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Previous issue date: 2015-02-25 / FACEPE / Os astrócitos desenvolvem atividades essenciais para a sobrevivência e diferenciação dos neurônios.
Uma dessas funções é produzir e secretar glicoproteínas que vão compor a matriz extracelular (MEC) e
as redes perineuronais (PNNs), as quais têm papel fundamental no crescimento e ramificação
dendrítica neuronais durante o desenvolvimento do sistema nervoso. Dados recentes do nosso
laboratório demonstram que parâmetros morfo-funcionais dos astrócitos do córtex cerebral de ratos
neonatos são alterados por um modelo de desnutrição materna multifatorial induzida pela dieta básica
regional (DBR). Neste contexto, o principal objetivo deste trabalho foi testar a hipótese de que este
tipo de desnutrição é capaz de alterar a expressão de moléculas da MEC em culturas primárias de
astrócitos corticais, bem como o crescimento neurítico e a distribuição das PNNs, respectivamente, em
co-culturas e culturas mistas de neurônios e células da glia. Ratas adultas receberam a DBR desde 30
dias antes do acasalamento até o final da gestação, enquanto ratas do grupo controle foram alimentadas
com dieta comercial balanceada. A prole de ambos os grupos foi utilizada até o terceiro dia pós-natal
para obtenção das culturas astrocitárias e mistas. Para o co-cultivo dos neurônios sobre astrócitos,
foram utilizados embriões no 16º dia de gestação. As culturas de astrócitos e co-culturas foram
mantidas em meio DMEM-F12 com 10% de soro fetal bovino e a cultura mista foi mantida em uma
mistura composta por 50% de DMEM-F12 + 10% de soro fetal bovino e 50% de meio Neurobasal +
1% de soro B27. A análise quantitativa da expressão de fibronectina, importante componente da MEC,
foi obtida por western blotting. O crescimento e complexidade das ramificações neuríticas, bem como
indicadores moleculares de proliferação de astrócitos foram avaliados por imunocitoquímica para β-
tubulina 3 e Ki67, respectivamente. A distribuição morfológica das PNNs foi avaliada através de
imunocitoquímica para as lectinas Wisteria floribunda e Vicia villosa, bem como para o proteoglicano
sulfato de condroitina-4. Os resultados mostraram que a desnutrição não modificou os níveis proteicos
da fibronectina nas culturas de astrócitos mantidos in vitro por 20, 30 e 40 dias. No entanto, reduziu a
presença das PNNs e do proteoglicano sulfato de condroitina-4 nas culturas mistas. A complexidade da
arborização dos neurônios do grupo desnutrido ou normonutrido foi modificada quando os mesmos
foram co-cultivados sobre astrócitos de neonatos com diferente condição nutricional. Porém, respostas
adaptativas dos neurônios de animais desnutridos foram observadas quando os mesmos foram
cultivados sobre astrócitos de grupo similar. Esses dados sugerem que alterações na reatividade
fenotípica de neurônios e astrócitos de neonatos, induzidas pela desnutrição materna, envolvem
modificações na expressão de componentes da MEC, principalmente de proteoglicanos e PNNs.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/14032 |
| Date | 25 February 2015 |
| Creators | SANTOS, Renata Virgínia Cavalcanti |
| Contributors | COSTA, Belmira Lara da Silveira Andrade da, PIMENTEL, Catarina Sofia Gonçalves |
| Publisher | Universidade Federal de Pernambuco |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Breton |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
| Rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
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