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Previous issue date: 2018-02-16 / A infecção pelo Trypanosoma cruzi é um problema de saúde pública, e é importante que seu
diagnóstico seja realizado com rapidez e eficiência. Entretanto, as técnicas aplicadas para esse fim
apresentam baixa sensibilidade e especificidade no que concerne a vigilância entomológica e
epidemiológica do parasito. Pensando nesta problemática, a bioespectroscopia com análise
multivariada foi utilizada neste trabalho para avaliar a eficiência na identificação da infecção
experimental de Triatoma brasiliensis por diferentes Unidades de tipagem discreta (DTU) do T. cruzi.
Na padronização do modelo de classificação foram utilizadas ninfas de 4° e 5º estádio de T.
brasiliensis, infectadas experimentalmente com diferentes DTUs do parasito (TcI, TcII, TcIII ou
infecção mista), na concentração de 40.000 parasitos/mL de sangue. Seguidos 15 e 30 dias após
infecção (DAI), espectros de infravermelho foram coletados do abdômen de cada inseto; 30 DAI,
dejetos intestinais foram coletados e posteriormente utilizados para análise do kDNA. A padronização
do modelo de calibração mostrou que a aplicação do infravermelho médio utilizando o Infravermelho
médio com transformada de Fourrier com reflexão total atenuada (ATR-FTIR) discriminou os
triatomíneos não infectados e infectados com o T. cruzi. Além disso, a técnica foi capaz de distinguir
as DTUs utilizadas, e separar os 5 grupos estudados apenas com a análise exploratória de dados por
meio da aplicação da Análise dos componentes principais (PCA), a qual identificou diferencialmente
grupamentos proteicos, ácidos nucleicos e em menor proporção, lipídeos. A análise do kDNA
confirmou 92,5% das infecções, enquanto o ATR-FTIR identificou corretamente todas as amostras.
Desta forma, a bioespectroscopia foi eficiente, simples e acurada na identificação da infecção de T.
brasiliensis por T. cruzi, podendo ser utilizado como ferramenta de diagnóstico futura, auxiliando na
vigilância entomológica da infecção por este parasita. / The Trypanosoma cruzi infection is a public health problem and it is substancial that its
diagnosis be performed quickly and efficiently. However, the techniques applied on the diagnosis of
T. cruzi infection present low sensitivity and specificity regarding the entomological and
epidemiological surveillance of the parasite. Considering this problem, the biospectroscopy with the
use of ATR-FTIR was used in this study to evaluate its efficiency in the identification of the
experimental infection of Triatoma brasiliensis by different DTUs of T. cruzi. The standardization of
the calibration model included the use of fourth and fifth instars of T. brasiliensis, which were infected
with different DTUs of the parasite (TcI, TcII, TcIII or mixed infection) at a concentration of 40,000
parasites / ml of blood. Followed 15 and 30 days after infection (DAI), infrared spectra were collected
from the abdomen of each insect; 30 DAI, intestinal wastes were collected and later used for kDNA
analysis. The standardization of the calibration model showed that the application of the mild-infrared
using the ATR-FTIR distinguished the triatomines that were not infected and experimentally infected
with T. cruzi. In addition, the technique was able to identify the DTUs used, separating the 5 distinct
groups only with the exploratory data analysis through the application of Principal Component
Analysis (PCA), which differentially identified protein clusters, nucleic acids and to a lesser extent,
lipids. The kDNA analysis confirmed 92.5% of the infected insects, while the ATR-FTIR correctly
identified all samples. Thus, biospectroscopy applied with the use of ATR-FTIR was efficient in the
identification of the T. brasiliensis infection by T. cruzi, and could be used as a diagnostic tool for
the future, assisting in the entomological surveillance of the infection by this parasite.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufrn.br:123456789/25523 |
| Date | 16 February 2018 |
| Creators | Jales, Jéssica Teixeira |
| Contributors | 03893282602, Bellini, Bruno Cavalcante, 00990546470, Lima, Kassio Michell Gomes de, 03144855464, Barbosa, Patricia Batista Barra Medeiros, 01957750405, Camara, Antonia Cláudia Jácome da, Gama, Renata Antonaci |
| Publisher | PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIAS BIOLÓGICAS, UFRN, Brasil |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFRN, instname:Universidade Federal do Rio Grande do Norte, instacron:UFRN |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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