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Previous issue date: 2015-02-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conventional micropropagation systems often use culture media supplemented with
sucrose and sealed bottles. This system is called heterotófico as exogenous carbohydrates
are the only source of energy for the plant. Mixotróficos systems, although still adding
sucrose in half, have the differential to allow gas exchange between the internal and
external environment of the culture flask. This ventilation brings many benefits to plant
growth in vitro. By the constant loss of the Savannah area, it is necessary to improve
micropropagation protocols and germplasm conservation of the species within it.
Cryopreservation is considered the best for long-term preservation method and the
encapsulation-dehydration technique have been promising for tropical species. The
objectives were to compare the heterotrophic system in vitro propagation of Eugenia
dysenterica (Mart.) DC. mixotrófico with a system, and get a method of germplasm storage
dysenterica E. vitro by cryopreservation. Identified Gems' positions in the stem (closer to
the root or the apex) were inoculated in tubes with or without gas exchange in WPM
medium supplemented with 0,00μΜ, 0,54μM, 2,69μM, and 5,37μM, NAA, and 0,00μM,
4,44μM, 11,10μM and 17,76μM BAP in all possible combinations. For rooting was used
WPM medium supplemented with IBA to 0,00μM, 9,84μM, 19,68μM, and 29,52μM. The
system of gas exchange was greater in the number of sheets in most analyzed variables.
The type of gem had little influence on the variables. The best treatment in heterotrophic
and mixotrófico systems was 29.52 mM of IBA, with 33.33% and 16.66% respectively
rooting. Acclimatization was performed successfully in both systems. For cryopreservation
was used apexes obtained from plants grown in vitro. The apices were initially suspended
in MS medium supplemented with 3% solution of sodium alginate, 0.4 M glycerol and
4,44μM BAP and dispensed in MS medium solution (free of calcium) supplemented with
0.1 M calcium chloride, 0.4 M glycerol and 4,44μM BAP. The summits were held in three
exposure levels of sucrose (0.25M, 0.5M, and 0.75M) combined will three levels of
desiccation (0 h, 1 h, 2 h) before being frozen in liquid nitrogen. There was no regeneration
in cryopreserved apexes. The best treatment for non-cryopreserved apices consisted of
0.25M sucrose and 1 h of drying. The null regeneration of cryopreserved apices which
indicates that the stress is related to desiccation stress freezing. / Sistemas convencionais de micropropagação, geralmente usam meios de cultura
suplementados com sacarose e frascos vedados. Este sistema é denominado heterotófico
pois os carboidratos exógenos são a única fonte de energia para o vegetal. Sistemas
mixotróficos, embora continuem adicionando sacarose ao meio, possuem o diferencial de
permitir trocas gasosas entre o meio interno e externo do frasco de cultura. Esta ventilação
traz inúmeras vantagens ao crescimento vegetal in vitro. Pela constante perda de área do
Cerrado, torna-se necessário o aprimoramento de protocolos de micropropagação e
também de conservação de germoplasma das espécies deste domínio. A criopreservação é
o considerada o melhor método de conservação à longo prazo e a técnica de
encapsulamento-desidratação têm sido promissora para espécies tropicais. Os objetivos do
trabalho foram comparar o sistema heterotrófico de propagação in vitro de Eugenia
dysenterica (Mart.) DC. com um sistema mixotrófico, e, obter um método de conservação
de germoplasma de E. dysenterica in vitro por criopreservação. Gemas identificadas
quanto à posição no caule (mais próximas à raíz ou ao ápice), foram inoculados em tubos
de ensaio com ou sem troca gasosa em meio WPM suplementado com 0,00μΜ, 0,54μM,
2,69μM, e 5,37μM, de ANA, e, 0,00μM, 4,44μM, 11,10μM, e 17,76μM de BAP em todas
as combinações possíveis. Para o enraizamento utilizou-se meio WPM suplementado com
AIB à 0,00μM, 9,84μM, 19,68μM, e 29,52μM. O sistema de trocas gasosas foi superior
quanto ao número de folhas na maioria das variáveis analizadas. O tipo de gema pouco
influenciou nas variáveis. O melhor tratamento nos sistemas heterotrófico e mixotrófico foi
de 29,52 μM de AIB, com 33,33% e 16,66% de enraizamento respectivamente. A
aclimatização foi procedida com sucesso em ambos os sistemas. Para a criopreservação
utilizou-se ápices caulinares obtidos de plantas desenvolvidas in vitro. Os ápices foram
inicialmente suspendidos em solução de meio MS suplementado com 3% de alginato de
sódio, 0,4M de glicerol, e 4,44μM de BAP e dispensados em solução de meio MS (livre de
cálcio) suplementado com 0,1 M de cloreto de cálcio, 0,4M de glicerol, e 4,44μM de BAP.
Os ápices foram mantidos sob três níveis de exposição de sacarose (0,25M, 0,5M, e
0,75M) combinados á três níveis de dessecação (0 h, 1 h e 2 h) antes de serem congelados
em nitrogênio líquido. Não se observou regeneração em ápices criopreservados. O melhor
tratamento para ápices não criopreservados constituiu de 0,25M de sacarose e 1 h de
dessecação. A taxa de regeneração nula de ápices criopreservados o que indica que o
estress de dessecação está relacionado ao stress de congelamento.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.bc.ufg.br:tede/4648 |
| Date | 23 February 2015 |
| Creators | Silveira, Andreia Alves da Costa |
| Contributors | Sibov, Sérgio Tadeu, Sibov, Sérgio Tadeu, Oliveira, Saulo Araújo de, Gonçalves, Letícia de Almeida |
| Publisher | Universidade Federal de Goiás, Programa de Pós-graduação em Genetica e Melhoramentode Plantas, UFG, Brasil, Escola de Agronomia e Engenharia de Alimentos - EAEA (RG) |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFG, instname:Universidade Federal de Goiás, instacron:UFG |
| Rights | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 1167494949003462214, 600, 600, 600, 600, 4500684695727928426, -3091138714907603907, 2075167498588264571 |
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