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Previous issue date: 2018-03-05 / The use of plant enzymes for analytical purposes is increasing every day, especially in the field
of biotechnology linked to the development of new and more specific analytical instruments.
In this way, the development of biosensors has been increasing since these allow the
measurement of the analyte of interest to be performed by the selective transduction of a
parameter of the target-analyte reaction that can be monitored. For this reason, the biological
element that makes up the instrument, becomes an essential component for its construction.
Polyphenoloxidase is an enzyme that catalyzes the conversion of a phenolic compound to a
quinone, which can be reduced electrochemically and thus allows the detection (quantification)
of the analyte of interest. This enzyme is widely distributed in plants and is widely used in the
production of biosensors and the selective evaluation of phenolic drugs in pharmaceutical
formulations and total phenols in industrial effluents. The polyphenoloxidases in this specific
work were extracted from the fruit of Jurubeba (Solanum paniculatum L.) and used in the
development of carbon paste electrochemical biosensors in the determination of phenolic
drugs, such as paracetamol, ascorbic acid, salicylic acid and or methyldopa. Under
experimental conditions the effect of the amount of enzymatic extract in the carbon paste
ranging from 50 to 200 μL and the optimum pH of 3.0 to 9.0 using the differential pulse
voltammetry technique was investigated. After optimization, the intermediate precision of the
biosensor was tested through its reproducibility through the tests of repeatability, time of
conditioning, stability and linearity. Soon after, used in the determination of the drugs,
obtaining a better response in the detection of paracetamol, in this way, the calibration curve
was realized and consequently applied in the determination of paracetamol of commercial
samples in tablets. The biosensor had a linearity in the range of 5 to 245 μM, with a detection
limit of 3 μM. The polyphenoloxidase extracted from the fruit of Jurubeba showed peculiar
characteristics that it provided in the technological development of biosensors with application
in the quality control of phenolic drugs, exhibiting high sensitivity, satisfactory selectivity,
good repeatability and adequate stability. / O uso de enzimas vegetais para fins analíticos vem aumentando a cada dia, principalmente
no ramo da biotecnologia ligada ao desenvolvimento de novos instrumentos de análises cada
vez mais específicos. Desta forma, o desenvolvimento de biossensores vem crescendo, já que
estes permitem que a medida do analito de interesse seja realizada pela transdução seletiva
de um parâmetro da reação analito-alvo passível de ser monitorado. Por este motivo, o
elemento biológico que compõe o instrumento, torna-se um componente essencial para a sua
construção. A polifenoloxidase é uma enzima que catalisa a conversão de um composto
fenólico a uma quinona, que pode ser reduzida eletroquimicamente e permite assim a detecção
(quantificação) do analito de interesse. Esta enzima é amplamente distribuída nos vegetais e
bastante utilizada na produção de biossensores e na avaliação seletiva de fármacos fenólicos
em formulações farmacêuticas e de fenóis totais em efluentes industriais. As
polifenoloxidases, neste trabalho em específico, foram extraídas do fruto da Jurubeba
(Solanum paniculatum L.) e utilizadas no desenvolvimento de biossensores eletroquímicos de
pasta de carbono na determinação de fármacos fenólicos, tais como o paracetamol, o ácido
ascórbico, o ácido salicílico e o metildopa. Sob condições experimentais foram investigados o
efeito da quantidade de extrato enzimático na pasta de carbono que variou-se de 50 a 200 μL
e o pH ótimo de 3,0 a 9,0, utilizando a técnica de voltametria de pulso diferencial. Após
otimizado, foi testado a precisão intermediária do biossensor através de sua reprodutibilidade
por meio dos teste de repetibilidade, tempo de condicionamento, estabilidade e linearidade.
Logo em seguida, empregado na determinação dos fármacos, obtendo uma melhor resposta
na detecção do paracetamol, dessa forma, foi realizado a curva de calibração e
consequentemente aplicado na determinação do paracetamol de amostras comerciais em
comprimidos. O biossensor apresentou uma linearidade na faixa de 5 a 245 μM, com um limite
de detecção de 3 μM. Frente aos resultados alcançados foi evidenciado que a polifenoloxidase
extraída do fruto da jurubeba apresentou características peculiares que proporcionou no
desenvolvimento tecnológico dos biossensores com aplicação no controle de qualidade dos
fármacos fenólicos, exibindo alta sensibilidade, seletividade satisfatória, boa repetibilidade e
estabilidade adequada.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.bc.ufg.br:tede/8302 |
| Date | 05 March 2018 |
| Creators | Antunes, Rafael Souza |
| Contributors | Lopes, Flávio Marques, Gil, Eric de Souza, Lopes, Flávio Marques, Santiago, Mariângela Fontes, Alves, Virgínia Farias |
| Publisher | Universidade Federal de Goiás, Programa de Pós-graduação em Assistência e Avaliação em Saúde (FF), UFG, Brasil, Faculdade Farmácia - FF (RG) |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFG, instname:Universidade Federal de Goiás, instacron:UFG |
| Rights | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | -22108878560902819, 600, 600, 600, 6010281161524209375, 6997636413449754996 |
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