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Previous issue date: 2013-08-23 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Most of the knowledge about cyanobacteria toxin production is traditionally associated with planktonic cynobacterial blooms. However, some studies have been showing that benthic and periphytic cyanobacterias can produce cyanotoxins. According to this, we aimed to evaluate the production of microcystins and saxitoxins and the yield potential of these toxins through the presence of genes involved in their synthesis in benthic and periphytic cyanobacterias isolated from some sample sites of the Mundaú river basin, Pernambuco, and the Environmental Protection Area of Araripe, Ceará. And due to the difficulty of strains morphological classification, phylogenetic analysis were performed using the 16S rDNA and 16S-23S ITS. The material was sampled in rivers and water supply reservoirs, using micromanipulation tec hniques. We isolated 45 clonal strains of cyanobacteria, which were identified morphologically and genetically. In order to evaluate the toxins production, the strains were cultured in controlled laboratory conditions for obtaining biomass for subsequent extraction and analysis of toxins by HPLC. In a complementary way of the toxins analysis, PCR’s were performed screening for genes involved on microcystins and saxitoxins production. Eight species were identified belonging to the Phormidiaceae, Pseudanabaenaceae and Nostocaceae families. This is the first study in Brazil that shows that strains from the Geitlerinema genus correspond to at least three phylogenetic lineages, which possibly correspond to three distinct species to be subsequently reclassified. The strains that showed one of the genes involved in the cyanotoxins production were analyzed by HPLC and Geitlerinema amphibium, G. lemmermannii, Cylindrospermum stagnale and Phormidium uncinatum were identified as producing one or more saxitoxins variants. Thus, this is the first report of saxitoxins producing for those first three species and the first report in Brazil for P. uncinatum. / A maior parte do conhecimento sobre a produção de toxinas por cianobactérias concentra-se no estudo das espécies planctônicas formadoras de florações. Entretanto, alguns estudos vêm mostrando que espécies bentônicas e perifíticas podem produzir várias toxinas. Neste sentido, objetivou-se avaliar a produção de saxitoxinas e microcistinas e a potencialidade de produção dessas toxinas através da presença de genes envolvidos na sua síntese em cianobactérias bentônicas e perifíticas isoladas de alguns pontos da bacia do rio Mundaú, Pernambuco, e da Área de Proteção Ambiental do Araripe, Ceará e, em razão da dificuldade de classificação morfológica das cepas isoladas, foram realizadas análises filogenéticas utilizando os genes 16S rDNA e 16S-23S ITS. O material foi coletado em rios e reservatórios de abastecimento e, usando técnicas de micromanipulação, foram isoladas cepas clonais de cianobactérias, as quais foram identificadas morfologicamente e geneticamente. A fim de avaliar a produção de toxinas, as cepas foram cultivadas em condições controladas de laboratório para obtenção de biomassa para posterior extração de toxinas e análise por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). De maneira complementar à análise de toxinas, foram realizadas análises genét icas (reação em cadeia da polimerase – PCR) para identificar genes responsáveis pela produção de microcistinas e saxitoxinas. Das 45 cepas isoladas, foram identificadas oito espécies pertencentes às famílias Phormidiaceae, Pseudanabaenaceae e Nostocaceae. Este é o primeiro trabalho feito no Brasil, onde é mostrado que isolados do gênero Geitlerinema correspondem a pelo menos três linhagens filogenéticas, que possivelmente correspondem a três espécies distintas a serem posteriormente reclassificadas. Os isolados que apresentaram um dos genes envolvidos na produção de cianotoxinas foram analisados por CLAE e Geitlerinema amphibium, G. lemmermannii, Cylindrospermum stagnale e Phormidium uncinatum foram identificadas como produtoras de um ou vários análogos de saxitoxinas, sendo o primeiro registro da produção de saxitoxinas para as três primeiras espécies e o primeiro registro no Brasil para P. uncinatum.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:tede2:tede2/5433 |
| Date | 23 August 2013 |
| Creators | BORGES, Hugo Leandro Ferreira |
| Contributors | MOLICA, Renato José Reis, SEVERI, William, MOURA, Ariadne do Nascimento, LIRA, Giulliari Alan da Silva Tavares de, EL-DEIR, Ana Carla Asfora |
| Publisher | Universidade Federal Rural de Pernambuco, Programa de Pós-Graduação em Ecologia, UFRPE, Brasil, Departamento de Biologia |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRPE, instname:Universidade Federal Rural de Pernambuco, instacron:UFRPE |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | -3370416653406378150, 600, 600, 600, 600, -2696744535589096700, 3263499605295365002, -2555911436985713659 |
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