Hundens domesticering är en av de äldsta och tros ha startats 35000 f.n. Under domesticeringen från varg till hund, har hunden utvecklat både morfologiska och beteendemässiga skillnader så som bredare snot, högre skallar och minskat risktagande. Många av dessa skillnader tros bero på skillnader i aktiva regulatoriska regioner mellan arternas genom. Syftet med detta examensarbete är att kartlägga genomiska interaktioner för hjärnvävnader hos både hund och varg för att identifiera regulatoriska skillnader mellan arterna. Förhoppningsvis kan detta leda till nya insikter i genomiska skillnader som utvecklats under hundens domesticering. För att jämföra arternas regulatoriska regioner användes metoden Capture Hi-C (HiCap) på vävnadsprover av både hypotalamus och prefrontala cortex för varg och hund. HiCap är en metod utvecklad från chromosome conformation capture-metoden 3C. I HiCap så fixeras interagerande delar av DNA:t så att promotor-enhancerinteraktioner förblir. Dessa interagerande regioner ligeras sedan samman och biblioteksbereds för sekvensering. Genom sekvensering fastställs vilka promotorer som aktivt regleras av enhancers i cellkärnan. Hi-C bibliotek förberedes för alla vävnader för båda arterna. I vissa av biblioteken upptäcktes längre DNA-fragment som kan renas bort. På grund av avsaknad av probes för sequence capture så kunde laborationen ej fullföljas och därmed inga särskilda resultat erhållas. Om laborationen fullföljs kan resultaten förhoppningsvis ge nya epigenetiska insikter i hundens domesticering. / The domestication of dog to wolf started around 35000 BP and is believed to be the oldest domestication event among both plants and animals. During this event, dogs have developed differences in morphological and behavioural traits to their ancestors, such as wider snouts, higher skulls, and lower tendencies to taking risks. It is now suggested that many of these differences can be explained by differences in active regulatory regions. The main objective of this thesis is to map chromatin interactions in the genome of wolf and dog brain tissues to annotate regulatory variants between the canine species. This will hopefully provide novel information regarding genomic changes mediating traits gained through domestication. We will perform Capture Hi-C (HiCap) on tissue samples of hypothalamus and prefrontal cortex of wolf and dog. HiCap is a method derived from the chromosome capture method 3C. In HiCap, the interacting regions of the DNA are crosslinked, ensuring that promoter-enhancer interactions will not be lost. These interacting regions are then ligated together, followed by sequencing library preparation. Subsequently, sequencing of these libraries will provide information of which promoters are actively regulated by enhancers in the nucleus. We successfully prepared Hi-C libraries for all tissues and animals. However, there were longer fragments in some libraries which can be removed. Due to lack of necessary probes for sequence capture, the laboratory work was cut short and no major results were obtained. By continuing the laboratory work, hopefully these libraries will result in novel insights in the domestication of the dog.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UPSALLA1/oai:DiVA.org:kth-321581 |
| Date | January 2022 |
| Creators | Carlsson Norlin, Roxanne |
| Publisher | KTH, Proteinvetenskap |
| Source Sets | DiVA Archive at Upsalla University |
| Language | English |
| Detected Language | Swedish |
| Type | Student thesis, info:eu-repo/semantics/bachelorThesis, text |
| Format | application/pdf |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | TRITA-CBH-GRU ; 2022:313 |
Page generated in 0.0129 seconds