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Aspectos biológicos y epidemiológicos de amebas de vida libre aisladas en la República Argentina, con énfasis en Acanthamoeba spp

Las Amebas de Vida Libre (AVL) son protozoos anfizoicos de amplia distribución en la
naturaleza. Cuatro géneros pertenecientes a este grupo han demostrado ser patógenos
para el hombre y animales de experimentación: Naegleria, Balamuthia, Acanthamoeba y
Sappinia. En particular, a Acanthamoeba se la considera una AVL “ubicuista”, ya que se la
ha hallado en todos los ambientes y lugares donde se la ha investigado.
El objetivo de esta tesis fue la búsqueda, aislamiento e identificación de AVL aguas. Los
sitios de muestreo correspondieron a la Ciudad de Bahía Blanca y a otros sitios geográficos
de la Republica Argentina. En Bahía Blanca se analizaron muestras de agua corriente y de
tanques de reserva domiciliarios, de aguas recreacionales (piscinas cubiertas) y arroyos. Se
tomaron muestras del Rio Sauce Grande en la localidad bonaerense de Sierra de la
Ventana. Se muestrearon aguas de consumo y recreación de la Localidad de Sarmiento,
provincia del Chubut. Se analizaron muestras de diversas fuentes en distintas provincias
de la Republica Argentina. En total se procesaron 274 muestras de aguas de diferentes
fuentes y localizaciones. Las muestras fueron clasificadas en aguas tratadas (cloradas u
otro tratamiento: tanques, grifos, piscinas, etc) y naturales (de ríos, lagos, canales,
arroyos, etc.). Dentro de esta clasificación solo el 30% de las aguas tratadas analizadas
fueron positivas para el aislamiento de AVL, mientras que dentro de las aguas naturales se
obtuvo un 92,6% de positividad en los cultivos. Del total de estos aislamientos, el 98,7%
correspondió al género Acanthamoeba, tanto por clasificación morfológica como por
métodos moleculares; mientras que 1,3% restante correspondió a una cepa que
denominamos “No A, no N”, sin ubicación genérica determinada y de cuyo análisis
ultraestructural se desprendió la existencia de endosimbiontes compatibles con partículas
virales. Se analizaron también muestras clínicas procedentes de 4 posibles casos de
queratitis amebiana humana, resultando 2 de ellos positivos para AVL, y que
correspondieron al género Acanthamoeba. Se investigó la presencia de AVL en líquidos
comerciales para lentes de contacto, y en diversas muestras biológicas procedentes de un hospital de Bahía Blanca. En ambos tipos de muestras los aislamientos resultaron
negativos.
En todas las cepas aisladas se realizaron análisis morfométricos, ultraestructurales y
moleculares, tendientes a caracterizar los aislamientos y confirmar su ubicación genérica.
Además se realizaron pruebas de resistencia a diferentes desinfectantes. Nuestros
resultados refuerzan la adjetivación de “ubicuista” para las AVL del género
Acanthamoeba, ya que fueron demostradas en todos la ambientes estudiados. Su amplia
distribución, el hallazgo en aguas recreacionales y de consumo y su participación como
agentes etiológicos de enfermedad humana, refuerzan la necesidad de implementar
medidas de control y prevención, así como su consideración por parte del personal de
salud al momento de realizar un diagnostico clínico e instaurar un tratamiento específico. / The free-living amoebae (FLA) are amphizoic protozoa widely distributed in nature. Four
genera belonging to this group have proved to be pathogenic to humans and experimental
animals: Naegleria, Balamuthia, Acanthamoeba and Sappinia. In particular,
Acanthamoeba is considered an FLA "ubiquitous" since it has been found in all
environments and places where it has been investigated.
The aim of this thesis was the search, isolation and identification of FLA in the waters.
Sampling sites were for the city of Bahia Blanca and other geographical sites of Argentina.
In Bahia Blanca samples of tap water tanks and household reserves, recreational water
(indoor) and streams they were analyzed. Sauce Grande River samples were taken in the
locality of Sierra de la Ventana. Drinking water and recreation of the town of Sarmiento,
Chubut province were sampled. Samples from different sources in different provinces of
Argentina were analyzed. In total 274 samples of water from different sources and
locations were processed. The samples were placed in treated water (chlorinated or other
treatment tanks, faucets, pools, etc.) and natural (rivers, lakes, canals, streams, etc.).
Within this classification, only 30% of treated water tested positive for isolation of FLA,
while natural waters within 92.6% positivity in the cultures was obtained. Of all the
isolates, 98.7% were Acanthamoeba, both morphological classification by molecular
methods; while remaining 1.3% corresponded to a strain called "non-A, non-N" without
certain generic location and ultrastructural analysis which came off the existence of
endosymbionts compatible with viral particles. Clinical samples from 4 possible human
cases of amoebic keratitis were also analyzed, resulting in 2 of them positive for AVL,
which corresponded to Acanthamoeba. FLA's presence in commercial liquid for contact
lenses, and various biological samples from a hospital in Bahia Blanca was investigated. In
both types of samples were negative isolates.
Morphometric, ultrastructural and molecular, aimed to characterize the isolates and
confirm your generic location analyzes were performed on all isolates. Additionally stress
tests were conducted at different disinfectants. Our results reinforce the adjectives of "ubiquitous" for AVL, especially Acanthamoeba, as were demonstrated in all the studied
environments. Its wide distribution, the finding in recreational waters and drinkig waters,
and their participation as etiologic agents of human disease, reinforcing the need to
implement prevention and control measures, as well as consideration by health personnel
when making a clinical diagnosis and establish specific treatment.

Identiferoai:union.ndltd.org:uns.edu.ar/oai:repositorio.bc.uns.edu.ar:123456789/2567
Date11 March 2016
CreatorsGertiser, María Laura
ContributorsCostamagna, Sixto Raúl, Visciarelli, Elena C.
PublisherUniversidad Nacional del Sur
Source SetsUniversidad Nacional del Sur
LanguageSpanish
Detected LanguageSpanish
TypeElectronic Thesis or Dissertation, Text
Rights2

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