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Dissertação_ICS_ Marcos Borges Ribeiro.pdf: 1012544 bytes, checksum: cd3041816b8e33f18036ad6952db5f5d (MD5) / A brucelose canina é uma infecção bacteriana contagiosa, zoonótica, causada
pela Brucella canis, responsável por aborto e infertilidade. A brucelose é uma
doença de importância mundial pelo prejuízo ocasionado tanto para a saúde
publica como para a economia nacional. O diagnóstico baseia-se principalmente
na sorologia devido a inespecificidade dos sinais clínicos. Vários métodos têm
sido descritos e utilizados para diagnóstico, porém a maioria comercialmente
disponível produz resultados falsos positivos. Neste trabalho foi comparado o
perfil de reconhecimento de Ig G sérica a dois extratos solúveis de Brucella canis,
preparados de diferentes formas. Os soros foram analisados por ELISA Indireto
com os dois extratos solúveis obtidos por calor e Ultra-som. Foram testadas 765
amostras de soros de cães domiciliados da cidade de Salvador e área
metropolitana com sorologia desconhecida, 92 amostras de soros testadas no
Centro de Controle de Zoonoses da cidade de São Paulo (CCZ-SP) pelo método
IDGA com antígeno de Brucella ovis sendo 45 positivas e 47 amostras negativas.
Para o cálculo do valor de corte foram utilizadas 21 amostras de soros de filhotes
de cães saudáveis provenientes do biotério do Centro de Pesquisa Gonçalves
Muniz (CPqGM-Fiocruz) – Salvador –Ba. O perfil eletroforetico foi analisado por
SDS-PAGE em sistema desnaturante e a reatividade dos antígenos solúveis foi
avaliada pelo ELISA e Western Blotting, comparando diferentes grupos de soros.
A comparação entre os ELISAs com ambos antígenos foi feito com todos os 857
soros. O ELISA com extrato solúvel obtido por calor indicou uma positividade de
10% (n=79) com valor de D.O de limite de corte de 0,235, já o ELISA com extrato
solúvel obtido por ultra-som indicou uma positividade de 24% (n=187) com valor
de D.O de limite de corte de 0,350. A análise estatística de correlação dos
resultados encontrados nos estudos dos dois antígenos obtido por calor e ultrasom
foi de 0,68. Os 92 soros do CCZ-SP testados pela IDGA foram utilizados
para avaliar a especificidade, sensibilidade, valores preditivos positivo e negativo
e eficiência dos ELISAs, sendo 51%,94%, 89%, 67% e 73% para o ELISA com
extrato obtido por calor e de 69%, 83%, 80%,74% e 76% para o ELISA com o
extrato obtido por ultra-som, respectivamente. A concordância entre os ELISAs
utilizando os dois extratos solúveis dada pelo índice Kappa foi de κ= 0,38. O Elisa
realizado com extrato solúvel obtido por calor mostrou concordância com a IDGA
de κ=0,45 e o ELISA utilizando extrato solúvel obtido por ultra-som e a IDGA com
κ= 0,52. A imunoreatividade do extrato antigênico solúvel de B. canis obtido por
calor (extrato aquecido), utilizando soros de animais positivos na IDGA e ELISA,
apresentou com maior freqüência as bandas 65 KDa, 58 KDa, 56 KDa, 18 KDa e
12 KDa e o extrato obtido por ultra-som as bandas 68 KDa, 52 KDa, 46 KDa, 38
KDa, 28 KDa, 18 KDa. Os antígenos utilizados para os ELISAs aquecido e
sonicado, mostram diferentes perfis eletroforético em análise pela técnica SDSPAGE,
sugerindo diferentes composições protéicas. Os extratos analisados por ELISA, apesar de apresentarem bons valores de controle de qualidade, sendo o
de ultra-som melhor que os aquecidos, necessitam ser avaliados quanto a sua
reatividade com soros de animais com diagnóstico de brucelose canina
confirmados por isolamento bacteriano ou por PCR.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:192.168.11:11:ri/21085 |
| Date | 22 December 2003 |
| Creators | Ribeiro, Marcos Borges |
| Contributors | Freire, Songeli Menezes, Meyer, Roberto, Ribeiro, Songeli Menezes, Franke, Carlos Roberto, Oliveira, Sérgio Costa, Brodskyn, Cláudia Ida |
| Publisher | Instituto de Ciências da Saúde, em Imunologia, UFBA, brasil |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFBA, instname:Universidade Federal da Bahia, instacron:UFBA |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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