CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Este trabalho tem como objetivo 1) avaliar o efeito da BMP-15 e do FSH, sozinhos ou em
diferentes associaÃÃes sobre o crescimento, sobrevivÃncia e formaÃÃo de antro em folÃculos
secundÃrios bovinos e 2) avaliar os nÃveis de expressÃo do RNAm para os receptores de
BMP-15 (BMPR-IB e BMPR-II) em folÃculos crescidos in vitro. Com relaÃÃo ao cultivo,
folÃculos secundÃrios foram microdissecados e cultivados por doze dias em α-MEM+
sozinho,
ou suplementado com BMP-15 e/ou FSH, sozinhos ou em diferentes associaÃÃes. ApÃs o
cultivo, foram avaliados o diÃmetro folicular, a viabilidade e a taxa de formaÃÃo de antro. A
anÃlise de expressÃo gÃnica foi realizada por PCR em tempo real, utilizando folÃculos
cultivados nos diferentes tratamentos, para comparaÃÃes dos nÃveis de RNAm. ApÃs o
perÃodo de cultivo verificou-se que a utilizaÃÃo da BMP+FSH (0-12) estimulou um aumento
significativo no diÃmetro folicular em relaÃÃo aos demais tratamentos (p<0,05), bem como
estimulou a formaÃÃo da cavidade antral de forma mais efetiva que o controle (MEM) e a
BMP-15 sozinha (p<0,05). No entanto, em relaÃÃo à sobrevivÃncia, apÃs12 dias o tratamento
BMP+FSH (0-12) reduziu significativamente a viabilidade folicular em relaÃÃo aos demais
tratamentos (p<0,05). Os resultados mostraram que os nÃveis de RNAm para o receptor de
BMP-15 do tipo I (BMPR-IB) foram significativamente maiores nos folÃculos cultivados com
MEM quando comparado aos demais tratamentos, enquanto que os nÃveis de RNAm para o
receptor do tipo II (BMPR-II) nÃo diferiram entre os tratamentos. Os maiores nÃveis de
RNAm para o receptor de FSH foram detectados em folÃculos cultivados com BMP-15
sozinha. Em conclusÃo, este estudo demonstrou que a combinaÃÃo de BMP-15 + FSH durante
todo o perÃodo de cultivo (D0-D12) acelera o crescimento de folÃculos prÃ-antrais bovinos
cultivados por 12 dias, mas este efeito reduz a viabilidade folicular, afetando a integridade ultra-
estrutural dos folÃculos. AlÃm disso, a adiÃÃo de BMP isoladamente aumentou os nÃveis de
expressÃo de RNAm para FSHR apÃs 12 dias de cultivo,mostrando que BMP-15 e FSH podem
contribuir significativamente para o desenvolvimento in vitro de folÃculos prÃ-antrais cultivados
por 12 dias nesta espÃcie. / This study aims to 1) evaluate the effect of BMP-15 and FSH, alone or in different
combinations on the in vitro development, survival and antrum formation of bovine secondary
follicles and 2) quantify the levels of mRNA expression for BMP-15 receptors (BMPR-IB
and BMPR-II), FSH receptor and Kit Ligand in follicles grown in vivo and in vitro. With
regard to culture, secondary follicles were microdissected and cultured for twelve days in α-
MEM+ alone, or supplemented with BMP-15 and/or FSH, alone or in various associations.
After culture, follicular diameter were evaluated, viability and rate of antrum formation. For
the analyzes gene expression, by real time PCR, were used follicles cultured in the different
treatments for comparisons of the levels of mRNA. After the culture period it was found that
the association of BMP+FSH (0-12) stimulated a significant increase in follicular diameter in
relation to other treatments (p<0.05), as well as stimulated the formation of antral cavity more
effectively the control (MEM) and BMP-15 alone (p<0.05). However, for survival, after 12
days treatment BMP+FSH (0-12) significantly reduced follicular viability when compared to
other treatments (p<0.05). The results showed that the levels of mRNA for BMP receptor type
I (BMPR-IB) were significantly higher in follicles cultured with MEM when compared to
other treatments, while levels of mRNA for the receptor type II (BMPR-II) did not differ
between treatments. The highest levels of mRNA for the FSH receptor were detected in
follicles cultured with BMP-15 alone. In conclusion, this study demonstrated that
combination of BMP-15+FSH (D0-D12) accelerates the growth of bovine preantral follicles
cultured for 12 days, but this effect reduces the follicular viability, affecting the ultrastructural
integrity of the follicles. Furthermore, the addition of BMP alone increased expression levels
of RNAm for FSHR after 12 days of culture , showing that BMP-15 and FSH may contribute
significantly to the in vitro development of preantral follicles cultured for 12 days in this
specie.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:5450 |
| Date | 27 February 2012 |
| Creators | Maria Juliane Passos |
| Contributors | Josà Roberto Viana Silva |
| Publisher | Universidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Biotecnologia (Campus da UFC em Sobral-CE), UFC, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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