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Tese Matheus Fernandes Costa-Silva VERSÃO FINAL.pdf: 5012766 bytes, checksum: f7f611cddfc11239b281f2bab089aae4 (MD5)
Previous issue date: 2013 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil. / A leishmaniose cutânea (LC) é uma doença inflamatória crônica causada por espécies
dermotrópicas pertencentes aos subgêneros Viannia e Leishmania, sendo a L. (V.) braziliensis
o principal agente etiológico no Brasil. O estabelecimento e evolução das lesões causadas pela
infecção por L. (V.) braziliensis são altamente dependentes da imunidade celular, contudo um
estudo que avalia o impacto da interação parasito-monócitos no perfil de resposta imune
associado ao estabelecimento/manutenção da infecção em humanos ainda não foi realizado.
Nesse contexto, o objetivo do trabalho foi caracterizar biomarcadores imunológicos, no
sangue periférico e no infiltrado inflamatório de lesões cutâneas, em indígenas da comunidade
Xakriabá portadores de LC (grupo LC) e com teste de Montenegro positivo sem lesão (grupo
TM
+
sL), com intuito de melhor compreender os mecanismos imunológicos envolvidos na
progressão dessa patologia, bem como dos eventos associados à resistência à infecção. A
análise dos resultados mostrou que pacientes do grupo LC apresentaram menor capacidade
em internalizar formas promastigotas vivas de L. (V.) braziliensis em relação ao grupo
TM
+
sL. Além disso, observou-se que pacientes do grupo LC apresentaram perfil ativado,
principalmente pelo maior percentual/Índice de Estimulação (IE) da molécula de ativação
CD23, com produção de altos níveis de TNF-, provenientes de monócitos que não
fagocitaram e fagocitaram formas promastigotas de L. (V.) braziliensis. Contudo, os níveis de
TNF- correlacionaram de forma negativa com a produção de NO, sugerindo que essa
citocina estaria muito mais associada ao desenvolvimento das lesões do que controle da
doença. Por outro lado, pacientes do grupo TM
+
sL apresentaram maior equilíbrio entre a
produção de citocinas inflamatórias (IL-12, IFN-, IL-17) e moduladoras (IL-10, IL-4) e
sintetizaram maiores níveis de NO, indicando que esse perfil de resposta imune balanceada e
efetora poderia combater a infecção sem provocar dano tecidual. A análise do perfil
fenotípico-funcional de monócitos e linfócitos T CD4
+
e CD8
+
circulantes e de citocinas e
quimiocinas no infiltrado inflamatório das lesões mostrou que o tempo de evolução da lesão
teve grande influência no perfil de resposta imune dos pacientes do grupo LC. Nesse
contexto, observou-se que monócitos e linfócitos T CD4
+
e CD8
+
circulantes de pacientes do
grupo lesão recente apresentaram menor IE das moléculas de ativação CD23 e co-estimulação
CD80, acompanhado pela menor produção das citocinas inflamatórias (TNF-, IL-17) e
moduladoras (IL-10, TGF- e IL-4) em relação ao grupo lesão tardia. Por outro lado,
observou-se que esses pacientes apresentaram maior capacidade fagocítica juntamente com
maior IE de monócitos expressando os receptores CD16, TLR-2 e TLR-4 e produção de NO.
A análise da resposta imune localizada mostrou que pacientes do grupo lesão recente
apresentaram maiores níveis de transcritos de IL12B, IFNG, TNF, IL10, TGFB1, IL4, CCL2,
CCL3, CCL5 e CXCL10, bem como maior carga parasitária em relação ao grupo lesão tardia.
Os resultados obtidos no presente estudo forneceram informações importantes sobre a
infecção causada pela L. (V.) braziliensis, permitindo a identificação e proposição de
potenciais biomarcadores associados à resistência à LC (IL-12, IL-17 e NO) e ao
desenvolvimento e manutenção da lesão (TNF-α). Além disso, esse foi o primeiro estudo que
avaliou aspectos imunológicos da LC em uma população indígena brasileira. / Cutaneous leishmaniasis (CL) is a chronic inflammatory disease caused by dermotropic
Leishmania species belonging to the Viannia and Leishmania subgenera, with Leishmania
(V.) braziliensis considered the main agent in Brazil. The establishment and evolution time of
the lesions caused by L. (V.) braziliensis infection are highly affected by the cellular
immunity. However, a study evaluating the impact of parasite-monocyte interactions in the
immune response profile associated with the establishment/maintenance of the infection in
humans has not been previously performed. In this context, the aim of this study was to
characterize immunological biomarkers in peripheral blood as well as in inflammatory
infiltrate of cutaneous lesions from patients with CL (CL group) or with positive Montenegro
skin test without injury (TM
+
sL group) living in the Xakriabá indigenous community, Minas
Gerais, Brazil, in order to better understand the mechanisms involved in the disease
progression as well as events associated with resistance to the infection. The results showed
that CL group presented less ability to internalize promastigotes of L. (V.) braziliensis as
compared with the TM
+
sL group. Furthermore, it was observed that patients of the CL group
showed activated profile, with high percentage/Stimulation Index (SI) of CD23, and
production of high levels of TNF- by monocytes that non phagocytized and phagocytized
promastigotes of L. (V.) braziliensis. However, the levels of TNF- were negatively
correlated with NO production, suggesting that this cytokine would be much more related to
the development of lesions instead of disease control. On the other hand, patients from TM
+
sL
group showed better balance between the production of inflammatory (IL-12, IFN-, IL-17)
and modulatory (IL-10, IL-4) cytokines, and synthesized highest levels of NO, indicating that
this balanced immune response profile may contribute to the infection resolution without
causing tissue damage. The analysis of the phenotypic-functional profile of circulating
monocytes, CD4
+
, CD8
+
T cells, and cytokines and chemokines in the inflammatory infiltrate
of the cutaneous lesions showed that the evolution time of lesions had great influence in the
immune response profile of the CL group. In this context, it was observed that circulating
monocytes, CD4
+
and CD8
+
T lymphocytes of theith recent lesion group showed a lower SI
of CD23 and CD80, accompanied by lower production of inflammatory (TNF-, IL-17) and
modulatory (IL-10, TGF- and IL-4) cytokines as compared with late lesion group. On the
other hand, it was observed that these patients showed greater phagocytic capability along
with the highest SI of monocytes expressing CD16, TLR-2 and TLR-4, and NO production.
The analysis of the localized immune response showed that patients of the recent lesion group
presented higher transcript levels of IL12B, IFNG, TNF, IL10, TGFB1, IL4, CCL2, CCL3,
CCL5 and CXCL10, as well as higher parasite burden as compared with late lesion group.
This study has provided important information about the infection caused by L. (V.)
braziliensis allowing the identification of potential biomarkers associated to the resistance to
CL (IL-12, IL-17 and NO) and to the development and maintenance of the lesion (TNF-α).
Furthermore, this was the first study that evaluated immunological aspects of CL in a
Brazilian indigenous population.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/7619 |
| Date | January 2013 |
| Creators | Costa e Silva, Matheus Fernandes |
| Contributors | Gomes, Luciana Inácia, Pascoal, Vanessa Peruhype Magalhães, Reis, Alexandre Barbosa, Santiago, Helton da Costa, Antonelli, Lis Ribeiro do Valle, Murta, Silvane Maria Fonseca, Santiago, Ester Roffê, Carvalho, Andréa Teixeira |
| Publisher | Centro de Pesquisas René Rachou |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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