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Previous issue date: 2017-07-14 / A radiação ultravioleta (UV) B no tecido epitelial estimula a síntese e liberação de mediadores pró-inflamatórios, induzindo à infiltração e ativação de neutrófilos e outras células fagocíticas. Assim, processos inflamatórios causados pela radiação UVB podem ser prejudiciais sobre diversas células do organismo, causando desde fotoenvelhecimento até imunossupressão. O triptofano (TRIP) é um aminoácido essencial, utilizado em inúmeros processos fisiológicos e metabolizado por duas vias principais, a serotoninérgica e a das quinureninas. Sendo esta última relacionada a enzima indoleamina 2,3 dioxigenase (IDO) que poderá ser induzida por processos inflamatórios aumentando o consumo de TRIP e formando metabólitos oxidativos, como o ácido quinolínico que está relacionado no processo de imunotolerância. Devido ao envolvimento da enzima IDO e seu possível alvo terapêutico, o objetivo desse trabalho foi avaliar a produção de metabólitos da via das quinureninas (VQs) em lesões auriculares de camundongos, provocadas pela exposição por 24 horas à radiação UVB frente ao inibidor da enzima IDO 1-metil triptofano (1-MT). Os experimentos foram realizados com 30 animais da linhagem C57B/6J. Após serem divididos em cinco grupos de seis animais cada, denominados: a) controle, sem exposição à radiação UVB; b) veículo, exposto a radiação UVB tratado com salina (10μL); c) expostos a radiação UVB e tratados com inibidor da enzima1-MT (0,5 μg/μl); d) expostos a radiação UVB e tratados com inibidor da enzima 1-MT (1,0 μg/μl) e grupo e) expostos a radiação UVB e tratados com inibidor da enzima 1-MT (2,0μg/μl). O tratamento com 1-MT e o veículo foram realizados topicamente antes da exposição à radiação UVB, e 24h depois da exposição, os camundongos foram eutanasiados e as orelhas totalmente extraídas para realização das dosagens específicas. O presente estudo demonstrou que o tratamento com 1-MT frente à radiação UVB em lesões auriculares de camundongos, foi eficaz em atenuar as seguintes alterações, a espessura e inflamação das orelhas irradiadas, o estresse oxidativo causado pela radiação UVB nas 7 orelhas dos camundongos. Diminuiu os níveis de fator de necrose tumoral alfa (TNF-α), interleucina 1 beta (IL-1β), interleucina 6 (IL-6), interferon gama (INF-γ), interleucina 13 (IL-13), interleucina 17 (IL-17), interleucina 10 (IL-10) e fator nuclear kappa B (NF-κB) reduzindo os níveis das citocinas inflamatórias. Aumentou os níveis de TRIP no local, diminuindo assim seus metabólitos como quinurenina (QUI), ácido quinurênico (AQUI), 3-Hidroxiquinurenina (3-HQ), ácido 3-hidroxiantranílico (3-AA), ácido antranílico (AA) e ácido quinulínico (AQ). Aumento das atividades das enzimas envolvidas na VQs, entre elas a IDO, quinurenina 3-monoxigenase (QMO), quinurenina aminotransferase (QAT) e quinureninase (QUINU). Em conclusão, esses resultados demonstram que a inibição da enzima IDO causou atenuação da inflamação, do estresse oxidativo e dos metabólitos da VQs. Além disso, sugerem que a inibição dessa enzima, seja com produtos sintéticos ou naturais podem fornecer uma nova abordagem terapêutica para o tratamento e prevenção de lesões causadas pela radiação UVB na pele. / Ultraviolet (UV) B radiation in the epithelial tissue stimulates the synthesis and release of pro-inflammatory mediators, inducing the infiltration and activation of neutrophils and other phagocytic cells. Thus, inflammatory processes caused by UVB radiation can be harmful to various cells in the body, from photoaging to immonussuppression. Tryptophan (TRYP) is an essential amino acid, used in numerous physiological processes and metabolized by two main pathways, serotoninergic and kynurenines. The latter is related to the indoleamine 2,3 dioxygenase (IDO) enzyme that can be induced by inflammatory processes increasing the consumption of TRYP and forming oxidative metabolites, such as the quinolinic acid that is related in the process of immunotolerance. Due to the involvement of the IDO enzyme and its possible therapeutic target, the objective of this work was to evaluate the production of metabolites of the kinurenins pathway (KPs) in mice ear lesions caused by 24-hour UVB exposure to the IDO enzyme inhibitor 1-methyl tryptophan (1-MT). The experiments were performed with 30 animals of the C57B / 6J lineage. After being divided into five groups of six animals called: a) control, without exposure to UVB radiation; B) vehicle, exposed to UVB radiation treated with saline (10μL); C) exposed to UVB radiation and treated with 1-MT enzyme inhibitor (0,5 μg/μl); D) exposed to UVB radiation and treated with 1-MT enzyme inhibitor (1,0 μg/μl) and group e) exposed to UVB radiation and treated with 1-MT enzyme inhibitor (2,0 μg/μl). Treatment with 1-MT and the vehicle were performed topically prior to exposure to UVB radiation, and 24 hours after exposure, the mice were euthanized and the ears fully extracted for specific dosages. The present study demonstrated that 1-MT 9
treatment against UVB radiation in mouse ear lesions was effective in attenuating the following alterations, the thickness and inflammation of the irradiated ears, the oxidative stress caused by UVB radiation in the ears of the mice. It decreased levels of tumor necrosis factor alpha (TNF-α), interleukin 1 beta (IL-1β), interleukin 6 (IL-6), interferon gamma (INF-γ), interleukin 13 (IL-13), interleukin 17 (IL-17), interleukin-10 (IL-10) and nuclear factor kappa B (NF-κB), reducing levels of inflammatory cytokines. Increased TRIP levels at the site, thereby decreasing its metabolites such as kynurenine (KYN), kynurenic acid (KYNA), 3-Hydroxyquinurenine (3-HK), 3-hydroxyanthranilic acid (3-HAA), anthranilic acid (AA) e quinolinic acid (QA). Increased activities of the enzymes involved in KPs, including IDO, kynurenine 3-monoxygenase (KMO), kynurenine aminotransferase (KAT) and kynureninase (KYNU). In conclusion, these results demonstrate that inhibition of the IDO enzyme caused attenuation of inflammation, oxidative stress and metabolites of KPs. In addition, they suggest that the inhibition of this enzyme, either with synthetic or natural products may provide a new therapeutic approach for the treatment and prevention of injuries caused by UVB radiation on the skin.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:10.1.0.46:riu/3370 |
| Date | 14 July 2017 |
| Creators | Piêgas, Manuela Bastos |
| Contributors | Jesse, Cristiano Ricardo |
| Publisher | Universidade Federal do Pampa, Mestrado Acadêmico em Bioquímica, UNIPAMPA, Brasil, Campus Uruguaiana |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UNIPAMPA, instname:Universidade Federal do Pampa, instacron:UNIPAMPA |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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