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Previous issue date: 2016-01-13 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A asma é uma desordem de caráter alérgico que vem atingindo muitas pessoas por todo mundo. Embora existam muitos tratamentos para essa doença, novas terapias são necessárias, pois muitos dos tratamentos típicos causam efeitos colaterais para o paciente. Nidularium procerum (Np) é uma Bromeliaceae, encontrada principalmente no estado do Rio de Janeiro. Estudos realizados em nosso laboratório demonstraram que as folhas de Np, possuem atividade antialérgica, anti-inflamatória e antinociceptiva. No modelo de inflamação alérgica pulmonar, o extrato etanólico de N. procerum (NpEt) se mostrou eficiente em inibir a migração de eosinófilos para os pulmões em 58 % na dose de 1 mg/kg. Para verificar a real eficácia do extrato testamos esta dose no modelo de asma estabelecida. Após a instalação da doença, o tratamento (uma ou duas vezes ao dia) com NpEt, via oral, nas doses de 1 e 10 mg/kg não inibiu a migração de eosinófilos. O tratamento via aerolização com NpEt também não foi eficaz. Ao aumentarmos a dose para 100 e 500 mg/kg, observamos tendência de inibição da migração de eosinófilos, porém com pouca eficácia. Por isso, NpEt foi fracionado com solventes em doses crescentes de polaridade dando origem as frações hexânica (NpEtFH), diclorometânica (NpEtFHD), acetato de etila (NpEtFAe), butanólica (NpEtFB) e aquosa (NpEtFAq). Foram realizados experimentos in vitro com linfócitos T, mastócitos e eosinófilos. As frações NpEtFB e NpEtFAq não apresentaram efeito sobre os linfócitos T. NpEtFD inibiu todas as características estudadas, porém devido á sua toxicidade, conforme demonstrado no ensaio de apoptose. NpEtFAe foi a que inibiu a proliferação e liberação de citocinas, sem toxicidade. NpEt não impediu a proliferação destas células, mas modulou a liberação de IFN-\03B3
Com relação aos mastócitos, os extratos/subfrações não foram tóxicos para estas células, algumas frações modularam negativamente a liberação de IL-8, e todos inibiram a expressão de COX2, após 8h de cultura. Analisando os eosinófilos, observamos que todos foram capazes de inibir, nas doses de 10 \03BCg/mL e/ou 50 \03BCg/mL, a produção de corpúsculos lipídicos sem toxicidade. Visto que a subfração NpEtFAe foi a que modulou negativamente todas as células analisadas, testamos sua eficácia no modelo de asma estabelecida. Observamos que NpEtFAe foi capaz de inibir a migração de eosinófilos e a liberação de IgE, entretanto, NpEtFAe não interviu na hiperreatividade. Como NpEtFAe foi eficaz de impedir algumas das características da asma, mesmo com a mesma já instalada, testamos a mesma no modelo de asma crônica. O tratamento com NpEtFAe causou redução do número de eosinófilos (não foi significativo devido ao baixo número de animais), sem efeito na hiperreatividade, o que indica que outros experimentos são necessários, para melhor caracterização dos resultados. Com estes dados sugerimos que a fração NpEtFAe pode ser uma boa alternativa terapêutica para o controle da asma / Asthma is an
alle
rgic disorder that has
incidence worldwide. Although many treatments are
available, new therapies are necessary, because most of them cause strong side
-
effects to the
patients.
Nidularium procerum
(Np)
is a Bromeliaceae, lo
calized
mainly in Rio de Jan
eiro
state. Studies p
erformed in our laboratory
demonstrated that treatment with
Np
leaves
in mice
,
inhibited allergy, inflammation and nociception.
In the model of
murine
allergic inflammation,
the ethanol extract of
N. procerum
leaves
(NpEt)
, v. o.,
was
effective in inhibiting eosinophils
migration
to the lungs
in 58 % at a dose of 1 mg/kg. To determine the true efficacy of the
extract
,
we
tested
this
dose in
a model of
established
asthma
.
NpEt treatment
with doses of 1
and 10 mg/kg (one or twice daily),
after the onset of the disease, had no effect on eosinophil
migration,
the
treatment
with
aerosolization were not effective either.
I
ncrea
sing the dose to
100 and 500 mg
/kg resulted
in
an
indication
of
inhibition
, but with low efficiency.
So
,
NpEt
was frac
tionated using
solvents of increasing
polarity giving
hexane (
NpEtFH
),
dichloromethane
(
NpEtFD
),
ethyl acetate (NpEtFAe),
butane
(NpEtFB
) and aqueous
(
NpEtFAq
) fractions
.
In vitro
experiments were
performed
with
T
lymphocytes, mast cells and
eosinophils.
N
pEtFB
and
NpEtFAq
did
not
have
effect on lymphocytes
.
NpEtFD
inhibited all
the studied
aspects
but
due to
its toxicity
, demonstrated by apoptosis assay
.
NpEtFAe
was
the
one which
inhibited the prolifer
ation and cytokine release,
without
toxicity.
NpEt did
not
impair T cell proliferation
, but it modulated negatively the release of IFN
-
γ.
R
egard
ing to mast
cells,
neither the extract nor the
fractions was toxic
, some of them
modulate
d
IL
-
8
release
and
all inhibited the expression of COX2
in a 8
-
h
our
culture
. Analyzing eosinophils, we found
that
all
fractions
were able to inhibit lipid
bodies
production at
10 μg/mL
and/or
50 μg/mL
. Since
NpEtFAe
negatively modulated
all
the cells tested, we verified
its efficacy in the model
of
established
asthma
. We observed that
NpEtFAe
was able to inhibit
the migration of eosinophils
and the
release of IgE
significantly,
however,
NpEtFAe
did not interfere
in hyperreactivity. As
NpEtFAe
was effective to prevent some asthma
features
, even in the
established asthma, we
tested
it
in the model of chronic asthma.
NpEtFAe
treatment decreased
eosinophils number in
the lungs (it was no significant due to animal number) and it had no effect on
hyperreactivity
.
Other experiments are necessary to better elucidate the results. With this data, we suggest the
NpEtFAe, can
be a good alternative to asthma treatment.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/13172 |
| Date | January 2013 |
| Creators | Siqueira, Alessandra Mendonça |
| Contributors | Martins ,Patrícia Machado Rodrigues e Silva, Melo, Christianne Bandeira de, Valotta, Edna Alves dos Anjos, Monteiro, Carmen Penido, Pereira, Monica Farah, Frutuoso, Valber da Silva |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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