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Previous issue date: 2013-03-15 / The emergence and spread of resistance mechanisms in Gram-negative bacilli have complicate the treatment of serious nosocomial infections. Due to the ineffectiveness of the automated detection of KPC producer isolates there is a need to develop better methodologies. One possibility is to evaluate the ertapenem resistance, which has greater sensitivity to detect the expression of KPC producing isolates. However, the specificity may be reduced due to the resistance attributed to other mechanisms, such as AmpC gene expression or ESBL production associated with the loss of porin. This study included 128 samples of Gram-negative bacilli of Klebsiella pneumoniae and Enterobacter spp. resistant to ertapenem. Disk diffusion and E-test? method were applied to determine the susceptibility to imipenem, meropenem and ertapenem. Isolates intermediate and resistant to ertapenem were evaluated and additional resistance mechanisms conferred by blaTEM, blaSHV, blaCTX-M, blaCTX-M-2 and blaKPC for Klebsiella pneumoniae and Enterobacter cloacae genes were investigated by PCR technique. The presence of outer membrane protein (OMP) was investigated by dot blot. The gene blaTEM was detected in 52.9% and 10.3%; blaSHV in 29.4% and 0.94%; blaCTX-M in 41.4% and 1.9%, and blaCTX-M-2 in 23.5% and 1.9% of K. pneumoniae and Enterobacter cloacae isolates, respectively. blaKPC gene was present in 12.6% of Enterobacter spp. isolates. The OmpC and OmpF were present in 3.8% of Enterobacter cloacae isolates. Resistance genes and outer membrane proteins carbapenemases producing strains indicates that several resistance mechanisms contribute to therapeutic failure and point to the need for better detection methods and surveillance strategies. / A emerg?ncia e dissemina??o dos mecanismos de resist?ncia em bacilos Gram-negativos t?m complicado o tratamento de s?rias infec??es nosocomiais. Devido ? inefic?cia dos sistemas automatizados na detec??o de isolados produtores de KPC (Klebsiella pneumoniae produtora de carbapenemase) h? a necessidade do desenvolvimento de melhores metodologias. Uma possibilidade ? avaliar os isolados quanto ? resist?ncia ao ertapenem, o qual tem maior sensibilidade para detectar a express?o dos isolados produtores de KPC. Contudo, a especificidade pode ser reduzida devido ? resist?ncia conferida por outros mecanismos, tais como a express?o do gene AmpC ou a produ??o de ESBL associado a perda de porina. Este estudo incluiu 128 amostras de bacilos Gram-negativos de Klebsiella pneumoniae e Enterobacter spp. resistentes ao ertapenem. O m?todo de disco difus?o e E-test? foram aplicados para determinar a suscetibilidade para imipenem, meropenem e ertapenem. Os isolados com suscetibilidade intermedi?ria e resistentes para ertapenem foram avaliados e posteriormente foram investigados os mecanismos de resist?ncia atrav?s da presen?a dos genes blaTEM, blaSHV, blaCTX-M, blaCTX-M-2 e blaKPC para Klebsiella pneumoniae e Enterobacter spp., por meio da t?cnica de PCR. A presen?a de prote?na da membrana externa (OMP) foi investigada por meio de dot blot. O gene blaTEM foi detectado em 52,9% e 10,3%; blaSHV em 29,4% e 0,94%; blaCTX-M em 41,4% e 1,9% e blaCTX-M-2 em 23,5% e 1,9% dos isolados de K. pneumoniae e Enterobacter spp., respectivamente. O gene blaKPC estava presente em 12,6% dos isolados de Enterobacter spp. As porinas OmpC e OmpF estavam presentes, concomitantemente, em 3,8% dos isolados de Enterobacter cloacae. A detec??o da presen?a dos genes de resist?ncia e as prote?nas da membrana externa nos isolados produtores de carbapenemases indica que eles podem estar associados aos diversos mecanismos de resist?ncia, contribuindo para a falha terap?utica e apontando para a necessidade de melhores m?todos de detec??o e estrat?gias de vigil?ncia.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:tede2.pucrs.br:tede/1724 |
| Date | 15 March 2013 |
| Creators | Jaskulski, Mariluce da Rocha |
| Contributors | Machado, Denise Cantarelli |
| Publisher | Pontif?cia Universidade Cat?lica do Rio Grande do Sul, Programa de P?s-Gradua??o em Medicina e Ci?ncias da Sa?de, PUCRS, BR, Faculdade de Medicina |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da PUC_RS, instname:Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul, instacron:PUC_RS |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 7620745074616285884, 500, 600, -8624664729441623247 |
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