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Testes de elisa e vírus-neutralização na detecção de anticorpos contra o vírus da diarréia viral bovina no soro e leite / Performance of virus neutralizing test and elisa for detection of antibodies and identification of herds with bovine viral diarrhea virus infection

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The success of control/eradication programs of bovine viral diarrhea virus (BVDV)
infection necessarily includes the identification and elimination of persistently infected (PI)
animals. Since these animals continuously shed virus, the prevalence and titers of antibodies
in herds with PI animals are often high. Hence, bulk milk and serum samples were subjected
to two serological tests in order to establish the most appropriate for herd screening. For this,
767 samples of bulk milk and 701 serum samples were analyzed by a commercial ELISA kit
and by virus-neutralization test (VNT). The toxic effects of milk for cell cultures on VNT was
abolished by increasing the final volume of medium during the incubation. Among the tested
milk samples, 177 and 139 were positive in VNT and ELISA, respectively. Thus, the VNT
showed a sensitivity (Se) of 76.8% and a specificity (Sp) of 99.5%. The Kappa index (k) was
0.82, demonstrating an excellent agreement between the two techniques. The analysis of the
correlation coefficient between the absorbance values in ELISA (OD) and antibody titers in
positive samples in VNT showed a moderate positivity (r = 0.57) with p<0.05. In serum
samples, 442 and 602 were positive in ELISA and VNT, respectively. This resulted in a VNT
sensitivity (Se) of 92.7% and specificity (Sp) of 27.1%, with (k) of 0.23, reflecting a weak
agreement between the two techniques. The correlation coefficient between OD and antibody
titers showed a moderate positivity (r = 0.54) with p<0.05. Testing of both milk and serum
revealed a considerable number of samples with high VN titers and low ODs. On the other
side, many samples with low VN titers showed high ODs in the ELISA. Based on the above
mentioned results, and assuming that the presence of PI animals usually results in VN titers ≥
80, we conclude that the VNT is more appropriate to conduct herd screening in bulk milk
when the objective is to detect herds with high titers of neutralizing antibodies, potentially
harboring PI animals. / O sucesso nas estratégias de controle e erradicação do vírus da diarréia viral bovina
(BVDV), passa pela identificação e eliminação dos animais persistentemente infectados (PI).
Como esses animais excretam continuamente o vírus, a prevalência e os títulos de anticorpos
nos rebanhos que os possuem são geralmente altos. Por isso, amostras de tanques coletivos de
leite são frequentemente utilizadas na triagem de rebanhos. No presente trabalho, amostras
coletivas de leite e amostras de soro foram submetidas a duas técnicas sorológicas, a fim de
estabelecer a mais adequada para esta finalidade. Para tal, 767 amostras coletivas de leite e
701 amostras de soro bovino foram testadas com um kit ELISA indireto (teste padrão) e pela
técnica de vírus-neutralização (VNT). Devido aos efeitos tóxicos do leite sobre o cultivo
celular, a VNT foi adaptada, o que consistiu no aumento do volume final na etapa de
incubação com os cultivos celulares. No teste do leite, foram positivas 177 e 139 amostras, no
ELISA e na VNT, respectivamente. Com isso, a VNT adaptada apresentou uma sensibilidade
(Se) de 76,8% e uma especificidade (Sp) de 99,5%. O índice Kappa (k) foi de 0,82,
demonstrando uma ótima concordância entre as duas técnicas. A análise do coeficiente de
correlação entre os valores de absorbância no ELISA (OD) e os títulos de anticorpos na VNT
nas amostras positivas, demonstrou uma correlação moderada positiva (r = 0,57) com p<0,05.
No teste do soro, foram positivas 442 e 602 amostras no ELISA (teste padrão) e na VNT,
respectivamente. Observou-se uma (Se) de 92,7% e (Sp) de 27,1%, com (k) de 0,23,
demonstrando uma fraca concordância entre as duas técnicas. O coeficiente de correlação
entre OD e os títulos de anticorpos demonstrou uma correlação moderada positiva (r = 0,54)
com p<0,05. Observaram-se nos testes do leite e do soro, várias amostras com títulos altos na
VNT apresentando ODs baixas a medianas. Por outro lado, várias amostras com títulos
neutralizantes baixos apresentaram ODs altas. Baseado nos resultados, e partindo do
pressuposto que a presença de animais PI reflete-se em títulos neutralizantes geralmente ≥ 80,
conclui-se que a VNT é mais adequada para a realização de triagem em amostras coletivas de
leite quando objetiva-se detectar rebanhos com altos títulos de anticorpos neutralizantes,
possíveis portadores de animais PI.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufsm.br:1/10100
Date02 June 2011
CreatorsSturza, Diego Artemio Franco
ContributorsFlores, Eduardo Furtado, Weiblen, Rudi, Scherer, Charles Fernando Capinos
PublisherUniversidade Federal de Santa Maria, Programa de Pós-Graduação em Medicina Veterinária, UFSM, BR, Medicina Veterinária
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguageEnglish
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Repositório Institucional da UFSM, instname:Universidade Federal de Santa Maria, instacron:UFSM
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
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