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Previous issue date: 2009 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Neste estudo, 151 isolados brasileiros de Sporothrix schenckii foram
caracterizados quanto as suas características fenotípicas e genotípicas. Quanto às
características fenotípicas, a maioria dos isolados apresentou conídios ovais, sendo
que os de origem animal são maiores que os de origem humana (animal: 2,96 ± 1,07
versus forma linfocutânea: 2,37 ± 0,43; forma fixa: 2,33 ± 0,53). Os isolados
provenientes da região Norte do Brasil são os mais termotolerantes e os isolados do
Nordeste são os mais termossensíveis. Os isolados de origem animal são mais
tolerantes à temperatura quando comparados com isolados obtidos de pacientes. Os
isolados brasileiros apresentaram grande variabilidade genética quando avaliados por
RAPD. Por Southern Blot, utilizando a enzima APA I para o estudo do polimorfismo das
regiões ITS, três genótipos foram obtidos. Não houve correlação entre o perfil obtido
por RAPD ou Southern Blot com a origem clínica ou geográfica dos isolados. A
secreção de proteínas/glicoproteínas é variável entre os isolados, sofrendo influência
direta do meio de cultura. Os isolados brasileiros avaliados são produtores das enzimas
DNAse e urease, 15,78% produzem gelatinase, 26,31% produzem proteinase e 21,05%
produzem caseinase. Todos os isolados avaliados toleram pressão osmótica de 16,6%
de glicerol, 89,47% toleram 20% e todos são inibidos a 23% e 28,5 % de glicerol. Todos
os isolados avaliados toleram pressão salina de 6% e 8%; 42,10% toleram pressão de
9% e 10% de sal e todos são inibidos a 12% de sal. Todos os isolados avaliados
crescem na faixa de pH de 2,2 a 12,5. A patogenia e virulência são variáveis entre os
isolados, podendo estar relacionada ao genótipo do isolado. Diferentes proteínas são
reconhecidas pelos soros dos camundongos infectados, sendo a molécula de 60 kDa, a
mais reconhecida neste sistema. Em relação à esporotricose humana, as moléculas de
70 kDa e 38 kDa são comumente reconhecidas por soros de pacientes com
esporotricose fixa e linfocutânea. O antígeno bruto do isolado Ss 118 e a fração SsCBF
são eficientes para diagnóstico da esporotricose felina através da técnica de ELISA. A
fração SsCBF é capaz de elicitar resposta imune do tipo HTT em camundongos
experimentalmente infectados. Em geral, os resultados indicam que os isolados
brasileiros são heterogêneos, apresentando características genéticas e fenotípicas
individuais, independentes de sua origem. Somente a área conidial e a tolerância a
temperatura foram características fenotípicas relacionadas à origem. / In this study, we analyzed 151 Brazilian S. schenckii isolates by phenotyping and
genotyping aspects. About phenotyping aspects, most of isolates showed oval conidia
and the mean conidial area of S. schenckii animal isolates was greater than clinical
isolates (animal: 2.96 ± 1.07 versus lymphocutaneous form: 2.37 ± 0.43; fixed form: 2.33
± 0.53). Isolates from the Northeast region exhibited the lowest thermotolerance and the
Northern isolates exhibited the highest thermotolerance. Animal isolates are better
thermotolerants than clinical isolates. The Brazilian isolates showed great genetic
diversity when analyzed by RAPD. By Southern blot using the endonuclease APA I to
study polymorphism of ITS regions, three genotypes were obtained. There was no
association between RAPD and Southern profiles with clinical forms origin or geographic
origin. The protein/glycoprotein secretion was variable among isolates and was directly
influenced by the medium composition. All Brazilian isolates studied produced DNAse
and urease exoenzymes, 15.78% produced gelatinase, 26.31% produced proteinase
and 21.05% produced caseinase. All analyzed isolates grew at 16,6% of glycerol,
89,47% grew at 20% of glycerol and all of them were inhibited at 23% and 28,5 % of
glycerol. All analyzed isolates grew at 6% and 8% of NaCl, 42.10% grew at 9% and 10%
of NaCl and all of them were inhibited at 12% of NaCl. All of them were able to grow at
pH 2.2 to 12.5. The pathogenicity and virulence were variable among isolates and it can
be related to the genotype. Different proteins were recognized by sera of infected mice
and the 60 kDa molecule was the most one recognized in murine system. In relation to
human sporotrichosis, 70 kDa and 38 kDa molecules were common recognized by sera
from patients with fixed and lymphocutaneous sporotrichosis. The crude exoantigen of
Ss 118 isolate and the SsCBF fraction are able to be used in the diagnosis of feline
sporotrichosis by ELISA. The SsCBF fraction is able to elicit DTH immune response in
infected mice. In general, our results indicate that Brazilian isolates are heterogeneous,
which present individual phenotyping and genotyping characteristics, independent of
origin. Only the conidial area and thermotolerance were related to origin. / BV UNIFESP: Teses e dissertações
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.unifesp.br:11600/10384 |
| Date | January 2009 |
| Creators | Fernandes, Geisa Ferreira [UNIFESP] |
| Contributors | Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), Camargo, Zoilo Pires de [UNIFESP] |
| Publisher | Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | 231 f. |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UNIFESP, instname:Universidade Federal de São Paulo, instacron:UNIFESP |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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