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Avaliação da resposta imune à proteína mcep (Mycobacterium cell entry protein) em indivíduos com tuberculose pulmonar [manuscrito]

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Dissertação_ICS_ Cristiane Santos Nascimento.pdf: 390426 bytes, checksum: 2708fb8205c805d25a600799b987bcaa (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-26T12:46:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Dissertação_ICS_ Cristiane Santos Nascimento.pdf: 390426 bytes, checksum: 2708fb8205c805d25a600799b987bcaa (MD5) / Fundação Oswaldo Cruz / [INTRODUÇÃO]. O Mycobacterium tuberculosis é responsável por 100.000 novos
casos de tuberculose anualmente no Brasil. Diante desta alta incidência, é
imperativo a busca de estudos que possam melhor elucidar a interação dos
componentes do bacilo com o sistema imune .A resposta imune para muitos
componentes do bacilo parece não estar clara. Entre as proteínas que compõe a
parede celular do bacilo, algumas tem sido estudada, mas a maioria delas tem sua
função ainda desconhecida. Recentemente uma nova proteína do M.tuberculosis,
MCEP (Mycobacterium cell entry protein) foi clonada e sequenciada. MCEP é uma
proteína de 52kD que medeia a entrada e sobrevivência do M. tuberculosis em
células não fagocíticas e em macrófagos humanos. [OBJETIVO] . Estudar a
resposta imune humoral e celular contra MCEP em indivíduos PPD-, PPD+ e
pacientes com tuberculose pulmonar. [GRUPOS DE ESTUDO E MÉTODOS]. Dez
indivíduos PPD-, dez PPD+ e dez pacientes com tuberculose pulmonar foram
incluídos neste estudo. Foram coletados soro dos indivíduos dos grupos
estudados para determinação dos títulos de anticorpos contra MCEP através da
técnica de ELISA. As placas foram sensibilizadas com 1 ug/ml do antígeno solúvel
de MCEP onde foi incubada e em seguida processada as lavagens e finalizando
a detecção através da adição do substrato. Para avaliar a imunidade celular
células mononucleares foram isoladas do sangue periférico pelo gradiente de
Ficoll-hypaque e cultivados na estufa à 370C com 5% de CO2 por 5 dias na
presença do antígeno total do M. tuberculosis (1ug/ml), MCEP (1ug/ml), pokeweed
mitógeno-PWM (1/100), conA (10ug/ml) e anti-TGF β(10ng/ml). A transformação
blástica induzida por MCEP e a sua capacidade de inibir a proliferação celular
induzida por ConA foi mensurada por incorporação de H-tymidine. Concentrações
de IL-2, IFNγ, TNFα,IL-10 e TGFβ foram determinadas nos sobrenadantes pela
técnica de ELISA (ENDOGEN). [RESULTADOS]. Este estudo demonstra que
MCEP induziu baixos níveis de IgG no soro. A proliferação celular em resposta à
MCEP foi muito baixa em todos os grupos estudados. A mediana de IL-2 em
resposta a MCEP foi de 20 pg/ml, 6pg/ml e 17 pg/ml nos sobrenadantes do grupos
PPD-, PPD+ e pacientes com tuberculose pulmonar. A produção de IFNγ em
reposta à MCEP foi de 11pg/ml, 1pg/ml e 5pg/ml e de TNFα foi de 1pg/ml, 4pg/ml
e 58pg/ml nos mesmos grupos estudados. Em adição MCEP induziu
concentrações baixas de IL-10. Contudo, MCEP induz uma grande produção de
TGFβ em células mononucleares de ambos grupos controles e pacientes avaliados
respectivamente 1742pg/ml, 1773pg/ml e 2361 pg/ml. A capacidade de
proliferação induzida por ConA foi inibida pela adição de MCEP e revertida pelo
ix
anti - TGFβ. [CONCLUSÕES]. MCEP foi capaz de induzir IgG total no soro. A
capacidade de ativação linfoblástica não foi observada. Não se observou a
produção de citocinas ativadoras do sistema imune como IL-2, IFNγ e TNFα nas
células mononucleares de todos os grupos estudados. Mcep não induziu produção
de IL-10, porém induziu uma alta produção de TGFβ nos sobrenadantes dos
grupos estudados. MCEP inibiu a capacidade estimulatória de ConA sobre as
células monoucleares. Este efeito de MCEP foi mediado por TGF β.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:192.168.11:11:ri/19824
Date21 December 1999
CreatorsNascimento, Cristiane Santos
ContributorsBarral-Netto, Manoel, Cruz Filho, Álvaro Augusto Souza da, Barral-Netto, Manoel, Bou-Habib, Dumith Chequer
PublisherInstituto de Ciências da Saúde, em Imunologia, UFBA, brasil
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Sourcereponame:Repositório Institucional da UFBA, instname:Universidade Federal da Bahia, instacron:UFBA
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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