Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su documento / Calidad de vida relacionada a la salud Bucal y síndrome de Sjögren. Los pacientes con síndrome de Sjögren (SS), enfermedad autoinmune que afecta las glándulas exocrinas, presentan xerostomía, hiposialia y modificaciones en la composición salival. Las consecuencias de estas alteraciones que afectan la calidad de vida relacionada con la salud bucal (CVRSB) no han sido suficientemente analizadas. Objetivo: Evaluar calidad de vida relacionada con la salud oral en pacientes con Síndrome de Sjögren y relacionarla con el nivel a sensación de boca seca. Método: La muestra (n=99), fue seleccionada desde Hospitales: San Borja, Cordillera, Barros Luco, San Juan de Dios y de la Clínica de la Facultad Odontología de la Universidad de Chile, de los cuales 33 correspondieron a pacientes con diagnóstico de síndrome de Sjögren basado en el Consenso Americano–Europeo del año 2002 y 66 individuos pertenecientes al grupo control. Todos ellos respondieron dos cuestionarios: el Geriatric Oral Health Assessment Index (GOHAI), que valora CVRSB y el Xerostomia inventory (XI), que evalúa percepción de boca seca. Los resultados obtenidos fueron resumidos en promedios y las comparaciones entre ambos grupos fueron realizadas con el Test de Wilcoxon (p= 0.05). Resultados: Los pacientes con SS mostraron puntajes menores en el GOHAI (38,5±11,9) respecto al grupo control (45.6 ± 11,4); (p= 0,003). Un 100% de los pacientes con Sjögren presentaron xerostomía, mientras que un 37,8% de los controles autoreportaron este síntoma. La xerostomía evaluada a partir del cuestionario XI en todos los pacientes con o sin Sjögren, se asoció a una peor CVRSB. Conclusión y discusión: Los pacientes con SS presentan una pobre CVRSB, y la xerostomía parece tener una influencia importante en la mala calidad de vida relacionada a la salud bucal, no sólo en los pacientes con SS, sino también sin Sjögren, mostrando de ésta forma un alto impacto en la CVRSB.

El síndrome de Sjögren (SS) es una enfermedad autoinmune sistémica que se caracteriza fundamentalmente por la presencia de sequedad ocular (xeroftalmía) y bucal (xerostomía), debido a la infiltración de las glándulas lagrimales y salivares por células linfoplasmocitarias. Estos infiltrados originan una destrucción progresiva de las glándulas exocrinas, con la consiguiente disminución de las secreciones glandulares y la aparición de sintomatología relacionada con la sequedad de las mucosas infiltradas. La hiperactividad de los linfocitos B periféricos es el principal dato inmunológico presente en el SS.

El síndrome de Sjögren es una enfermedad autoinmune que causa alteraciones en la estructura y función de las glándulas exocrinas debido a la destrucción de la lámina basal de acinos y ductos, y a la degradación de las principales proteínas de matriz extracelular. El progresivo reemplazo de componentes exocrinos por tejido adiposo y fibroso, conduce a la sequedad de mucosas, principalmente oral (xerostomía) y ocular (xeroftalmia), que son los principales síntomas de esta enfermedad. En las glándulas de estos pacientes, también se pueden encontrar focos de infiltrado linfocitario, los que se correlacionan con el progreso de la enfermedad. Sin embargo, cambios importantes en las células epiteliales y la matriz extracelular, darían cuenta del desarrollo de esta enfermedad de manera independiente a la presencia de infiltrado de células mononucleares. A nivel molecular, la degradación de la matriz extracelular es inducida por un desequilibrio entre metaloproteinasas de matriz y sus inhibidores tisulares, favoreciendo la actividad proteolítica. La degradación de componentes de la lámina basal desorganiza la estructura y conduce a la pérdida de anclaje celular a la matriz extracelular. La señalización dependiente de anclaje mantiene la polaridad celular principalmente a través de complejos de adhesión llamados hemidesmosomas. El receptor involucrado en formar estas estructuras es la integrina α6β4, cuyo ligando de mayor afinidad es la laminina-5. Recientemente se ha demostrado que la laminina-5 está sobreexpresada (a nivel de proteínas y mRNA) en glándulas salivales labiales de pacientes con síndrome de Sjögren. Además, análisis de microarreglos de cDNA obtenidos de glándulas salivales labiales de pacientes con síndrome de Sjögren, y comparados con los obtenidos de individuos control, han demostrado que varias proteínas citoplasmáticas normalmente asociadas a la integrina α6β4, por ejemplo BP230 y citoqueratina 8/18, están sobreexpresadas. Las integrinas, además de su papel como mediadores de la interacción célulamatriz, participan en la señalización hacia y desde la célula (señalización bidireccional), la que es importante para regular procesos como proliferación, diferenciación y muerte celular. Por lo tanto, la degradación no regulada de lámina basal, no sólo modifica las propiedades de adhesión de la célula, sino también las señales que estos receptores xiii llevan al interior de la célula, conduciendo a importantes cambios que pueden llevar a la muerte celular. De esta manera, se decidió analizar los niveles de expresión y localización subcelular de la integrina α6β4 en células acinares de pacientes con síndrome de Sjögren e individuos control, y así estudiar si estos se relacionan con los cambios que ocurren en estas glándulas. Se propuso la siguiente hipótesis: “En glándulas salivales de pacientes con síndrome de Sjögren la pérdida de adhesión de células acinares a su lámina basal y la sobreexpresión de laminina-5, se acompañan de una sobreexpresión y/o redistribución de la integrina α6β4” Para evaluar esta hipótesis, se determinaron los niveles de mRNA y de proteínas de las subunidades α6 y β4 en glándulas salivales de pacientes con síndrome de Sjögren y se compararon con los resultados obtenidos de individuos controles. Además, mediante inmunohistoquímica, usando anticuerpos específicos para cada subunidad, se analizó la localización de la integrina α6β4 en la membrana plasmática de células acinares y la de laminina en láminas basales de acinos de glándulas salivales. Los resultados obtenidos no mostraron diferencias significativas en los niveles relativos de mRNA entre pacientes y controles, tanto para la integrina α6 (p = 0,49) como para la integrina β4 (p = 0,71). Al analizar los niveles relativos de proteínas, en el caso de α6, no se encontraron diferencias significativas entre el grupo total de pacientes y el grupo control (p = 0,2), sin embargo, al separar el grupo de pacientes en dos subgrupos de acuerdo a su nivel de expresión, se encontró que el que presentaba niveles menores no tenía diferencias significativas respecto al grupo control (p = 0,296), mientras que el otro, que presentaba niveles relativos mucho más altos, sí mostró diferencias significativas (p = 0,014). En cuanto a la proteína β4, ésta se encontró de manera intacta (200 kDa) y proteolizada (172 y 145 kDa) tanto en pacientes como en controles. De ambas formas, los niveles fueron significativamente menores en pacientes respecto a controles (p = 0,02). En cuanto a la localización subcelular de la integrina, en pacientes se encontró una importante redistribución hacia la superficie lateral de la célula, encontrándose xiv incluso a nivel citoplasmático en los casos de mayor desorganización de la lámina basal. Estos y otros resultados confirman de manera parcial la hipótesis, donde el mecanismo de rescate al desanclaje podría llevarse a cabo a través de la redistribución de la integrina α6β4 a nivel subcelular. Existirían otros mecanismos por los cuales se mantendrían activas algunas de las señales dependientes de anclaje, para completar el sistema de rescate a la muerte celular, y que no pasarían necesariamente por una mayor cantidad de integrina α6β4.

Magister en biomedicina celular y molecular / El síndrome de Sjögren (SS) es una enfermedad autoinmune, inflamatoria, crónica y sistémica, de etiología desconocida y afecta principalmente a glándulas salivales y lagrimales. Se ha estudiado la respuesta a proteínas mal plegadas (UPR= del inglés Unfolded protein response) en glándulas salivales labiales (GSL) de pacientes SS, evidenciando diferencias en la expresión de componentes de la vía de señalización IRE1α (Inositol-requiring enzyme 1a). En esta tesis se evaluó si los cambios de expresión de proteínas involucradas en la vía IRE1α podría deberse a cambios epigenéticos. En este contexto, se realizó el análisis de metilación global del DNA y de las regiones promotoras de genes de la vía IRE1α en GSL de pacientes SS y controles. También se estudió el efecto de citoquinas pro-inflamatorias, sobre el estado de metilación de promotores de genes de la vía IRE1α en cultivos de células de glándula submandibular humana (HSG). La metilación de los promotores se evaluó mediante PCR sensible a metilación o análisis de disociación de alta resolución sensible a metilación y la metilación global se determinó mediante inmunofluorescencia. Los resultados obtenidos mostraron un aumento significativo en la metilación de los promotores de los genes IRE1α, XBP-1 (del inglés X box-binding protein-1) y GRP78 (del inglés Glucose-Regulated Protein, 78kDa) en GSL de pacientes SS. Se observó una correlación positiva significativa del estado de metilación de los promotores mencionados con los niveles de citoquinas pro-inflamatorias (TNF-α e IFN-γ) presentes en las GSL. La metilación global del DNA en cortes de GSL de pacientes SS mostró una disminución significativa comparada con los individuos controles. La metilación global del DNA se relacionó negativamente con el score de foco. La hipometilación global del DNA de GSL de pacientes SS podría explicar la sobre-expresión de ciertos genes, como se ha demostrado en otras enfermedades autoinmunes, como LES. En células HSG tratadas con TNF-α o IFN-γ (10 ng/mL) se evidenció un aumento en el índice de metilación del promotor de GRP78 luego de 24 hrs de tratamiento, mientras que para el promotor de IRE1α se encontró un aumento en el estado de metilación luego de 48 hrs de estimulación con TNF-α (1 ng/mL). El aumento de la metilación en los promotores de los genes de IRE1α, XBP-1 y GRP78 podría explicar, en parte, los niveles disminuidos de sus respectivos mRNAs en las GSL de pacientes SS. Los análisis de correlación sugieren que las citoquinas podrían regular el estado de metilación de los tres promotores estudiados en GSL de pacientes SS. Más aún, los estudios in vitro muestran que las citoquinas pro-inflamatorias (TNF-α e IFN-γ) aumentan los niveles de metilación en los promotores de IRE1α y GRP78, resultados que validan los análisis de correlación entre los niveles de mRNAs de estas citoquinas y los índices de metilación de los promotores respectivos en GSL de pacientes SS.

El síndrome de Sjögren es una enfermedad sistémica autoinmune de etiología indeterminada, que se caracteriza por la infiltración linfocitaria de las glándulas exocrinas. Las glándulas lacrimales y salivales son los principales órganos afectados, originando el cuadro clásico de sequedad: xeroftalmia y xerostomía. Es una enfermedad de distribución mundial, la cual no se conoce su exacta prevalencia. El SS debe evaluarse desde un punto de vista multidisciplinario, con participación activa del médico reumatólogo, oftalmólogo y odontólogo. La biopsia de glándulas salivales menores es una técnica considerada como el principal criterio de ayuda al diagnóstico del Síndrome de Sjögren, es de baja complejidad y tolerada por los pacientes. Se realizó un estudio descriptivo de revisión de 100 Historias clínicas de pacientes que acudieron al servicio de Estomatología quirúrgica del Hospital Nacional Arzobispo Loayza en el periodo 2008 al 2012, con biopsias de glándulas salivales menores para confirmar el diagnóstico de Síndrome de Sjögren. El objetivo de esta investigación es determinar la prevalencia de pacientes con SS y hacer énfasis en la importancia clínica y necesidad del diagnóstico precoz mediante la biopsia de glándulas salivales menores. Se encontró una alta prevalencia de la enfermedad y predominio en mujeres de la quinta década de vida. Sin embargo, no se encontró relación entre el género y grupo etario con la enfermedad de Sjögren. Palabras clave: Síndrome de Sjögren, prevalencia, biopsia de glándulas salivales menores. / Sjögren's syndrome is a systemic autoimmune disease of undetermined etiology, characterized by lymphocytic infiltration of the exocrine glands. Tear and salivary glands are the main organs affected, causing the classic symptoms of dryness: xerophthalmia and xerostomia. It is a worldwide disease, which does not know its exact prevalence. The SS should be evaluated from a multidisciplinary perspective, with active participation of the rheumatologist, ophthalmologist and dentist. The minor salivary gland biopsy technique is considered as the main criteria for the diagnosis of Sjögren's syndrome, is of low complexity and tolerated by patients. We conducted a descriptive review of 100 medical records of patients who presented to Surgical Stomatology Arzobispo Loayza National Hospital in the period 2008 to 2012, with minor salivary gland biopsy to confirm the diagnosis of Sjögren's syndrome. The objective of this research is to determine the prevalence of patients with SS and emphasize the clinical importance and necessity of early diagnosis by biopsy of minor salivary glands. We found a high prevalence of the disease and prevalence in women in the fifth decade of life. However, no relationship was found between gender and age group with Sjögren's disease. Key words: Sjögren’s Syndrome, prevalence, minor salivary gland biopsy.

Tesis presentada para optar al Grado de Doctor en Farmacología / El Síndrome de Sjögren (SS) es una enfermedad autoinmune sistémica, que afecta a las glándulas exocrinas, principalmente a las glándulas salivales y lagrimales, generando en los pacientes síntomas de sequedad bucal y ocular. La etiopatogenesis del SS es desconocida, la visión clásica de la patología se centra en la relación de los factores de predisposición (factores genéticos, neurohormonales, células inflamatorias) y factores extrínsecos (por ejemplo virus) que inducen una respuesta inmune. Sin embargo, la pérdida de la homeostasis de las células epiteliales también podría generar la activación del sistema inmune. Resultados previos demuestran que las células acinares de glándulas salivales labiales (GSL) de pacientes SS presentan alteraciones en su polaridad. Esta pérdida de polaridad afecta la localización de componentes de la maquinaria exocítica como las proteínas SNAREs (STX3, STX4, VAMP8). La correcta interacción entre las proteínas SNAREs de la membrana de gránulos de secreción y de la membrana plasmática permite su reconocimiento y fusión contribuyendo así, a la especificidad de las vías de tráfico de membranas. Estos antecedentes sugieren que la pérdida de polaridad también podría estar alterando otros componentes de la maquinaria exocítica, como son Sinaptotagmina-I (Syt-I) y la correcta señalización de Ca2+. La exocitosis y la señalización por Ca2+ son procesos altamente polarizados en las células acinares de las GS. La señal de Ca2+ es sensada por Syt-I, que sirve de nexo entre el estímulo y la maquinaria exocítica (proteínas SNAREs). El mecanismo a través del cual Syt-I ejerce su función moduladora, depende de su interacción con PIP2 (fosfatidil-inositol-4,5-difosfato), siendo un proceso polarizado y dependiente de Ca2+. PIP2 favorece la interacción de Syt-I con la membrana plasmática, permitiendo la exocitosis. Los antecedentes sobre Syt-I, PIP2 y Ca2+ en las células acinares de pacientes SS son escasos, por no decir inexistentes. Las células acinares de GSL de pacientes SS muestran una sobre-expresión significativa del mRNA de Syt-I en comparación a controles, esta última evaluada mediante microarreglos de cDNA. En relación a la señalización de Ca2+, la literatura reporta alteraciones en la regulación del volumen celular y una menor sensibilidad a la estimulación con acetilcolina en células acinares de pacientes SS. Cabe destacar que la mayoría de los estudios están dirigidos al transporte de agua y no consideran su participación en la secreción de los componentes proteicos de la saliva, en donde su rol junto a otros segundos mensajeros puede ser relevante. En base a estos antecedentes, se postuló la hipótesis de esta tesis: “En GSL de pacientes SS hay un aumento de la expresión de Syt-I y una alteración de su localización, que se acompaña de cambios en la polaridad celular y en la dinámica de distribución del Ca2+. Estas alteraciones determinan cambios en la capacidad exocítica”. Esto podría explicar en parte la hipofunción glandular. Para la validación de esta hipótesis, nuestro objetivo general fue: Determinar en glándulas salivales labiales (GSL) de pacientes SS y en un modelo de cultivo acinar de células derivadas de glándula submandibular humana (HSG: human submandibular gland cell line) cultivadas en 3 dimensiones (3D), alteraciones en componentes que participan en la exocitosis como son: Syt-I, PIP2 y Ca2+. Los objetivos específicos fueron: 1) En GSL de pacientes SS y controles: Determinar los niveles de mRNA y de proteína, la presencia de Syt-I en complejos SNAREs pre-existentes y la localización subcelular de Syt-I, y además, la localización polarizada de PIP2 en los dominios apicales y basales de la membrana plasmática de células acinares, 2) En cultivos 3D de células HSG: Caracterizar la señalización de Ca2+ y determinar la polaridad de los eventos exocíticos bajo la estimulación con agonistas colinérgicos y -adrenérgicos, y 3) evaluar el efecto de la sobre-expresión de Syt-I en la secreción. Nuestros resultados mostraron que Syt-I se encuentra sobre-expresada y forma parte de los complejos SNAREs preexistentes en las GSL de pacientes SS. Syt-I está presente en la región basolateral de las células acinares, donde mostró una parcial colocalización con STX4. PIP2 mostró una relocalización desde el polo apical hacia el polo basolateral en GSL de pacientes SS. La relocalización de PIP2 observada, fenómeno sumado a la presencia de complejos SNAREs en el dominio basolateral de pacientes SS, donde Syt-I se encuentra presente, podría explicar en parte, el fenómeno de exocitosis ectópica de mucinas observado en las GSL de pacientes SS. Por otro lado, los acinos originados por las células HSG cultivadas en 3D expresaron Syt-I, la cual presentó una distribución similar a la observada en GS. Estas células, al ser estimuladas con agonistas colinérgicos y adrenérgicos, generaron una señalización polarizada de Ca2+ y eventos exocíticos. Cabe destacar, que la señalización de Ca2+ y la generación de eventos exocíticos fueron dependientes, tanto del Ca2+ extracelular, como de la organización polarizada de los acinos. La sobre-expresión de Syt-I por sí sola no generó cambios en la polaridad ni en la cantidad de los eventos exocíticos, pero generó un incremento en la magnitud de estos eventos en el polo apical. Al incubar los acinos en cultivo con citoquinas pro-inflamatorias se indujo alteración en la polaridad, que en conjunto con la sobre-expresión de Syt-I, generaron un incremento en la magnitud y número de eventos exocíticos en el polo basal, reproduciendo el efecto que podrían tener estos factores en la inducción de exocitosis ectópica en las GSL de pacientes SS. Los resultados obtenidos nos permitieron concluir que: 1. Los pacientes SS muestran una respuesta exacerbada de la maquinaria exocítica en condiciones basales, lo cual se correlaciona con el aumento de los niveles de expresión de Syt-I encontrados; 2. La presencia de Syt-I en los complejos SNAREs en el dominio basolateral de células acinares de pacientes SS y la relocalización de PIP2, sugieren que estos complejos son funcionales y generan focos de exocitosis ectópica; 3. La presencia de mucinas en la matriz extracelular (MEC) de las GSL de pacientes SS, descrita previamente, sería el resultado de un proceso exocítico aberrante provocado por pérdida de polaridad y alteraciones en la señalización de Ca2+ y en la expresión y localización de componentes de la maquinaria exocítica, como las proteínas SNAREs, Syt-I y PIP2, entre otras; 4. Los acinos 3D al presentar similitudes respecto a la señalización de Ca2+ y la generación de eventos exocíticos a las células acinares de GS, nos permitirán evaluar los efectos de las alteraciones observadas en GSL de pacientes SS / Sjögren´s syndrome (SS) is a systemic autoimmune disease that affects exocrine glands, mainly lacrimal and salivary glands, causing mouth and eye dryness. SS etiopathogenesis is unknown; the classical approach has focused in the interplay between predisposing factors (genetic and neuro-hormonal factors and extrinsic factors such as viruses) and autoimmune response. However, the loss of glandular epithelial cell homeostasis might trigger immune system activation. We have demonstrated that acinar-cells of labial salivary glands (LSG) of primary SS-patients (pSS) show changes in cell polarity, leading to mislocalized components of the exocytic machinery, such as SNARE proteins (STX 3, STX 4, VAMP8). Changes of cell polarity could affect additional components involved in the exocytic process including synaptotagmin I (Syt-I), and Ca2+. Exocytosis and Ca2+ signaling are polarized processes in acinar-cells. Ca2+ signals are sensed by Synaptotagmin-I (Syt-I), a protein that may also act as a linker between Ca2+ stimulus and the exocytic machinery (SNARE proteins). The mechanism by which Syt-I achieves its modulatory function depends on its binding to phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate (PIP2), which is Ca2+ dependent. PIP2 promotes an interaction between Syt-I and plasma membrane, allowing exocytocis. Previous antecedents on Syt-I, PIP2 and Ca2 + in acinar cells of SS-patients are scarce. Acinar-cells of LSG from SS-patients show a less sensitive Ca2+-response to acetylcholine stimulation and a significant upregulation of Syt-I mRNA. Most of the studies about Ca2+ signaling in salivary glands are focused in water mobilization and do not consider the cooperation of the protein components of saliva with the secretion process. According to the evidence above presented, the following hypothesis was postulated: In LSG from SS-patients there is high expression level of Syt-I and a change of its localization, which is accompanied by changes in cell polarity and Ca2+ signaling. Therefore, our main goal was to determine alteration in components involved in the exocytic process including Syt-I, PIP2 and Ca2+ signaling, both in LSG from SS-patients and in 3D HSG acini (HSG: human submandibular gland cell line). Specific aims were: 1) Determine Syt-I expression and localization as well as PIP2 localization. Moreover, determine if Syt-I is present in preformed fusion complexes in LSG of SS-patients compared to controls. 2) To evaluate Ca2+ signaling and exocytosis and as they are affected by changes of cell polarity in 3D HSG acini; 3. Evaluate the effect of Syt-I overexpression on exocytosis. Our results demonstrated that Syt-I is overexpressed in SS patients and is present in preformed fusion complexes. In addition, Syt-I is present in the basolateral pole of acinar cells, showing partial colocalization with the SNARE protein STX4. PIP2, a plasma membrane lipid with an essential role in exocytosis, was found to be relocated from the apical pole to the basal pole in LSG of SS-patients. PIP2 relocalization together with presence of SNARE complexes in the basolateral domain of SS patients where Syt-I is present, provide a partial explanation of the ectopic exocytic phenomena observed in acinar cells of SS patients. On the other hand, we demonstrated that the 3D acini of HSG cells is a culture model which adequately resembles the intracellular Ca2+ signaling and exocytic process occurring in acinar cells of salivary glands upon cholinergic and adrenergic agonist stimuli. Ca2+ signaling and exocytic events were dependent on extracellular Ca2+ and cell polarity. Moreover, our results showed that overexpression of Syt-I by itself did not generate changes of polarity of exocytic events, but generates an increase in the magnitude of exocytic events in the apical pole of 3D HSG cells. However, the synergy between altered polarity induced by preincubation with cytokines and the overexpression of Syt-I would be responsible for an increase in the magnitude and number of exocytic events at the basal pole of 3D HSG cells. In summary, results obtained in this thesis allow us to conclude that in LSG of SS patients: 1) There is an enhanced response at baseline exocytic machinery, which correlates with increased SYT-I expression levels found; 2) The presence of Syt-I in preformed fusion complexes SNARE at the basolateral domain and the relocation of PIP2, suggest that such complexes are functional and induce aberrant basolateral exocytosis; 3) The presence of mucins in ECM, previously described, could be the result of an aberrant exocytic process caused by changes of cell polarity, Ca2 + signaling and altered expression and localization of components involved in the exocytic process such as SNAREs, Syt-I and PIP2, among others; 4) 3D acini showing comparable Ca2+ signaling and exocytic events respect to LSG acinar cells, will allow us to evaluate the effects of alterations observed in LSG of SS patient

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2015. / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2015-05-19T19:44:15Z No. of bitstreams: 1 2015_FlaviaMarquesBorbaModesto.pdf: 1257832 bytes, checksum: afcc42e607748a9f1617decfacbcbac9 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2015-05-19T20:14:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_FlaviaMarquesBorbaModesto.pdf: 1257832 bytes, checksum: afcc42e607748a9f1617decfacbcbac9 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-19T20:14:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_FlaviaMarquesBorbaModesto.pdf: 1257832 bytes, checksum: afcc42e607748a9f1617decfacbcbac9 (MD5) / Objetivo Avaliar as manifestações bucais e a qualidade de vida de pacientes com Síndrome de Sjögren, comparando com controles saudáveis, pareados por sexo, idade e condição socioeconômica. Metodologia Estudo clínico, transversal, observacional com grupo controle, aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da Faculdade de Medicina da Universidade de Brasília. A amostra estudada compreendeu 25 pacientes com Síndrome de Sjögren (SS) de acordo com o critério diagnóstico do Grupo Americano-Europeu (Vitali et al, 2002) e 46 controles saudáveis. Foram obtidos os fluxos da saliva total não estimulada e estimulada; as características clínicas da mucosa bucal; os índices CPOD e CPOS, da coroa e da raiz e o índice CPOS1 da coroa; o Índice de sangramento gengival e a concentração total de IgA, pelo método de nefelometria. O grau de xerostomia e a qualidade de vida foram analisados pelo Inventário de xerostomia (XI) e pelo Perfil de Impacto na Saúde Oral (OHIP14), respectivamente. As variáveis qualitativas foram analisadas por meio do teste de Qui Quadrado para k proporções, as variáveis quantitativas foram analisadas por meio do teste t para amostras independentes e a concentração da IgA salivar total foi avaliada por meio do teste não paramétrico de Mann-Whitney-U. A correlação de Spearman foi realizada entre as variáveis do estudo, para o grupo de pacientes com Sjögren e para o grupo controle. Em todos os testes estatísticos foi aplicado um nível de significância equivalente a p<0,05. Resultados e Conclusões O fluxo salivar total não estimulado e o estimulado, e a qualidade de vida foram significativamente menores nos pacientes com SS (p<0.001). O índice CPOS1, a intensidade da xerostomia, a frequência de mucosa seca (p<0,0001), de língua seca e atrófica (p<0,05), de saliva com aparência espumante em fundo de saco (p<0,05), a frequência de sangramento gengival à sondagem e a concentração total da IgA estimulada e não-estimulada foram significativamente maiores nos pacientes com SS (p<0.001). Na SS, foram encontradas associações positivas e significativas entre a idade e o tempo de doença versus os índices CPOD, CPOS e CPOS1 da coroa, XI versus OHIP-14 e LCR versus IgA NE. O fluxo NE correlacionou-se negativamente com a IgA NE e o XI. Não houve diferença significativa entre os grupos quanto aos índices CPOD, CPOS e à presença de sinais de candidíase. / Objective: To assess the oral manifestations and the impact of oral health on the health-related quality of life in 25 patients with SS diagnosed according to the criteria of the American-European Consensus (Vitali et al, 2002) and compared with those for 46 healthy volunteers matched for age, sex, and socioeconomic status. Methods: This is a cross-sectional study. The Oral Health Impact Profile 14 (OHIP-14) and Xerostomia Inventory (XI) scores were determined to assess the impact of oral health on the health-related quality of life and degree of xerostomia, respectively. The total unstimulated and stimulated salivary flow rates, the clinical features of the oral mucosa, DMFT, DMFS and DMFT1, total IgA and gingival bleeding index were evaluated. Qualitative variables were analyzed using the chi-square test for k proportions. Quantitative variables were analyzed using the t-test. Total IgA were analyzed using MWU test. Spearman’s correlation was performed to identify associations between studying variables. A significant level of p< 0,05 was applied for all tests. Results and conclusions: The unstimulated and stimulated salivary flow rates, and the health-related quality of life were significantly lower for the SS patients than for the controls (p<0.001). DMFT1, xerostomia, oral mucosa dryness, gingival bleeding scores and total IgA were higher in SS patients (p<0.001). In SS patients, unstimulated salivary flow rates were inversely correlated with IgA NE and XI. The OHIP-14 scores correlated significantly with higher XI scores, LCR correlated significantly with higher IgA NE concentrations, age and disease duration correlated significantly with higher CPOD, CPOS e CPOS1 of crown. DMFT, DMFS and candidiasis signs were not different between SS and control group.

Submitted by Lucelia Lucena (lucelia.lucena@ufpe.br) on 2015-03-13T18:19:26Z No. of bitstreams: 2 Thayse_Dissertação_Mestrado_Versão_digital_PDF.pdf: 2187282 bytes, checksum: 574c645d29398a26992485b1f0f10279 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-13T18:19:26Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Thayse_Dissertação_Mestrado_Versão_digital_PDF.pdf: 2187282 bytes, checksum: 574c645d29398a26992485b1f0f10279 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012-02-07 / FACEPE / Introdução: As citocinas desempenham um papel vital na regulação do sistema imunológico participando da patogênese de várias doenças auto-imunes, incluindo a síndrome de Sjögren. O objetivo deste estudo foi investigar a influência dos polimorfismos genéticos da interleucina-6, interleucina-10, fator de necrose tumoral alfa e interferon-gama na artrite reumatóide (AR), síndrome de Sjögren secundária (SSs) à artrite reumatóide e controles saudáveis (C). Materiais e métodos: Uma amostra de 138 pacientes foi dividida em três grupos, RA (n=66), SSs (n=20) e C (n=52). Os pacientes foram submetidos a avaliação clínica mediante aplicação do teste de Schirmer, teste de fluxo salivar em repouso, biópsia de glândulas salivares menores e testes sorológicos para diagnóstico da SS e evolução da AR. Amostras de células da mucosa oral foram coletadas e o DNA isolado foi submetido a genotipagem mediante as técnicas de Restriction Fragment Length (IL-6, IL-10 e TNF- e PCR alelo-específica (IFN- Esses dados foram analisados e comparados com o polimorfismo de cada citocina. Resultados: Não houve diferenças significativas nos genótipos e freqüências alélicas das citocinas entre SSs e AR. As freqüências dos polimorfismos de IL-6-174GC e TNF- -308GA em pacientes com artrite reumatóide (AR + SSs), foram significativamente diferentes dos pacientes controles. Os portadores do alelo G (IL-6) e A (TNF-) foram significativamente associados com maior suscetibilidade à artrite reumatóide, mas não à SSs. O polimorfismo de IL-6 foi associado com a infiltração linfocitária em glândulas salivares menores, teste de Schirmer e com anti-CCP positivos. O polimorfismo de TNF- foi igualmente associado à positividade de anti-CCP, anti-SSA e proteína C reativa. Conclusão: Estes resultados sugerem que os polimorfismos genéticos de IL-6 -174GC e TNF- -308GA parecem estar associados com a susceptibilidade à AR, mas não à SSs. Ainda, o polimorfismo de IL-6 parece influenciar de alguma forma a presença de infiltrado inflamatório em glândulas salivares e lacrimais.

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:01:39Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8941_1.pdf: 2187591 bytes, checksum: 68e5147d4e8f8ccd762bb4c00dcf703d (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2012 / Faculdade de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco / Introdução: As citocinas desempenham um papel vital na regulação do sistema imunológico participando da patogênese de várias doenças auto-imunes, incluindo a síndrome de Sjögren. O objetivo deste estudo foi investigar a influência dos polimorfismos genéticos da interleucina-6, interleucina-10, fator de necrose tumoral alfa e interferon-gama na artrite reumatóide (AR), síndrome de Sjögren secundária (SSs) à artrite reumatóide e controles saudáveis (C). Materiais e métodos: Uma amostra de 138 pacientes foi dividida em três grupos, RA (n=66), SSs (n=20) e C (n=52). Os pacientes foram submetidos a avaliação clínica mediante aplicação do teste de Schirmer, teste de fluxo salivar em repouso, biópsia de glândulas salivares menores e testes sorológicos para diagnóstico da SS e evolução da AR. Amostras de células da mucosa oral foram coletadas e o DNA isolado foi submetido a genotipagem mediante as técnicas de Restriction Fragment Length (IL-6, IL-10 e TNF-a) e PCR alelo-específica (IFN-y). Esses dados foram analisados e comparados com o polimorfismo de cada citocina. Resultados: Não houve diferenças significativas nos genótipos e freqüências alélicas das citocinas entre SSs e AR. As freqüências dos polimorfismos de IL-6-174GC e TNF-a -308GA em pacientes com artrite reumatóide (AR + SSs), foram significativamente diferentes dos pacientes controles. Os portadores do alelo G (IL-6) e A (TNF-a) foram significativamente associados com maior suscetibilidade à artrite reumatóide, mas não à SSs. O polimorfismo de IL-6 foi associado com a infiltração linfocitária em glândulas salivares menores, teste de Schirmer e com anti-CCP positivos. O polimorfismo de TNF-a foi igualmente associado à positividade de anti-CCP, anti-SSA e proteína C reativa. Conclusão: Estes resultados sugerem que os polimorfismos genéticos de IL-6 -174GC e TNF-a -308GA parecem estar associados com a susceptibilidade à AR, mas não à SSs. Ainda, o polimorfismo de IL-6 parece influenciar de alguma forma a presença de infiltrado inflamatório em glândulas salivares e lacrimais

Doctorado en Psicología / El Sindrome de Sjögren (SS) es una enfermedad crónica autoinmune caracterizada por las significativas limitaciones físicas que produce y que se traducen en un importante impacto en la calidad de vida. El objetivo de esta investigación fue conocer las experiencias que surgen como resultado de la enfermedad y como impactan en los cuidados en salud y bienestar general con la vida en mujeres chilenas. Se diseñó un estudio de tipo cualitativo de acuerdo a los principios de la teoría fundamentada utilizando como técnica de investigación la entrevista en profundidad. Participaron diecinueve mujeres adultas con diagnóstico médico de SS. Producto del análisis de los relatos surgieron siete categorías que se articularon en torno a una categoría central la cual se denominó “dando la batalla”. Esta hace alusión a la conducta de resistir a la adversidad al mismo tiempo de una constante búsqueda de soluciones. La enfermedad se instala como un agente extraño en sus vidas frente a la cual experimentan incertidumbre y cambios en el rol social. La respuesta del entorno social está caracterizada por la poca comprensión y empatía. La experiencia de enfermedad incide significativamente en las conductas de cuidados en salud y en el bienestar general con sus vidas