanismes de régulation du
volume cellulaire et que ces perturbations contribuent aux dommages observés lors de la
reperfusion du greffon chez le receveur.
Afin de vérifier cette hypothèse, nous avons vérifié dans le premier chapitre si les
conditions de la préservation à froid suivie du réchauffement entravaient la diminution ou
l'augmentation compensatrice de volume observé respectivement après un choc
hypotonique (retrait de 50 mmol de NaC1). Notre étude démontre que les hépatocytes
préservés dans la solution de l'Université de Wisconsin (UM.) ont été moins résistants
aux stress osmotiques, ce qui peut rendre les cellules moins aptes à répondre aux
stimulations physiologiques comme l'accumulation des acides aminés, spécialement lors
des demandes métaboliques et l'alimentation parentérale riche en acides aminés. Ceci
devrait être confirmé dans les conditions in vivo. Cependant, nos résultats supportent la
notion que la perturbation du volume cellulaire homéostasique peut correspondre au dysfonctionnement primaire observé dans 15% des cas lors de la transplantation
hépatique.
Subséquemment, nous avons étudié l'impact de la préservation et la réperfusion à
chaud sur le transport hépatique d'acides aminés couplés au Na ( 1 0 mM). Nous avons
mesuré par la technique de vidéoplanimétrie les changements initiaux de volume qui
reflètent l'accumulation des acides aminés. Nous avons constaté qu'en fonction du temps
de préservation les transporteurs sont affectés différemment. Le gonflement induit par la
proline, substrat spécifique du système ASC est très sensible à la préservation à froid
dans la solution U.W. chutant de 50 % après 24h de préservation comparée avec le
contrôle sans préservation, en opposition à la glutamine ou à l'analogue de l'alanine. Ceci
nous a conduit à proposer que le gonflement induit par la proline représente un index
fonctionnel sensible de l'intégrité des cellules du foie.
Dans le second chapitre, nous avons comparé l'efficacité de la solution U.W. et la
solution Sodium-Lactobionate-Sucrose (SLS) dans leurs capacités à maintenir la viabilité
cellulaire et une fonction différenciée des cellules du foie (gonflement induit par
l'addition de 10 mM de Proline, substrat spécifique du système ASC).
Enfin, dans le troisième chapitre, nous avons comparé l'effet de ces deux
solutions (U.W./SLS) sur le métabolisme des médicaments et l'activité catalytique du
cytochrome P-450 au niveau des cellules isolées de foie de rat. Cette activité catalytique
est calculée par la mesure de la concentration totale du cytochrome P-450 et des
métabolites de la théophylline générés après 4h d'incubation. La théophylline est utilisée car elle est métabolisée par plusieurs isoformes du cytochrome P-450: cytochrome P-450 1A2,
2D6, 2E1 et 3A4 dont l'aboutissement est le 1,3-DMU qui est son métabolite majeur.
Nous avons noté que la majorité de perturbations observées dans notre modèle in
vitro est entre 10 et 24 h de préservation à froid des hépatocytes dans les deux solutions
(U.W./SLS). Ceci correspond à la période 12 h de préservation à froid des foies humains
dans la solution U.W., qui représente un facteur de risque relatif pour un mauvais
pronostic, responsable de dysfonctionnement primaire observé dans 15% des cas lors de
la transplantation hépatique.
Nos données démontrent clairement que la préservation à froid des hépatocytes
dans la solution SLS, préparée au laboratoire à coût très réduit, donne des résultats
équivalent à ceux de la solution U.W. (commercialisée par Dupont) quant à sa capacité à
maintenir la viabilité cellulaire, l'intégrité fonctionnelle des cellules du foie et le
métabolisme des médicaments.
Ceci suggère que la solution SLS, qui n'est qu'une variante de la solution U.W.,
est suffisante pour obtenir les effets bénéfiques de préservation de la solution élaborée
expérimentalement (Belzer et Southard, 1988). Donc certains composants de la solution
U.W. ne peuvent apporter aucun impact bénéfique comparé à la solution SLS à
composition beaucoup plus simple. Une approche intéressante pourrait être établie sur
une solution aussi simple que la SLS à laquelle des agents pharmacologiques et
cytoprotecteurs peuvent être ajoutés. Ceci permettra de maintenir l'efficacité des
fonctions hépatiques et d'améliorer la survie des greffes du foie, menant ainsi à un
meilleur pronostic de la transplantation du foie.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:umontreal.ca/oai:papyrus.bib.umontreal.ca:1866/33014 |
| Date | January 1999 |
| Creators | Serrar, Halima |
| Contributors | Haddad, Pierre |
| Source Sets | Université de Montréal |
| Language | fra |
| Detected Language | French |
| Type | thesis, thèse |
| Format | application/pdf |
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