Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2014 / Made available in DSpace on 2015-02-05T21:23:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2014 / A infecção pelo HPV é um fator de risco independente para o desenvolvimento dos carcinomas de células escamosas da cabeça e pescoço (CCECP). Estudos recentes demonstram que os CCECP HPV positivos representam uma classe diferenciada de tumores, resultando em implicações clínicas e biológicas favoráveis no tratamento e prognóstico dos pacientes. Ainda não existe um consenso sobre o método mais adequado para a detecção do HPV nas diversas amostras biológicas. Além disso, no Brasil existem poucos estudos a respeito da associação do HPV nos tumores da cavidade oral e, assim como no âmbito global, seus resultados são discordantes. O objetivo deste estudo foi avaliar a utilização dos conjuntos de oligonucleotídeos iniciadores (primers) GP5+/6+, MY09/11 e PGMY09/11 para a detecção do DNA do HPV pela reação em cadeira da polimerase (PCR) e verificar a prevalência da infecção pelo HPV nos pacientes com carcinoma de células escamosas da cavidade oral (CCEO) atendidos no Ambulatório de Estomatologia da Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC). Para isto, foram coletadas amostras de tecido oral fixado em formalina e embebido em parafina (FFEP) dos pacientes atendidos no período de setembro de 2006 a dezembro de 2013, com resultados histopatológicos positivos para CCEO. As amostras foram submetidas à PCR convencional utilizando os primers GP5+/6+, MY09/11 e PGMY09/11 e as amostras negativas nestas reações foram submetidas à nested PCR com os primers MY/GP+ e PGMY/GP+. Nenhuma das amostras (0,0%) foi detectada positiva para o HPV nas PCRs com os primers GP5+/6+ e MY09/11, enquanto 13% (3/23) foram positivas para o vírus quando foi utilizado o conjunto de primers PGMY09/11. O uso da nested PCR PGMY/GP+ aumentou a detecção do HPV para 17,4% (4/23), enquanto na nested PCR MY/GP+ nenhuma das amostras (0,0%) foi positiva para o vírus. Com isso, apenas 17,4% do total de casos de CCEO foram associados ao HPV, sendo que a maioria dos casos (73,9%) foi associada ao consumo de tabaco e/ou álcool. Não foi observada associação estatística entre a presença do HPV e os outros fatores de risco para o CCEO (sexo, idade, consumo de álcool, tabaco e outros). A nested PCR PGMY/GP+ se mostrou a técnica mais adequada para a pesquisa do DNA do HPV em amostras FFEP de CCEO.<br> / Abstract: HPV is an independent risk factor for the development of head and neck squamous cell carcinomas (HNSCC). Recent studies have shown that HPV-positive HNSCC represents a distinct group of tumors with favorable biological and clinical behavior which leads to a better treatment response and survival outcomes. However, there is still no consensus on the most appropriate method for the detection of HPV in HNSCC. Besides, in Brazil there are only a few studies about the role of HPV in HNSCC, and even as globally, the results are conflicted. The aim of this study was to evaluate the use of GP5+/6+, MY09/11 and PGMY09/11 primer sets for the detection of HPV DNA by polymerase chain reaction (PCR) and to determine the rate of HPV infections in patients with oral squamous cell carcinomas (OSCC) from Stomatology Clinic of Federal University of Santa Catarina (UFSC). The specimens were taken from formalin-fixed and paraffin-embedded (FFPE) oral tissues from patients treated between September 2006 and December 2013. The specimens were tested using simple PCR with GP5+/6+, MY09/11 and PGMY09/11 primer sets. All negative samples were subsequently tested by nested PCR MY/GP+ and PGMY/GP+. The PGMY09/11 primers detected HPV DNA in 13.0% (3/23) of the samples while GP5+/6+ and MY09/11 primers did not detect the virus in any samples. The prevalence of HPV raise to 17.4% (4/23) with the use of nested PGMY/GP+, but the nested MY/GP+ was not able to detect the virus DNA in any samples. In the study population, HPV detection rate was 17.4%. Most of the the total OSCC cases (73.9%) was related with tobacco and/or alcohol use, but no statistical association was observed between HPV infection and other risk factors for OSCC (sex, age, alcohol use, tobacco use, and others). PGMY/GP+ are the preferred primer set for the detection of HPV DNA by PCR using FFPE samples from OSCC.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufsc.br:123456789/129688 |
| Date | January 2014 |
| Creators | Erhart, Sibele Morais Miyata |
| Contributors | Universidade Federal de Santa Catarina, Onofre, Alexandre Sherlley Casimiro |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | 95 p.| il., grafs., tabs. |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFSC, instname:Universidade Federal de Santa Catarina, instacron:UFSC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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