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Previous issue date: 2015-03-30 / Sjögren's syndrome (SS) is a chronic inflammatory disease that affects the epithelial
tissue of exocrine secretion glands, characterized by immunological changes as the
infiltration of salivary and lacrimal glands by CD4 + T lymphocytes and B lymphocytes and
the presence of autoantibodies against nuclear antigens. Genetic, hormonal and
environmental factors are also important in its pathogenesis. In its diagnosis are used
different criteria approved by the American College of Rheumotology (ACR) and the
European Call Against Rheumatism (EULAR) which include semi-quantitative histological
examination of samples of minor salivary glands sublabial processed in paraffin and stained
with hematoxylin-eosin (foci scores; 50 lymphocytes/4 mm2). From the experimental point
of view, this method is susceptible to bias, since it is based on an extremely limited area of
tissue to be analyzed and has the potential to result in lower precision and accuracy. In an
attempt to minimize such bias this proposal aims to standardize quantitative morphometric
measurements in minor salivary gland biopsies (GSM) in SS suspected patients using
stereological tools free of systematic bias, therefore, to ensuring precision and accuracy in
morphometry. Such tools allow the detection of minimal morphological changes that would
otherwise be overlooked by semi-quantitative assessment of routine. To this end, 10
biopsies of female patients suspected of having SS were histologically processed and
embedded in acrylic resin hydroxyethyl methacrylate (Technovit 7100, Heraues-Kulzer,
Germany). The blocks containing the biopsy fragments were randomly oriented to allow
obtaining isotropic sections (Orientator). Serial sections (6-13/biopsy) were stained with
eosin hematoxylin and Harrys. Fields of view chosen in a uniform, systematic and random
way were photographed and analyzed quantitatively using appropriate software (IMOD
4.5/Stereology). Based on the criteria for the diagnosis of SS by the ACR, patients were
divided into Group Non-SS (N = 4; 0-1 satisfied criterion) and SS group (N = 6; 2-3 criteria
met). In evaluating the density of the components of GSMs (t-test), there was a significant
increase in the proportion of lymphocytes in the SS group (p = 0.033). The other components
showed no significant changes. The number of lymphocytes (p=0.025) and
lymphoplasmacytic infiltrates (p = 0.038) were increased in the SS group, but no significant
change was observed in the number of plasma cells and the volume of GSMs between
groups. The CE of GSM Cavaliere volume remained below 5%. The number of evaluated
sections influences the precision and accuracy of the results. There is no correlation
between pathological score and stereological evaluation of lymphocytic infiltrates. The SS
group was characterized by the presence of positive values for the Anti-SSA antibodies/Anti-
SSB, high focal score and reduced dry score. We conclude that quantitative analysis of GSM
by stereology provides detailed information that can implement and complement the
laboratory and clinical findings in the diagnosis of Sjögren's syndrome. / No diagnóstico da Síndrome de Sjögren (SS) usamos os critérios aprovados pela
American College of Rheumotology (ACR), que é uma doença inflamatória crônica do tecido
epitelial das glândulas de secreção exócrina. É caracterizada por alterações imunológicas
como a infiltração das glândulas salivares e lacrimais por linfócitos T CD4+ e linfócitos B e
pela presença de autoanticorpos contra antígenos nucleares. Do ponto de vista
experimental, as metodologias envolvidas nesta caracterização são suscetíveis ao viés, visto
que se baseiam em uma área extremamente restrita de tecido a ser analisado e têm o
potencial de gerar resultados com baixa precisão e acurácia. A proposta neste trabalho foi
padronizar medidas morfométricas usando estereologia na glândula salivar menor (GSM) de
pacientes suspeitos de SS afim de garantir precisão e acurácia na determinação de SS. Para
tal, 10 biópsias de mulheres foram processadas histologicamente e incluídas em resina
acrílica. Seções seriais (6-13/biópsia) foram coradas após a fragmentação da biópsia em
blocos orientados ao acaso, para permitir a obtenção de seções isotrópicas (orientator).
Campos de vista escolhidos de forma uniforme, sistemática e ao acaso foram fotografados
em Estereomicroscópio Digital System e analisados quantitativamente. Aplicando os critérios
da ACR para SS, houve segregação dos pacientes em Grupo Não-SS e Grupo SS. Na avaliação
da densidade de volume dos componentes das GSMs (test-t) houve um aumento
significativo na proporção de linfócitos do Grupo SS (p = 0,033). Os demais componentes não
apresentaram alterações significativas. O número de linfócitos (p = 0,025) e infiltrados
linfoplasmocitários (p = 0,038) estiveram aumentados no Grupo SS, contudo nenhuma
alteração significativa foi observada no número de plasmócitos e no volume das GSMs entre
os grupos. Na determinação do volume da GSM o coeficiente de erro manteve-se abaixo de
5%. O número de seções avaliadas influencia a precisão e acurácia dos resultados. Não há
correlação entre os dados patológicos e o estereológico na avaliação dos infiltrados
linfocitários. Concluímos que a análise estereológica fornece informações detalhadas que
podem implementar e complementar os achados no diagnóstico da Síndrome de Sjögren.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:http://localhost:tede/5613 |
| Date | 30 March 2015 |
| Creators | Mallmann, Cacilda Satomi Yano |
| Contributors | Passos, Luiz Fernando de Souza, Costa, Oscar Tadeu Ferreira da |
| Publisher | Universidade Federal do Amazonas, Programa de Pós-graduação em Imunologia Básica e Aplicada, UFAM, Brasil, Instituto de Ciências Biológicas |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAM, instname:Universidade Federal do Amazonas, instacron:UFAM |
| Rights | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 8851295382702565619, 600, 500, 1984485651082134923 |
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