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Caracterização molecular de fungos da Micoteca/UFPE e screening da produção de taxol

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Previous issue date: 2015-02-11 / CAPES / A Organização Mundial da Saúde (OMS) estima que até 2030 sejam previstos 27
milhões de casos incidentes de câncer, 17 milhões de mortes por câncer e 75 milhões de
pessoas vivas, anualmente, convivendo com esta doença. No Brasil, as estimativas para
o ano de 2012, válidas também para o ano de 2013, apontam a ocorrência de
aproximadamente 518.510 novos casos de câncer, reforçando a magnitude do problema
do câncer no país. Apesar da inserção de novos fármacos na terapia contra o câncer,
vários tumores sólidos ainda não dispõem de tratamento adequado. Assim, é necessária
a busca de novas alternativas medicamentosas para melhorar a eficácia do tratamento de
doenças neoplásicas avançadas. Uma das principais áreas estudadas atualmente no
mundo é a pesquisa de novos medicamentos com propriedades antitumorais. Microorganismos
endofíticos podem ser entendidos como aqueles que vivem no interior das
plantas, habitando, suas partes aéreas, como folhas e caules sem causar aparentemente
nenhum dano a seus hospedeiros e conseguem viver nos tecidos internos das plantas e
dispõem de uma riqueza bioquímica ainda não muito bem explorada. Os metabólitos
secundários são compostos de baixo peso molecular, produzidos por fungos endofíticos
em resposta às condições ambientais. Esses compostos apresentam potencial aplicação
como os antibióticos. O objetivo do presente estudo foi avaliar seis gêneros da
micoteca/URM quanto à produção do taxol. Os gêneros foram cultivados em meio BD
(Batata Dextrose) por 72 horas em temperatura ambiente seguida de filtração a vácuo
para extração do DNA. As reações de PCR foram realizadas com iniciadores e
condições específicas para a amplificação do gene ITS do rDNA. Os produtos do gene
ITS rDNA amplificados foram purificados e sequenciados. Os dados obtidos pelo
sequenciamento do gene ITS rDNA foram analisados e comparados, pelo programas
BLAST. Após a confirmação foram realizadas fermentações, seguidas da extração do
metabólito secundário com acetato de etila. Os extratos foram analisados em
Cromatografia em Camada Delgada (CCD) que mostrou um resultado satisfatório
quando correlacionada a técnica Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPLC).
Dessa forma, se faz necessário uma continuidade desse estudo para otimização do
processo de fermentação e extração do produto bioativo. / The World Health Organization estimates that by 2030 are provided 27 million incident
cases of cancer, 17 million deaths from cancer and 75 million people alive each year
living with this disease. In Brazil, the estimates for the year 2012, also valid for the year
2013 indicate the occurrence of approximately 518,510 new cases of cancer, reinforcing
the magnitude of the cancer problem in the country. Despite the inclusion of new drugs
in cancer therapy, several solid tumors still lack appropriate treatment. Thus, the search
for new medicinal alternative is needed to improve the effectiveness of treatment of
advanced malignancies. One of the main areas currently studied in the world is the
search for new drugs with antitumor properties. Endophytic microorganisms can be
understood as those who live within the plant, dwelling, its aerial parts such as leaves
and stems without apparently causing any damage to their hosts and can live in the
internal tissues of plants and have a biochemical wealth yet very well traveled.
Secondary metabolites are low molecular weight compounds produced by endophytes
in response to environmental conditions. These compounds have potential application as
antibiotics. The aim of this study was to evaluate six genera of mycology collection /
URM for the production of taxol. The genera were cultured in BD (Potato Dextrose) for
72 hours at room temperature followed by vacuum filtration for DNA extraction. PCR
reactions were performed with specific primers and conditions for the gene
amplification of the rDNA ITS. The STI gene amplified rDNA products were purified
and sequenced. The data obtained by sequencing of the ITS rDNA were analyzed and
compared by BLAST programs. After confirming fermentations were performed,
followed by secondary metabolite extraction with ethyl acetate. The extracts were
analyzed by Thin Layer Chromatography, which showed a satisfactory result when
correlated Liquid Chromatography Technical High Efficiency. Thus, if a continuation of
this study to optimize the process of fermentation and extraction of bioactive product is
necessary.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/17081
Date11 February 2015
CreatorsANDRADE, Hortência Farias de
ContributorsSILVA, Márcia Vanusa da, OLIVEIRA, Maria Betânia Melo de, LIMA, Glaúcia Manoela
PublisherUniversidade Federal de Pernambuco, Programa de Pos Graduacao em Biotecnologia Industrial, UFPE, Brasil
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Sourcereponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE
RightsAttribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/, info:eu-repo/semantics/openAccess

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