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Previous issue date: 2017-07-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Salmonella é um dos principais patógenos que causam infecções relacionadas ao consumo de alimentos contaminados. Salmonella enterica sorotipo Enteritidis (Salmonella Enteritidis) é mais comumente associado a surtos clínicos em vários países, incluindo no Brasil. Por meio do mecanismo de quorum sensing (QS), esse patógeno é capaz de coordenar seu perfil de expressão gênica com a densidade populacional. O mecanismo de QS mediado pelo autoindutor-1 (AI-1) acil homoserina lactona (AHL) em Salmonella é incompleto, uma vez que não há síntese dessa molécula. Entretanto, esse patógeno é capaz de detectar AHLs produzidas por outras espécies e regular funções celulares. Neste trabalho, foi avaliada a influência de n-dodecanoilhomoserina lactona (C12-HSL) no consumo de glicose e no metabolismo de Salmonella Enteritidis PT4 578 cultivada em condições anaeróbias. A análise do sobrenadante do meio de cultura de Salmonella por cromatografia líquida de alto desempenho (HPLC) revelou que a absorção de glicose após 4 e 6 h de cultivo na presença de 50 nmol L -1 de C12-HSL foi 26 e 29% menor, respectivamente, do que o constatado na ausência de C12-HSL. Este AI-1 também influenciou na abundância de alguns metabólitos intracelulares, analisados em cromatógrafo gasoso acoplado a espectrômetro de massas (GC-MS). Os metabólitos detectados estão relacionados com as vias de metabolismo de glicerolipídios, purinas, aminoácidos e biossíntese de aminoacil-tRNA. A análise do sobrenadante por cromatografia líquida de ultra desempenho acoplada a um sistema de espectrômetro de massa do tipo triploquadrupolo (UPLC-QqQ /MS) revelou que houve aumento de 1,64 vezes na concentração de C12-HSL até 7 h no meio de cultura em que essa molécula foi adicionada. Os dados obtidos demonstraram a influência de C12-HSL exógena no metabolismo de Salmonella Enteritidis PT4 578 e, além disso, evidenciaram uma possível síntese de C12-HSL por este patógeno. Por se tratar de resultado ainda não observado anteriormente, esta informação deverá ser confirmada por análises futuras. / Salmonella is one of the major pathogens that cause infections related to the consumption of contaminated food. Salmonella enterica serotype Enteritidis (Salmonella Enteritidis) is most commonly associated with clinical outbreaks in several countries, including Brazil. By means of the quorum sensing (QS) mechanism, this pathogen is able to coordinate its gene expression profile with the population density. The mechanism of QS mediated by the autoinducer-1 (AI-1) acyl homoserine lactone (AHL) in Salmonella is incomplete as there is no synthesis of this molecule. However, this pathogen is capable of detecting AHLs produced by other species and regulating cellular functions. In this work, the influence of n-dodecanoilhomoserine lactone (C12-HSL) on glucose consumption and the metabolism of Salmonella Enteritidis PT4 578 cultured under anaerobic conditions was evaluated. Supernatant analysis of the Salmonella culture medium by high performance liquid chromatography (HPLC) showed that glucose uptake after 4 and 6 h of cultivation in the presence of 50 nmol L -1 C12-HSL was 26 and 29% lower, respectively, than that found in the absence of C12-HSL. This AI-1 also influenced the abundance of some intracellular metabolites, analyzed in gas chromatograph coupled to mass spectrometer (GC-MS). The metabolites detected are related to glycerolipid, purine, amino acid and aminoacyl-tRNA biosynthesis pathways. Analysis of the supernatant by ultra-performance liquid chromatography coupled to a triple- quadrupole mass spectrometer system (UPLC-QqQ / MS) revealed that there was a 1.64-fold increase in C12-HSL concentration up to 7 h of cultivation in the culture medium in that this molecule was added. The data obtained demonstrated the influence of exogenous C12-HSL on the metabolism of Salmonella Enteritidis PT4 578 and, in addition, evidenced a possible synthesis of C12-HSL by this pathogen. As this result was not previously observed, this information should be confirmed by future analyzes.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:localhost:123456789/21538 |
| Date | 26 July 2017 |
| Creators | Carneiro, Deisy Guimarães |
| Contributors | Mendes, Tiago Antônio de Oliveira, Pinto, Uelinton Manoel, Vanetti, Maria Cristina Dantas |
| Publisher | Universidade Federal de Viçosa |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFV, instname:Universidade Federal de Viçosa, instacron:UFV |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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