Tabernaemontana catharinensis A. DC (Apocynaceae family) is popularly known as cobrina and used
on leaf infusions form as an anti-inflammatory, antidote to snake bites, against insect bites, among
other applications. These effects are due to a diversity of chemical constituents already identified in
several parts of the plant. However, no study was performed to confirm its topical anti-inflammatory
activity in inflammatory skin diseases. All procedures were approved by Ethics Committee for Animal
Research of the Federal University of Santa Maria (Process number 23081.018655/2014-91 and
5199270616/2016). To evaluate this effect, were performed acute irritant contact dermatitis (ICD)
models induced by cinnamadehyde (4 μg/ear), capsaicin (200 μg/ear), arachidonic acid (200 μg/ear),
phenol (10% v/v/ear) and croton oil (1000 μg/ear) and a chronic ICD model induced by croton oil
repeated applications using male Swiss mice (25-30g). We assessed: 1) The topical effect of T.
catharinensis leaves crude extract (CETc) (0.0001-10 μg/ear) on acute ICD models induced by
different irritant agents; 2) The topical effect of CETc isolated fractions (dichloromethane, n-butanol
and ethyl acetate) (0.0001-10 μg/ear) and CETc gel formulations (0.001-3%; 0.15g/ear) in an acute
ICD model induced by croton oil; 3) The topical effect of CETc repeated treatment (10 μg/ear) in a
chronic ICD model croton oil-induced. These effects were evaluated through inflammatory parameters
as ear edema and polymorphonuclear cells infiltration. Moreover, we assessed the CETc topical effect
on pro-inflammatory cytokines (MIP-2, IL-1β and TNF-α), the NF-κB transcription pathway and
glucocorticoid receptor involvement on its anti-inflammatory effect, as well as the toxicity
development by CETc repeated (14 days) topical treatment. The CETc inhibited the acute ear edema
induced by cinnamaldehyde, capsaicin, arachidonic acid, phenol and croton oil with an inhibitory dose
50% (ID50) of 0.061 (0.02-0.2); 0.37 (0.21-0.67); 0.002 (0.0008-0.003); 0.0009 (0.0005-0.002) and
0.006 (0.003-0.013) μg/ear, respectively, and a maximum inhibition (Imáx) of 100% (10 μg/ear) in the
ICD model induced by cinnamaldehyde, arachidonic acid, phenol and croton oil and 75±6% (10
μg/ear) in the ICD induced by capsaicin. CETc (0.0001-10 μg/ear) significantly reduced the
polymorphonuclear cells infiltration (verified by myeloperoxidase - MPO activity and histological
analysis), as well as pro-inflammatory cytokines levels (MIP-2, IL-1β and TNF-α) induced by all
irritant agents evaluated. The dichloromethane, n-butanol and ethyl acetate fractions decreased the ear
edema with an ID50 of 0.061 (0.03-0.136); 0.002 (0.0006-0.005) and 0.001 (0.0004-0.004) μg/ear and
an Imáx of 85±4%, 83±6% e 86±6% (10 μg/ear), respectively, while the CETc gel formulation reduced
the ear edema in 96±3% (3%; 0.15 g/ear). Furthermore, all these treatments decreased the
polymorphonuclear cells infiltration. The CETc (10 μg/ear) repeated application also reduced the ear
edema induced by croton oil multiple administration from 1st day of treatment, with an Imáx de 66±6%
(9th day of experiment) even as the polymorphonuclear cells infiltration. The CETc topical treatment
reduced all inflammatory parameters evaluated by glucocorticoid receptor-dependent mechanism, but
NF-κB transcription pathway-independent, without causing adverse effects, since the CETc repeated
treatment did not alter behavioral and biochemical parameters evaluated. Our study suggests that
formulations containing T. catharinensis can be effective as a topical anti-inflammatory to treating of
ICD. / Tabernaemontana catharinensis A. DC (família Apocynaceae) é popularmente conhecida como
cobrina e utilizada na forma de infusão das folhas como anti-inflamatório, antídoto para mordeduras
de cobras, contra picadas de insetos, entre outras aplicações. Estes efeitos são decorrentes de uma
diversidade de constituintes químicos já identificados nas diversas partes da planta. Entretanto,
nenhum estudo foi realizado a fim de comprovar sua atividade anti-inflamatória tópica em doenças
inflamatórias cutâneas. Todos os procedimentos experimentais foram aprovados pelo Comitê de Ética
no Uso de Animais da Universidade Federal de Santa Maria (Processo número 23081.018655/2014-91
e 5199270616/2016). Para avaliar estes efeitos, foram realizados modelos agudos de dermatite de
contato irritante (DCI) induzido por cinamaldeído (4 μg/orelha), capsaicina (200 μg/orelha), ácido
araquidônico (2000 μg/orelha), fenol (10% v/v/orelha) e óleo de cróton (1000 μg/orelha) e, um
modelo crônico induzido pela aplicação tópica repetida de óleo de cróton utilizando camundongos
Swiss machos (25-30g). Avaliamos: 1) o efeito tópico do extrato bruto das folhas (0,0001-10
μg/orelha) de T. catharinensis (EBTc) no modelo agudo de DCI induzido por diferentes agentes
irritantes; 2) o efeito tópico das frações isoladas (diclorometano, n-butanol e acetato de etila) do EBTc
(0,0001-10 μg/orelha) e formulações em gel do EBTc (0,001-3%; 0,15 g/orelha) em um modelo agudo
de DCI induzido por óleo de cróton; 3) o efeito do tratamento repetido com o EBTc (10 μg/orelha) em
um modelo crônico de DCI induzido por óleo de cróton. Estes efeitos foram avaliados sobre
parâmetros inflamatórios como edema de orelha e infiltração de células polimorfonucleares. Além
disso, avaliamos o efeito tópico do EBTc sobre os níveis de citocinas pró-inflamatórias (MIP-2, IL-1β
e TNF-α), o envolvimento da via de transcrição do NF-κB e do receptor de glicocorticoide no seu
efeito anti-inflamatório, bem como o desenvolvimento de toxicidade pelo tratamento tópico repetido
(14 dias) do EBTc. O EBTc inibiu o edema de orelha agudo induzido por cinamaldeído, capsaicina,
ácido araquidônico, fenol e óleo de cróton com dose inibitória 50% (DI50) de 0,061 (0,02-0,2); 0,37
(0,21-0,67); 0,002 (0,0008-0,003); 0,0009 (0,0005-0,002) e 0,006 (0,003-0,013) μg/orelha,
respectivamente, e uma inibição máxima (Imáx) de 100% (10 μg/orelha) no modelo de DCI induzido
por cinamaldeído, ácido araquidônico, fenol e óleo de cróton e 75±6% (10 μg/orelha) na DCI induzida
por capsaicina. EBTc (0,0001-10 μg/orelha) reduziu significativamente a infiltração de células
polimorfonucleares (verificados através da atividade da mieloperoxidase-MPO e análise histológica),
bem com os níveis de citocinas pró-inflamatórias (MIP-2, IL-1β e TNF-α) induzidos por todos os
agentes irritantes avaliados. As frações diclorometano, n-butanol e acetato de etila reduziram o edema
de orelha com uma DI50 de 0,061 (0,03-0,136); 0,002 (0,0006-0,005) e 0,001 (0,0004-0,004) μg/orelha
e uma Imáx de 85±4%, 83±6% e 86±6% (10 μg/orelha), respectivamente, enquanto a formulação em
gel de EBTc reduziu o edema de orelha em 96±3% (3%; 0,15 g/orelha). Ainda, todos esses
tratamentos reduziram a infiltração de células polimorfonucleares. A aplicação repetida de EBTc (10
μg/orelha) também reduziu o edema de orelha induzido pela administração repetida de óleo de cróton
a partir do 1º dia de tratamento, com Imáx de 66±6% (9º dia de experimento), assim como a infiltração
de células polimorfonucleares. O tratamento tópico com EBTc reduziu todos os parâmetros
inflamatórios avaliados por um mecanismo dependente do receptor de glicocorticoide, mas
independente da via de transcrição NF-κB, sem causar efeitos adversos, uma vez que o tratamento
repetido com EBTc não alterou parâmetros comportamentais e bioquímicos avaliados. Nosso estudo
sugere que formulações contendo T. catharinensis podem ser eficazes como um anti-inflamatório
tópico para o tratamento da DCI.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufsm.br:1/12397 |
| Date | 02 February 2017 |
| Creators | Dalla Pozza, Camila Camponogara |
| Contributors | Oliveira, Sara Marchesan de, Fachinetto, Roselei, Werner, Maria Fernanda de Paula |
| Publisher | Universidade Federal de Santa Maria, Centro de Ciências Naturais e Exatas, Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas: Bioquímica Toxicológica, UFSM, Brasil, Ciências Biológicas |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFSM, instname:Universidade Federal de Santa Maria, instacron:UFSM |
| Rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 200000000006, 600, 2f2fa82b-4312-45cb-99e1-777746963f4b, 3a513e47-8267-4ee3-a16f-a1e19e08a856, d4a64262-0e7e-45c5-910e-0b0aee907c10, 6322bace-bfdc-4b6a-b6fc-cb7165642bc9 |
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