Orientador : Prof. Dr. Obdulio Gomes Miguel / Co-orientadora : Profª. Drª. Marilis Dallarmi Miguel / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 31/03/2011 / Inclui referências / Área de concentração: Insumos, medicamentos e correlatos / Resumo: Solidago microglossa DC, conhecida popularmente como arnica do mato, é uma planta
medicinal bastante utilizada na América do Sul graças às suas propriedades
antiinflamatórias, analgésicas e cicatrizantes. Apesar do amplo uso, existem poucos relatos
na literatura envolvendo sua composição química bem como estudos caracterizando suas
atividades biológicas e toxicológicas. Neste contexto, o presente trabalho tem por objetivo
atender a esses requisitos contribuindo para o controle de qualidade de um fitoterápico à
base de arnica por meio do desenvolvimento de um método analítico por CLAE-DAD. Com
base na caracterização fitoquímica desta espécie, isolou-se uma substância, a qual foi
analisada por espectroscopia de absorção no ultravioleta, ressonância nuclear magnética de
1H e 13C e espectrometria de massas, sendo esta identificada como quercetina-3-
ramnosídica (quercitrina). Este flavonóide possui propriedades antiinflamatórias
comprovadas, fato este que pode justificar o uso popular deste extrato. Em virtude destas
propriedades e da grande quantidade desta substância encontrada nos extratos medicinais,
esta foi considerada o marcador fitoquímico desta espécie. Para sua quantificação um
método rápido e sensível foi desenvolvido utilizando como fase estacionária uma coluna
Zorbax Bonus RP (100 x 3,0 mm, 3,5 ..m de partícula). A fase móvel consistiu em um
gradiente linear entre acetonitrila (A) e solução a 0,5% de ácido fórmico (B) iniciando com
10% de A até 60% de A em 8 min. O fluxo foi de 1,3 mL min-1 e o volume de injeção de 10
µL. A temperatura do forno foi mantida em 35º C e detecção realizada em 346 nm.
Parâmetros de validação indicaram que o método é linear, preciso, exato e robusto dentro
do intervalo compreendido entre 10 a 100 ..g.mL-1. Os ensaios de atividades biológicas
revelaram uma potente capacidade antioxidante do extrato bruto e das frações clorofórmio,
acetato de etila e hidroalcoólica por meio do método da redução do complexo do
fosfomolibdênio e do radical DPPH. O extrato bruto exerceu ainda influência positiva sobre a
atividade da enzima tirosinase, indicando uma possível utilização no tratamento de
patologias pigmentares. Além dos efeitos benéficos, estudos de toxicidade revelaram que o
extrato bruto é inativo frente ao microcrustáceo Artemia salina. A baixa toxicidade foi
também observada por meio de ensaios pré-clínicos envolvendo a ingestão do extrato em
ratos Wistar. Neste caso, não foram evidenciadas alterações significativas nos parâmetros
bioquímicos e hematológicos, comprovando sua segurança no caso de exposição aguda ao
fitoterápico.
Palavras-chaves: Solidago microglossa, arnica do mato, quercitrina, atividade antioxidante,
tirosinase, toxicidade, CLAE. / Abstract: Solidago microglossa DC, popularly known as arnica bush, is a medicinal plant widely used
in South America because of its anti-inflammatory, analgesic and healing properties. Despite
its widespread use, there are few studies about its chemical composition and the
characterization of its biological and toxicological activities. In this context, the goal of this
paper is to provide these requirements, and contribute to the quality control of a medicine
based on arnica. This is possible by developing an analytical method by HPLC-DAD. Based
on the phytochemical characterization of this species, a substance was isolated. It was
analyzed by ultraviolet absorption spectroscopy, nuclear magnetic resonance of 1H and 13C
NMR and mass spectrometry. It was identified as quercetin-3-rhamnosidic (quercitrin). This
flavonoid has proven anti-inflammatory properties, a fact that may justify the popular use of
its extract. Because of these properties and the large quantity of this substance found in
medicinal extracts, this was considered the phytochemical marker of this species. To the
quantification, a rapid and sensitive method was developed using as stationary phase Zorbax
Bonus RP column (100 x 3.0 mm, 3.5 mm in particle). The mobile phase consisted of a linear
gradient of acetonitrile (A) and a solution of 0.5% formic acid (B) starting with 10% A to 60%
A in 8 min. The flow was 1.3 mL min-1 and the injection volume was 10 uL. The oven
temperature was maintained at 35 ° C and the detection was performed at 346 nm.
Validation parameters indicated that the method is linear, precise and accurate within the
range from 10 to 100 ..g.mL-1. The biological activities test revealed a potent antioxidant
capacity of the crude extract and chloroform, ethyl acetate and water-alcohol fractions, by the
method of reducing the phosphomolybdenum complex and DPPH radical. The crude extract
also demonstrated a positive influence on the activity of tyrosinase enzyme, indicating the
possibility to use the extract in the treatment of pigmentary disorders. Besides the beneficial
effects, toxicity studies revealed that the crude is inactive against brine shrimp. Low toxicity
was also observed in pre-clinical trials involving the ingestion of the extract by rats. In this
case, there were no significant changes in biochemical and hematological parameters,
confirming its safety in cases of acute exposure to the herbal medicine.
Key words: Solidago microglossa, arnica bush, quercitrin, antioxidant, tyrosinase, toxicity,
HPLC
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:dspace.c3sl.ufpr.br:1884/37010 |
| Date | January 2011 |
| Creators | Smolarek, Fernanda Santana Ferreira |
| Contributors | Miguel, Obdúlio Gomes, 1952-, Miguel, Marilis Dallarmi, 1966-, Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | 140f. : il. algumas color., grafs., tabs., application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPR, instname:Universidade Federal do Paraná, instacron:UFPR |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | Disponível em formato digital |
Page generated in 0.0032 seconds