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Avaliação dos efeitos da Eugenia Dysenterica em cultura primária de células de mucosa gengival e ligamento periodontal

Costa, Cláudio Rodrigues Rezende 01 July 2016 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2016. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-09-19T16:16:11Z No. of bitstreams: 1 2016_CláudioRodriguesRezendeCosta.pdf: 3347733 bytes, checksum: 9681f3bf003d6bb60d7a5814cd12ecad (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2016-10-03T21:20:24Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_CláudioRodriguesRezendeCosta.pdf: 3347733 bytes, checksum: 9681f3bf003d6bb60d7a5814cd12ecad (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-03T21:20:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_CláudioRodriguesRezendeCosta.pdf: 3347733 bytes, checksum: 9681f3bf003d6bb60d7a5814cd12ecad (MD5) / Pesquisas recentes têm mostrado compostos bioativos como responsáveis por efeitos farmacológicos de plantas. Dentre muitas, a Eugenia dysenterica tem apresentado efeitos antioxidante, antifúngico, antidiarreico, atividade inibitória sobre a enzima tirosinase e potencial efeito para tratamentos gástricos. Este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos da Eugenia dysenterica em cultura primária de células de mucosa gengival e ligamento periodontal. Foi estabelecido cultura primária das células e ensaio de MTT foi realizado em linhagens celulares de mucosa gengival e ligamento periodontal humanos, testando nove concentrações de fração acetônica do extrato de folhas de Eugenia dysenterica. As concentrações de 41,5 e 8,3μg/mL apresentaram menor citotoxicidade em células gengivais (p<0,05), porém foram citotóxicas para as linhagens do ligamento periodontal. Na concentração de 83μg/mL a fração acetônica de folhas do extrato de Eugenia dysenterica não apresentou ação antifúngica para Candida albicans. Como controle positivo foi utilizado o digluconato de clorexidina nas concentrações de 0,12% e 0,2%. O digluconato de clorexidina apresentou intensa citotoxicidade para as células gengivais quando comparadas ao extrato de Eugenia dysenterica (p<0,05). O ensaio de ferida com as células gengivais mostrou que não houve indução do fechamento da ferida pós tratamento com Eugenia dysenterica, assim como também diminuiu a motilidade das células após o tratamento. O ensaio de mineralização foi evidenciado com vermelho de alizarina S e Von Kossa para as células de ligamento periodontal tratadas com o extrato de Eugenia dysenterica e estas não apresentaram diferenciação e capacidade de mineralização. Frente aos resultados, concluiu-se que o extrato de Eugenia dysenterica não se apresentou citotóxico para as células gengivais, porém nas concentrações utilizadas inibiu a proliferação e motilidade de células gengivais, alterou a morfologia celular e não apresentou efeito osteogênico para as células do ligamento periodontal. _________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Recent research has determined bioactive compounds as responsible for pharmacological effects of plants. Among all, the Eugenia dysenterica has shown antioxidant, anti-fungal and anti-diarrheal effects, inhibitory activity on the enzyme tyrosinase and potential effect on gastric treatments. This study aimed to evaluate the effects of Eugenia dysenterica in primary culture of gingival mucosa and periodontal ligament cells. First, the primary culture of cells were established and MTT assay was performed both cell lines. Nine concentrations of Eugenia dysenterica extract were used. The concentrations of 41.5 and 83μg/mL showed less cytotoxicity in gingival cells (p <0.05), but were cytotoxic to the periodontal ligament samples. The concentration of 83μg/mL Eugenia dysenterica extract had no antifungal effects on Candida albicans. As a positive control, chlorhexidine digluconate was used at concentrations of 0.12% and 0.2%. Chlorhexidine was severe cytotoxic to gingival cells when compared to the Eugenia dysenterica extract (p <0.05). The healing assay with gingival and periodontal ligament cells showed no induction of wound closure after treatment with Eugenia dysenterica, as well as decreased the motility of the cells after treatment. Alizarin Red S and Von Kossa staining were used to evidence the mineralization of periodontal ligament cells treated with the extract Eugenia dysenterica but there was no or mineral deposits on these cells after the treatment. Based on the results, it was concluded that the Eugenia dysenterica extract were not cytotoxic to gingival cells. However, the concentrations used inhibited proliferation and motility of cells, modified cellular morphology and did not have osteogenic effect for periodontal ligament cells.
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Efeito da suplementação nutricional no desenvolvimento de espécies florestais nativas do Cerrado, em viveiro / Effect of nutritional supplementation in the development of native forest species of Cerrado in nursery

Matias, Renan Augusto Miranda 21 February 2017 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Tecnologia, Departamento de Engenharia Florestal, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-05-22T19:47:10Z No. of bitstreams: 1 2017_RenanAugustoMirandaMatias.pdf: 2354128 bytes, checksum: 08a04ae9c0db9ba2586ca5f51aac6077 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2017-06-06T19:03:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_RenanAugustoMirandaMatias.pdf: 2354128 bytes, checksum: 08a04ae9c0db9ba2586ca5f51aac6077 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-06T19:03:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_RenanAugustoMirandaMatias.pdf: 2354128 bytes, checksum: 08a04ae9c0db9ba2586ca5f51aac6077 (MD5) Previous issue date: 2017-06-06 / A exploração desordenada dos recursos naturais tem gerado a degradação de áreas em quase todo o território nacional, promovendo o aumento da demanda por produtos e serviços voltados à recuperação de áreas degradadas e, ou, perturbadas, em especial para produção de mudas de espécies florestais nativas. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da fertilização do substrato e da suplementação nutricional via folha sobre o desenvolvimento de mudas de espécies florestais nativas do Cerrado em condições de viveiro, Kielmeyera coriacea Mart. & Zucc., Eugenia dysenterica (Mart.) DC., Handroanthus impetiginosus (Mart. ex DC.) Mattos e Myracrodruon urundeuva Allemão. O experimento foi implantado utilizando-se delineamento inteiramente casualizado (DIC), em esquema fatorial com dois fatores: o substrato em três níveis e a adubação foliar em três níveis, com dez repetições. Foram avaliados três tipos de substratos: 1 - Terra (Latossolo vermelho); 2 - Terra + esterco bovino na proporção 2:1; 3 - Terra + esterco bovino na proporção 2:1 + 2,2 Kg de NPK (10-10-10) por metro cúbico de substrato + 1,3 kg de calcário por metro cúbico de substrato. Tais substratos foram associados às três doses de adubação suplementar foliar (NPK aplicado semanalmente; NPK aplicado trimestralmente; e testemunha, sem aplicação de NPK foliar). Os tratamentos foram submetidos a análise de variância, avaliando os incrementos de altura, diâmetro e índice de qualidade de Dickson. Para a espécie Pau Santo é recomendado utilizar substrato composto apenas por Latossolo Vermelho, já para as espécies Cagaita e Ipê Roxo é recomendado utilizar substrato composto por Latossolo Vermelho com adição de esterco bovino na razão 2:1, não sendo recomendado realizar a adubação via foliar na produção de mudas para todas as espécies estudadas. A Aroeira não foi inserida nas análises, pois teve a incidência de “Tripes” nos primeiros meses pós transplantio, tendo seu crescimento prejudicado. Quanto a análise de solo, a matéria orgânica, quantidade de fósforo e cálcio foram determinantes na formação de grupos por meio da análise de componentes principais. A correlação das variáveis químicas do substrato não foi capaz de explicar com precisão as variáveis de medição e a distribuição das espécies em cada substrato no gradiente, por meio da análise de correspondência canônica. / The Disorganized exploration of natural resources has led to the degradation of areas in most of the national territory, thus increasing the demand for products and services aimed at the recovery of degraded land and, especially, for the production of native forest species seedlings. The objective of this study was evaluate the effect of substrate fertilization and leaf nutritional supplementation on the development of seedlings of native Cerrado forest species in nursery conditions, Pau Santo (Kielmeyera coriacea Mart. & Zucc.), Cagaita Eugenia dysenterica (Mart.) DC.), Ipê Roxo (Handroanthus impetiginosus (Mart. Ex DC.) Mattos) and Aroeira (Myracrodruon urundeuva Allemão). The experiment was implemented using a completely randomized design (CRD), in a factorial scheme with two factors: the substrate with three levels and foliar fertilization with three levels, with ten replicates. Three types of substrates were evaluated: 1 - Land (Red Latosol); 2 - Land + bovine manure in the proportion of 2:1; 3 - Land + bovine manure in a ratio of 2:1 + 2.2 kg NPK (10-10-10) per cubic meter of substrate + 1.3 kg of limestone per cubic meter of substrate. These substrates were associated with three doses of foliar fertilization (NPK applied weekly, NPK applied quarterly, and control, without foliar NPK application). The treatments were submitted to analysis of variance, evaluating Dickson, height, diameter and quality index increments. For Pau Santo species, it is recommended to use a substrate composed only of red latosol, and for the species Cagaita and Ipê Roxo it is recommended to use a substrate composed of Red Latosol with addition of bovine manure in the proportion of 2:1 ratio, and it is not recommended to apply foliar fertilization In the production of seedlings for all species studied. Aroeira was not included in the analyzes, as it had the incidence of Tripes in the first months after transplanting, and its growth was impaired. Regarding soil analysis, organic matter, amount of phosphorus and calcium were determinants in the formation of groups by principal component analysis. The correlation of the substrate chemical variables was not able to accurately explain the measurement variables and the distribution of the species in each substrate in the gradient by canonical correspondence analysis.
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Estrutura genética e sistema de cruzamento em Eugenia dysenterica DC. (Mvrtaceae) / Genetic structure and mating system in Eugenia dysenterica DC. (Myrtaceae)

Barbosa, Ana Clara de Oliveira Ferraz 28 March 2014 (has links)
Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-01-16T13:27:44Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Tese - Ana Clara de Oliveira Ferraz Barbosa - 2014.pdf: 7503883 bytes, checksum: 4ba2274e8cf2c886f8484854e4224c41 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-01-16T13:37:29Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Tese - Ana Clara de Oliveira Ferraz Barbosa - 2014.pdf: 7503883 bytes, checksum: 4ba2274e8cf2c886f8484854e4224c41 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-01-16T13:37:29Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Tese - Ana Clara de Oliveira Ferraz Barbosa - 2014.pdf: 7503883 bytes, checksum: 4ba2274e8cf2c886f8484854e4224c41 (MD5) Previous issue date: 2014-03-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / The genetic structure of a species corresponds to the amount of genetic variability and its distribution within and among local populations and individuals. The patterns of variability among individuals in a local population are highly dependent of mating system. The goal of this study was to evaluate the mating system, the diversity and genetic structure in populations of E. dysenterica in local and regional scale. The assessment of the mating system and the analysis of genetic structure at the local scale were performed in a population of Mimoso – GO and for the analysis of genetic structure at the regional scale were analyzed 23 natural populations of E. dysenterica derived from six Brazilian states (Goiás, Minas Gerais, Bahia, Mato Grosso, Tocantins and Piauí). For all studies seven polymorphic microsatellite loci were used. Considering the 20 families analyzed, the multilocus outcrossing rates (tm = 0.918) and single locus (ts = 0.797) were high and significant. From a total of 399 seeds evaluated, it was possible to determine the pollen donor to 218 seeds (55%) with confidence level of 90%, 174 seeds (44%) with confidence level of 95% and 65 seeds (16%) with confidence level of 99%. In 15 families evaluated were possible to verify the occurrence of multiple paternity, with the number of pollen donor per fruit ranged from one to three. The results presented show that the species E. dysenterica presents mixed mating system and that there is multiple paternity in this species. The intrapopulational spatial genetic structure was positive (R2 = 0.01646, p < 0.001), which was expected since species generally have spatial restriction to disperse. The spatial genetic structure was significant (Sp = 0.0143) and genetic neighborhood (Nb) was equal to 69.93 km. On average, about 30 individuals were analyzed by subpopulation for all loci. The average number of alleles per locus was equal to 9, the genetic diversity was high (0.725) and the observed frequency of heterozygotes (Ho) was 0.610. Were found 18 private alleles in 10 subpopulations. The results for the fixation index ((f) in the subpopulations ranged between -0.058 and 0.338, with an overall value of 0.162, indicating excess of homozygotes in relation to the expected under HWE. The genetic differentiation between subpopulations can be considered relatively high (FST = 0.161). The Mantel test indicates that the genetic divergence of 24 subpopulations evaluated is structured in geographic space (r = 0.427, p < 0.001), suggesting that the model of isolation by distance or stepping-stone are adequate to explain the spatial pattern of genetic divergence among subpopulations of E. dysenterica evaluated. / A estrutura genética de uma espécie corresponde à quantidade da variabilidade genética e sua distribuição dentro e entre populações locais e indivíduos. Os padrões de variabilidade entre indivíduos em uma população local são altamente dependentes do sistema de cruzamento. O objetivo geral do trabalho foi avaliar o sistema de cruzamento, a diversidade e a estrutura genética em populações de E. dysenterica, em escala local e regional. A avaliação do sistema de cruzamento e a análise da estrutura genética intrapopulacional foram realizadas em uma população do município de Mimoso – GO e para a estrutura genética interpopulacional foram analisadas 23 subpopulações naturais de E. dysenterica oriundas de seis estados brasileiros. Para todos os estudos foram utilizados sete locos microssatélites polimórficos. Considerando as 20 famílias analisadas, as taxas de fecundação cruzada multiloco (tm = 0,918) e uniloco (ts = 0,797) foram altas. De um total de 399 sementes avaliadas, foi possível determinar o doador de pólen para 218 sementes (55%) com confiança de 90%, 174 sementes (44%) com confiança de 95% e 65 sementes (16%) com confiança de 99%. Em 15 famílias avaliadas foi possível verificar a ocorrência de paternidade múltipla, sendo que o número de doador de pólen por fruto variou de um a três. Os resultados apresentados revelam que a espécie E. dysenterica apresenta sistema de cruzamento misto e que existe paternidade múltipla nessa espécie. A estrutura genética espacial intrapopulacional foi positiva (R2 = 0,01646, p < 0,001), o que era esperado, uma vez que espécies vegetais geralmente possuem restrição espacial para se dispersarem. A estrutura genética espacial foi significativa (Sp = 0,0143) e a vizinhança genética (Nb) foi igual a 69,93 km. Em média, foram analisados aproximadamente 30 indivíduos por subpopulação para todos os locos. O número médio de alelos por loco foi igual a 9, a diversidade genética foi alta (0,725) e a frequência observada de heterozigotos (Ho) foi 0,610. Foram encontrados 18 alelos privados em 10 subpopulações. Os resultados obtidos para o índice de fixação (f) variaram nas subpopulações entre -0,058 e 0,338, com valor global igual a 0,162, indicando excesso de homozigotos em relação às frequências esperadas sob EHW. A diferenciação genética entre as subpopulações pode ser considerada relativamente alta ( P = 0,161). O teste de Mantel indica que a divergência genética das 23 subpopulações avaliadas está estruturada no espaço geográfico (r = 0,427; p < 0,001), sugerindo que o modelo de isolamento-por-distância ou stepping-stone são adequados para explicar o padrão espacial de divergência genética entre as subpopulações de E. dysenterica avaliadas.
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Criopreservação de ápices caulinares e micropropagação em condições heterotróficas e mixotróficas de eugenia dysenterica (Mart.) DC. / Cryopreservation of shoot apices and micropropagation in heterotrophic and mixotrophic conditions of Eugenia dysenterica (Mat.) DC.

Silveira, Andreia Alves da Costa 23 February 2015 (has links)
Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-10-16T11:59:11Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Andreia Alves da Costa Silveira - 2015.pdf: 2826814 bytes, checksum: a357e14569e4c8efffc2043f9809d45e (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-10-16T12:02:34Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Andreia Alves da Costa Silveira - 2015.pdf: 2826814 bytes, checksum: a357e14569e4c8efffc2043f9809d45e (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-16T12:02:34Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Andreia Alves da Costa Silveira - 2015.pdf: 2826814 bytes, checksum: a357e14569e4c8efffc2043f9809d45e (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2015-02-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conventional micropropagation systems often use culture media supplemented with sucrose and sealed bottles. This system is called heterotófico as exogenous carbohydrates are the only source of energy for the plant. Mixotróficos systems, although still adding sucrose in half, have the differential to allow gas exchange between the internal and external environment of the culture flask. This ventilation brings many benefits to plant growth in vitro. By the constant loss of the Savannah area, it is necessary to improve micropropagation protocols and germplasm conservation of the species within it. Cryopreservation is considered the best for long-term preservation method and the encapsulation-dehydration technique have been promising for tropical species. The objectives were to compare the heterotrophic system in vitro propagation of Eugenia dysenterica (Mart.) DC. mixotrófico with a system, and get a method of germplasm storage dysenterica E. vitro by cryopreservation. Identified Gems' positions in the stem (closer to the root or the apex) were inoculated in tubes with or without gas exchange in WPM medium supplemented with 0,00μΜ, 0,54μM, 2,69μM, and 5,37μM, NAA, and 0,00μM, 4,44μM, 11,10μM and 17,76μM BAP in all possible combinations. For rooting was used WPM medium supplemented with IBA to 0,00μM, 9,84μM, 19,68μM, and 29,52μM. The system of gas exchange was greater in the number of sheets in most analyzed variables. The type of gem had little influence on the variables. The best treatment in heterotrophic and mixotrófico systems was 29.52 mM of IBA, with 33.33% and 16.66% respectively rooting. Acclimatization was performed successfully in both systems. For cryopreservation was used apexes obtained from plants grown in vitro. The apices were initially suspended in MS medium supplemented with 3% solution of sodium alginate, 0.4 M glycerol and 4,44μM BAP and dispensed in MS medium solution (free of calcium) supplemented with 0.1 M calcium chloride, 0.4 M glycerol and 4,44μM BAP. The summits were held in three exposure levels of sucrose (0.25M, 0.5M, and 0.75M) combined will three levels of desiccation (0 h, 1 h, 2 h) before being frozen in liquid nitrogen. There was no regeneration in cryopreserved apexes. The best treatment for non-cryopreserved apices consisted of 0.25M sucrose and 1 h of drying. The null regeneration of cryopreserved apices which indicates that the stress is related to desiccation stress freezing. / Sistemas convencionais de micropropagação, geralmente usam meios de cultura suplementados com sacarose e frascos vedados. Este sistema é denominado heterotófico pois os carboidratos exógenos são a única fonte de energia para o vegetal. Sistemas mixotróficos, embora continuem adicionando sacarose ao meio, possuem o diferencial de permitir trocas gasosas entre o meio interno e externo do frasco de cultura. Esta ventilação traz inúmeras vantagens ao crescimento vegetal in vitro. Pela constante perda de área do Cerrado, torna-se necessário o aprimoramento de protocolos de micropropagação e também de conservação de germoplasma das espécies deste domínio. A criopreservação é o considerada o melhor método de conservação à longo prazo e a técnica de encapsulamento-desidratação têm sido promissora para espécies tropicais. Os objetivos do trabalho foram comparar o sistema heterotrófico de propagação in vitro de Eugenia dysenterica (Mart.) DC. com um sistema mixotrófico, e, obter um método de conservação de germoplasma de E. dysenterica in vitro por criopreservação. Gemas identificadas quanto à posição no caule (mais próximas à raíz ou ao ápice), foram inoculados em tubos de ensaio com ou sem troca gasosa em meio WPM suplementado com 0,00μΜ, 0,54μM, 2,69μM, e 5,37μM, de ANA, e, 0,00μM, 4,44μM, 11,10μM, e 17,76μM de BAP em todas as combinações possíveis. Para o enraizamento utilizou-se meio WPM suplementado com AIB à 0,00μM, 9,84μM, 19,68μM, e 29,52μM. O sistema de trocas gasosas foi superior quanto ao número de folhas na maioria das variáveis analizadas. O tipo de gema pouco influenciou nas variáveis. O melhor tratamento nos sistemas heterotrófico e mixotrófico foi de 29,52 μM de AIB, com 33,33% e 16,66% de enraizamento respectivamente. A aclimatização foi procedida com sucesso em ambos os sistemas. Para a criopreservação utilizou-se ápices caulinares obtidos de plantas desenvolvidas in vitro. Os ápices foram inicialmente suspendidos em solução de meio MS suplementado com 3% de alginato de sódio, 0,4M de glicerol, e 4,44μM de BAP e dispensados em solução de meio MS (livre de cálcio) suplementado com 0,1 M de cloreto de cálcio, 0,4M de glicerol, e 4,44μM de BAP. Os ápices foram mantidos sob três níveis de exposição de sacarose (0,25M, 0,5M, e 0,75M) combinados á três níveis de dessecação (0 h, 1 h e 2 h) antes de serem congelados em nitrogênio líquido. Não se observou regeneração em ápices criopreservados. O melhor tratamento para ápices não criopreservados constituiu de 0,25M de sacarose e 1 h de dessecação. A taxa de regeneração nula de ápices criopreservados o que indica que o estress de dessecação está relacionado ao stress de congelamento.

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