This study aimed to isolate and characterize probiotic strains from fermented milk and multiplies
in the swine plasma medium for inoculation in Italian salamis, with the starter culture
Staphylococcus xylosus isolated from artisanal salamis. Colonies count of the fermented milks
was in the MRS (De Man Rogosa Sharpe Agar, Oxoid) medium by the technique of 'pour-plate'.
The strains were isolated through the technical spread plate in selective medium, MRS.
Individual strains were confirmed by Gram staining, catalase test and identified by kits Api 20 A
and 50 CHL (Bio Merieux SA, Marcy L'Etoile, France). After, passed the tests of resistance to
sodium chloride added to the MRS agar, in concentrations of 1%, 1.5%, 2%, 2.5% and 3% and
resistance to nitrite and nitrate, which were conducted by the same procedure at concentrations
of 80, 100, 120, 150 and 200 ppm. They also passed through of 0.3% bile and acid resistance
tests, pH: 3.0, 2.5 and 2.0 of 3M HCl for 3 and 6 hours. In the second experiment, the isolate
strain of Lactococcus lactis ssp lactis 2 passed through multiplication in fermented machine for
use as a starter in probiotics dry fermented sausages. The probiotic strains were multiplied in
plates with swine plasma medium plus agar and isolate starter Staphylococcus xylosus in
BAIRD-PARKER plate. In the treatments were used as starters the S. xylosus and Lactococcus
lactis, and as probiotic strains: Lactobacillus paracasei ssp paracasei 1 and Bifidobacterium spp
2. Control treatment was added with commercial starters, the Treatment 1: with isolate starters;
Treatment 2: with isolate starters adding more probiotic strain a Lactobacillus paracasei ssp
paracasei 1 and Treatment 3: starters more probiotic isolate strain Bifidobacterium spp 2. Were
evaluated microbiological, physic-chemical and sensory aspects. Samples of fermented milks
examined showed higher counts to 107CFU.g-1 and the strains were: Actinomyces israelli,
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Actinomyces naeslundii, Lactobacillus acidophylus/jensenii, Bifidobacterium spp 2, Lactococcus
lactis ssp lactis 2 e Lactobacillus paracasei ssp paracasei 1. The strains Bifidobacterium spp 2
and Lactobacillus paracasei ssp paracasei 1 were resistant to all concentrations of sodium
chloride, nitrite and nitrate, and the pH of 3.0 for 3 hours and 6 hours. The L. paracasei ssp
paracasei 1 showed lower counts to 106 UFC.mL-1 at pH 2.0, with 5.63 Log UFC.mL-1 in 3 hours
of incubation and 3.79 Log UFC.mL-1 in 6 hours. The strain of Bifidobacterium spp 2 lost its
probiotic viability after exposure of 6 hours in the pH of 2.0 and 2.5, showing reduction of 9.4 Log
UFC.mL-1 to 3.67 and 4.18 Log UFC.mL-1, respectively. The strains analyzed showed resistance
to bile salts and remained in a viable state after 4 hours of exposure to 0.3% of bile salts. The
propagation in a culture medium made with swine plasma achieved levels of 5.52 Log CFU.mL-1
to 8.58 Log CFU.mL-1 and optical density of 0.14 to 0.882, in 27 hours of fermentation. All final
physical and chemical parameters were up to standards with pHs and activities of water in
accordance with the safety standards of the product. Sensory characteristics showed that the
isolated strains notes were statistically equal and/or above the commercial strains and probiotics
salamis had cells in a viable state for 30 days of storage. / Este trabalho teve como objetivo isolar e caracterizar cepas probióticas de leites fermentados
comerciais e multiplica-lás em meio de cultura à base de plasma suíno para inoculação em
salames tipo Italiano, juntamente com a cultura starter Staphylococcus xylosus isolada de
salames artesanais. A contagem das colônias dos leites fermentados foi em meio MRS (De Man
Rogosa Sharpe Agar, Oxoid) pela técnica de semeadura em profundidade. As cepas foram
isoladas através da técnica spread-plate em meio seletivo, MRS. Cepas individuais foram
confirmadas por coloração de Gram e prova da catalase, e identificadas pelos kits Api 20 A e 50
CHL (Bio Merieux SA, Marcy L Etoile, France). Após, foram realizados os testes de resistência
ao cloreto de sódio adicionado ao ágar MRS, nas concentrações de 1%, 1,5%, 2 %, 2,5% e 3%
e resistência ao nitrito e nitrato, que foram realizados pelo mesmo procedimento, nas
concentrações de 80, 100, 120, 150 e 200 ppm. Realizou-se também os testes de resistência a
bile 0,3% e a acidez, em pH: 3,0, 2,5 e 2,0 de HCl 3M durante 3 e 6 horas. No segundo
experimento, a cepa de Lactococcus lactis ssp lactis 2 isolada foi multiplicada em fermentador
para uso como starter nos salames. As cepas probióticas foram multiplicadas em placas com
meio de plasma suíno acrescido de ágar e o starter isolado de Staphylococcus xylosus em
placas de BAIRD-PARKER. Nos tratamentos foram usados como starters o S. xylosus e
Lactococcus lactis, e como cepas probióticas: Lactobacillus paracasei ssp paracasei 1 e
Bifidobacterium spp 2. O tratamento Controle foi adicionado de starters comerciais; o
Tratamento 1: com starters isolados; Tratamento 2: com starters isolados mais adição da cepa
probiótica Lactobacillus paracasei ssp paracasei 1 e Tratamento 3: starters isolados mais cepa
probiótica Bifidobacterium spp 2. Foram avaliados os aspectos microbiológicos, físico-químicos
e sensoriais. As amostras de leites fermentados analisadas apresentaram contagens superiores
a 107 UFC.g-1 e as cepas encontradas foram: Actinomyces israelli, Actinomyces naeslundii,
Lactobacillus acidophylus/jensenii, Bifidobacterium spp 2, Lactococcus lactis ssp lactis 2 e
Lactobacillus paracasei ssp paracasei 1. As cepas Bifidobacterium spp 2 e Lactobacillus
paracasei ssp paracasei 1 foram resistentes a todas as concentrações de cloreto de sódio,
nitrito e nitrato, e ao pH de 3,0 durante 3 horas e 6 horas. O L. paracasei ssp paracasei 1
apresentou contagens inferiores a 106 UFC.mL-1 em pH 2,0, com 5,63 Log UFC.mL-1 em 3
horas de incubação e 3,79 Log UFC.mL-1 em 6 horas. A cepa de Bifidobacterium spp 2 perdeu
sua viabilidade probiótica após a exposição de 6 horas nos pH de 2,0 e 2,5, apresentando
redução de 9,4 Log UFC.mL-1 para 3,67 e 4,18 Log UFC.mL-1, respectivamente. As cepas
analisadas apresentaram resistência aos sais biliares, permanecendo em estado viável após 4 horas de exposição à 0,3% de sais biliares. A multiplicação em meio de cultura com plasma suíno alcançou níveis de 5,52 Log UFC.mL-1 a 8,58 Log UFC.mL-1 e densidade óptica de 0,14 a
0,882, em 27 horas de fermentação. Os parâmetros físico-químicos finais estavam todos de
acordo com os padrões de pH e atividade de água, conforme as normas de segurança do
produto. Com relação às características sensoriais, as cepas isoladas apresentaram notas
estatisticamente iguais e/ou superiores às comerciais e os salames probióticos apresentaram
células em estado viável durante 30 dias de armazenamento.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufsm.br:1/5649 |
| Date | 25 February 2008 |
| Creators | Urnau, Diala |
| Contributors | Fries, Leadir Lucy Martins, Flôres, Maristela Lovato, Kubota, Ernesto Hashime |
| Publisher | Universidade Federal de Santa Maria, Programa de Pós-Graduação em Ciência e Tecnologia dos Alimentos, UFSM, BR, Ciência e Tecnologia dos Alimentos |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFSM, instname:Universidade Federal de Santa Maria, instacron:UFSM |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 500700000006, 400, 500, 300, 300, 500, ec7c52cc-9b7b-4fd1-ba48-c63e52866025, 98e4bf3d-65fe-4f73-85d4-6db752b3a70f, 9eb093d5-b416-4510-93f5-d67d619c6bfc, f333b5e3-d733-44ee-9650-dcb4a835f9a4 |
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