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Diagnóstico imunoenzimático da larva migrans visceral / Immunoenzimatic Diagnosis of the Visceral larva migrans

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Previous issue date: 2005-06-24 / The Visceral Larva Migrans (VLM) is a zoonotic disease caused by the helminth
Toxocara cannis. The precocious diagnosis of this disease in humans is very
important to determinate the evolution of the clinical case and the patient's
treatment. The goal of the first experiment was determinate the presence of
antibodies anti-T. cannis in children from Pelotas through the Indirect Enzyme-Linked
Immunosorbent Assay (ELISA) front to the antigen TES, as well as to
define the pattern of bands recognized by the positive serums in ELISA through
the "Western blotting . For this experiment 427 serums from children, with ages
between one to eleven yeas old was tested, those serums was adsorved with
AgSoAl and determinate that 50,6% was positive for antibodies anti-TES,
showing a significant association among the positive children for antibodies
anti-TES and the contact with dogs and cats. This association was also
observed in the children's different age groups, but not regarding the gender of
the same ones. To perform the Western Blotting , 70 serums witch give a
positive result in the Indirect ELISA was been used, all serums recognize
glicoproteic bands in the range between 30 and 120 kDa. Was observed a
diminution in the crusade reaction with AgSoAl when the adsorved and not
adsorved serums with this antigen has been test in the Western blotting ,
where a band of 30 kDa demonstrate to be an important glicoprotein to specific
diagnosis of VLM. In the second experiment, 25 mice BALB/c were inoculated
with approximately 1000 eggs containing the larvae L3. Each fifteen days blood collection was made through the reto orbital plexus until the 105 days after de
animals infection. The serums was tested in the Indirect ELISA using the
Antigen TES and urea 6M in order to discriminate recent and late infection,
through the percentile of avidity of the IgG in the different days after the
infection. A low percentile of avidity was observed to the 15 days after
inoculation (between 7,25 and 27,5%). After 60 days of infection, all the animals
presented avidity between 31,4 and 58%. This result suggests that in mice
BALB/c, to the 60 days after infection the chronic phase of VLM is already
established. / A Larva Migrans Visceral (LMV) é uma doença zoonótica que possui como
principal agente etiológico o helminto Toxocara canis. O diagnóstico precoce da
doença no homem é importante para estudos de evolução clínica e tratamento
do paciente e os inquéritos epidemiológicos para determinar a freqüência da
infecção em uma população. Por isso, o primeiro experimento teve como
objetivo, determinar a presença de anticorpos anti-T. canis em crianças da
região de Pelotas através de Enzyme linked immnosorbent assay (ELISA) com
o antígeno de excreção e secreção de larvas de Toxocara canis (TES), bem
como definir, através de Western blotting , o padrão de bandas do TES
reconhecidas pelos soros positivos ao ELISA. Foram ensaiados no ELISA
Indireto 427 soros de crianças de um a 12 anos de idade adsorvidos com
antígeno somático de Ascaris lumbricoides e determinado que 50,6%
apresentaram anticorpos anti-TES, ocorrendo uma associação significativa
entre as crianças positivas e o contato com cães e gatos. Esta associação
também foi observada em diferentes faixas etárias das crianças, mas não com
relação ao sexo das mesmas. Setenta soros positivos no ELISA foram
ensaiados no Western blotting e todos reconheceram frações proteicas entre
30 e 120 kDa. Uma diminuição da reação cruzada com o AgSoAl foi observada
quando soros adsorvidos com este antígeno foram testados no Western
blotting , sendo que uma fração antigênica de 30 kDa apresentou-se como uma
proteína importante para o diagnóstico específico da LMV. No segundo
experimento, 25 camundongos BALB/c foram inoculados com aproximadamente 1000 ovos contendo a larva infectante (L3). Colheitas
quinzenais de sangue foram realizadas através do plexo retro orbital até os 105
dias pós-infecção dos animais. Os soros foram ensaiados no ELISA Indireto
utilizando o antígeno TES e a uréia 6M a fim de discriminar infecção recente e
tardia, através do percentual de avidez da IgG nos diferentes dias após a
infecção. Um baixo percentual de avidez, característico da infecção aguda, foi
observado aos 15 dias pós-inoculação (entre 7,3 e 27,5%). Após 60 dias de
infecção, todos os animais apresentaram avidez entre 31,4 e 58%. Através
destes resultados, sugere-se que em camundongos BALB/c, aos 60 dias pós-infecção
a fase crônica da LMV já está estabelecida.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpel.edu.br:123456789/1247
Date24 June 2005
CreatorsSchoenardie, Elizandra Roselaine
ContributorsCPF:20746490020, http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4780596T8, Aleixo, José Antonio Guimarães, CPF:15711986600, http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4783342J3&dataRevisao=null, Scaini, Carlos James, CPF:34574921072, http://lattes.cnpq.br/6274475036894377, Berne, Maria Elisabeth Aires
PublisherUniversidade Federal de Pelotas, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, UFPel, BR, Biotecnologia
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Repositório Institucional da UFPEL, instname:Universidade Federal de Pelotas, instacron:UFPEL
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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