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Previous issue date: 2010 / Faculdade de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco / Lectinas são proteínas ou glicoproteínas de origem não-imune que são capazes de reconhecer e ligar-se
a carboidratos de forma especifica e reversível. O isolamento e a caracterização de novas lectinas
revelam propriedades que são de importância prática para diferentes áreas da pesquisa biológica. No
reino vegetal, estas proteínas são abundantes em sementes, raízes, frutos, flores e folhas. A espécie
Eugenia malaccensis L., conhecida popularmente no Brasil como jambo vermelho, tem sido
empregado na medicina popular para diversos fins. O objetivo do trabalho foi clonar um gene de
lectina em genótipo de E. malaccensis, bem como analisar a expressão gênica em diferentes tecidos da
planta pela técnica RT-PCR semiquantitativo e quantitativo (q-PCR). As sequências de genes de
lectinas vegetais apresentam domínios protéicos conservados em diferentes espécies. Para a clonagem
do gene de lectina de E. malaccensis, foi realizado alinhamento de sequências desse gene de espécies
vegetais e obtido o desenho do oligonucleotídeos para as regiões conservadas. Foram realizadas
amplificações do gene, a partir do DNA gênomico, por PCR. As reações de PCR foram aplicadas em
gel de agarose (1,2%) e os fragmentos obtidos foram purificados e clonados em vetor TOPO TA e
sequenciados. O RNA total foi extraído utilizando o reagente Trizol (Invitrogen) dos tecidos de folhas,
sementes, raízes e caule e analisado a sua expressão gênica pela técnica RT-PCR semiquantitativo e
PCR quantitativo (q-PCR). O conjunto de oligonucleotídeos desenhados para a clonagem do gene da
lectina de E. malaccensis, amplificou um fragmento de, aproximadamente, 320 pares de bases (pb) e
após o sequenciamento foi comprovada a identidade com outras sequência de genes de lectinas de
plantas onde foi identificado um domínio de ligação a maose. Esse gene parcial de lectina foi
denominado de EmLec1. A estratégia de clonagem gênica utilizada foi eficiente para o isolamento e
caracterização do gene parcial de lectina com ligação a glicose/manose de E. malaccensis (gene
EmLec1). A análise de expressão do gene EmLec1 mostrou sua síntese em diferentes tecidos vegetais,
como folhas, sementes, raízes e caule em E. malaccensis. Portanto, o presente trabalho promoveu o
primeiro relato sobre clonagem de gene parcial de lectina com ligação a glicose/manose de E.
malaccensis, sendo o ponto inicial para futuras investigações sobre a sua função biológica
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/2149 |
| Date | 31 January 2010 |
| Creators | Renata de Souza Arruda, Isabel |
| Contributors | Tereza dos Santos Correia, Maria |
| Publisher | Universidade Federal de Pernambuco |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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