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Previous issue date: 2009-03-11 / The expansion of artificial insemination (AI) programs with frozen ram semen has
been limited by the need of intrauterine semen deposition and by the inconsistency of
the association between the conventional methods used to evaluate semen quality
and in vivo fertility. An alternative to improve the efficiency of AI programs would be
the profiling of the protein content of the seminal plasma to search for fertility
markers. The objective of the present study was to study the protein profile of ram
seminal plasma and to evaluate its association with parameters of frozen semen
quality. Ejaculates were split in two samples. The first sample was frozen in two
extenders: T1 (Tris + egg yolk + glycerol); and T2 (Tris + egg yolk + threalose). The
second sample was submitted to unidimensional electrophoresis to identify proteins
in the seminal plasma. The presence of the identified proteins was associated with
parameters of semen quality: sperm motility and membrane integrity, both prefreezing
and post-thawing, and post-thawing acrosome integrity. Post-thawing sperm
motility did not differ (P > 0.05) for T1 (18.6 ± 2.3) and T2 (23.4 ± 2.7). Post-thawing
sperm membrane integrity was similar (P > 0.05) for T1 (12.6 ± 1.4) and T2 (15.3 ±
1.7). There was also no difference (P > 0.05) between T1 and T2 with regard to postthawing
acrosome integrity (23.0 ± 1.5 e 21.3 ± 1.8, respectively). An intra-ram
analysis identified 17 proteins associated with the evaluated parameters: 10 of them
presented similar associations for distinct rams. In the inter-ram analysis, an 11 kDa
band was associated with lower pre-freezing sperm membrane integrity, a 24 kDa
band was related to reduced post-thawing sperm motility and membrane integrity,
and a 45 kDa band was associated with lower pre-freezing sperm membrane
integrity (P < 0.05). Thus, those three protein factors would be potential markers for
ram infertility with frozen semen because their absence was associated with
improved semen quality, regardless of individual ram effects. / A expansão de programas de inseminação artificial (IA) em ovinos com sêmen
congelado tem sido limitada pela necessidade de deposição intrauterina do sêmen e
pela associação inconsistente entre as técnicas convencionais de avaliação da
qualidade do sêmen e a fertilidade in vivo. Uma das alternativas para incrementar a
eficiência de programas de IA seria o mapeamento do conteúdo protéico do plasma
seminal, em busca de marcadores para fertilidade. O objetivo do presente trabalho
foi estudar o perfil protéico do plasma seminal de machos ovinos e avaliar a sua
associação com a qualidade de amostras de sêmen congelado. Os ejaculados dos
machos ovinos foram divididos em duas alíquotas. A primeira foi utilizada para
criopreservação, em dois diluentes: D1 (tris+gema de ovo+glicerol); e D2 (tris+gema
de ovo+trealose). A segunda alíquota foi usada para a busca de proteínas do plasma
seminal através da eletroforese unidimensional. A presença ou ausência das
proteínas foi associada com parâmetros de qualidade seminal: motilidade e
integridade da membrana espermática, ambas pré-congelamento e pósdescongelamento,
e integridade de acrossoma pós-descongelamento. A motilidade
espermática pós-descongelamento não diferiu (P > 0,05) entre D1 (18,6 ± 2,3) e D2
(23,4 ± 2,7). A integridade da membrana espermática pós-descongelamento foi
semelhante (P > 0,05) para D1 (12,6 ± 1,4) e D2 (15,3 ± 1,7). Também não houve
diferença (P > 0,05) entre D1 e D2 quanto à integridade do acrossoma pósdescongelamento
(23,0 ± 1,5 e 21,3 ± 1,8, respectivamente). A análise intra-machos
identificou 17 bandas proteicas associadas com os parâmetros avaliados, sendo que
10 destas associaram-se da mesma maneira, em diferentes machos. Na análise
inter-machos, a banda com 11 kDa foi associada com menor integridade da
membrana espermática pré-congelamento, a banda com 24 kDa foi associada com a
redução na motilidade e na integridade da membrana pós-descongelamento e a
banda com 45 kDa foi associada com menor integridade da membrana précongelamento
(P < 0,05). Portanto, essas três bandas protéicas seriam potenciais
marcadores para infertilidade com sêmen congelado, pois sua ausência foi
associada com incremento na qualidade seminal, independentemente do efeito dos
machos doadores de sêmen.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpel.edu.br:123456789/2530 |
| Date | 11 March 2009 |
| Creators | Goularte, Karina Lemos |
| Contributors | CPF:43349676049, http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4793234U8, Lucia Junior, Thomaz |
| Publisher | Universidade Federal de Pelotas, Programa de Pós-Graduação em Veterinária, UFPel, BR, Veterinária |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPEL, instname:Universidade Federal de Pelotas, instacron:UFPEL |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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