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Previous issue date: 2014 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Introdução: A Engenharia Tecidual (ET) tem como objetivo a fabricação de órgãos e tecidos. Preconiza-se o uso de células autólogas para evitar a incompatibilidade imunológica, porém, pela escassez do número de células obtidas na fonte celular, muitas passagens se tornam necessárias para atingir
um número adequado de células. As culturas primárias freqüentemente sofrem
diferenciação indesejada, modificando o comportamento e o destino celular. O
uso de enzimas proteolíticas durante as passagens celulares é potencialmente
lesivo à fisiologia celular, todavia pouca relevância tem sido dada a este
aspecto na ET. Essas enzimas, ao digerir a matriz extracelular (MEC), também
alteram proteínas de superfície (PS), interferindo na interação célula-célula
(ICC). Consequentemente podem alterar a sinalização celular, a expressão
gênica, o comportamento e o destino. Objetivo: Avaliar a expressão gênica na
via de sinalização TGFβ/BMP, em matriz extracelular e em moléculas de
adesão, das células tronco mesenquimais de polpa dental humana (hDPSC)
obtidas diretamente do tecido e sob cultura primária até a terceira passagem.
Métodos: Foi analisada a expressão gênica por qRT-PCR array da via de
sinalização TGFβ/BMP, matriz extracelular e moléculas de adesão após três
passagens celulares na cultura primária de hDPSC. Resultados: Os genes
COL16A1(p=0,045), TIMP1(p=0,003), THBS1(p=0,027), TGFBI(p=0,001),
ITGA8(p=0,002), FN1(p=0,035), CD44(p=0,046),TSC22D1(p=0,026) e
RPL13A(p=0,017) tiveram sua expressão aumentada e os genes
NCAM1(p=0,047), BGLAP(p=0,037) e ID1(p=0,027) tiveram sua expressão
diminuída em relação às células de tecido de origem. Conclusão: Houve
alteração da expressão gênica na cultura celular de hDPSC após três
passagens. Porém, um gene solitariamente pode não exercer função chave na
diferenciação de células, influenciada pela relação com a MEC e com o
ambiente extracelular. O controle por modulação da diferenciação celular
representa um aspecto importante no desenvolvimento da ET. / Introduction: Tissue Engineering (TE) aims to manufacture organs and tissues and advocates the use of autologous cells to avoid immune incompatibility. However, a longer culture time is necessary to achieve that purpose. Primary cultures often suffer undesirable differentiation, modifying behavior and cell fate.
The use of proteolytic enzymes during cell passages is potentially harmful to cell
physiology, but little importance has been given to this aspect in ET. These
enzymes which digest the extracellular matrix (ECM) also alter surface proteins
(SP) and interfere with cell-cell interactions (ICC). Consequently, may alter cell
signaling by modifying gene expression, behavior and cell fate. Objective: To
assess gene expression in the signaling TGFβ / BMP pathway, in extracellular
matrix and in adhesion molecules, of mesenchymal human dental pulp cells from
tissue and cultured until third passage. Methods: We had evaluated gene
expression by qRT-PCR array of signaling TGFβ / BMP pathway, in
extracellular matrix and in adhesion molecules, of mesenchymal cells from
primary and third passage cultured human dental pulp Results:
COL16A1(p=0,045), TIMP1(p=0,003), THBS1(p=0,027), TGFBI(p=0,001),
ITGA8(p=0,002), FN1(p=0,035), CD44(p=0,046),TSC22D1(p=0,026) and
RPL13A(p=0,017) genes had their expression increased and
NCAM1(p=0,047), BGLAP(p=0,037) and ID1(p=0,027) genes had reduced
expression compared to primary cells. Conclusion: There were modifications in
gene expression after three passages. However, a single gene could not be
enough to exert a key role in cell differentiation that is broadly affected by its
relationship with the ECM and extracellular environment. The control by
modulation of cellular differentiation, is an important aspect in the development
of ET. / FAPESP: 2013/00288-4
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.unifesp.br:11600/39274 |
| Date | January 2014 |
| Creators | Penna, Vanessa [UNIFESP] |
| Contributors | Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), Duailibi, Silvio Eduardo [UNIFESP] |
| Publisher | Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | 131 f. |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UNIFESP, instname:Universidade Federal de São Paulo, instacron:UNIFESP |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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