Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The purinergic system is known to be an important signaling pathway in different tissues.
Among the components of this system have adenosine, a modulator of central nervous,
circulatory and immune systems. The concentration of adenosine in the host is controlled by
the enzyme adenosine deaminase (ADA), present in tissues, cells and fluids. As a result, the
objectives of this study were (1) to determine the ADA activity in Trypanosoma evansi, (2)
evaluate the activity of ADA in serum, erythrocytes, lymphocytes and brain of infected rats,
and (3) determine the concentration of nucleotides and nucleosides in serum and cerebral
cortex of rats infected with T. evansi. In the first study two mice were infected with T. evansi.
When these animals showed high parasitemia (±108 parasites/uL) was performed with blood
collection and separation of trypomastigotes by DEAE-cellulose column for performing the
assays. Spectrometry was performed by the biochemical detection of ADA in the form
trypomastigotes of T. evansi. In a second study, we used 39 rats divided into three groups:
group A and B (infected) and group C (C1 and C2 control group) Samples of blood and
brain samples were collected on day 4 PI (A and C1) and 20 PI (B and C2). From the blood
(with anticoagulant) were separated lymphocytes and erythrocytes for measurement of ADA
activity, since the serum was obtained from blood samples stored in tubes without
anticoagulant. The brain was separated into cerebellum, cerebral cortex, hippocampus and
striatum to evaluate the ADA activity in each structure. Decrease of ADA activity in serum
and erythrocytes in rats infected with T. evansi when compared not-infected (P<0.05). ADA
activity in lymphocytes was decreased at day 4 PI and increased in day 20 PI. There was no
difference in ADA activity in the cerebellum. In the cerebral cortex caused a reduction of
ADA activity on days 4 and 20 PI. Decrease of ADA activity in hippocampus and striatum in
the day 4 and day 20 PI, respectively. In a third study, 24 rats were used, 12 used as a
negative control and 12 infected with T. evansi. On day 4 (n = 6 per group) and 20 PI (n = 6
per group) were performed to obtain blood samples of serum and cerebral cortex for analysis.
The samples were prepared for quantification of ATP, ADP, AMP and adenosine. This study
found increased concentrations of ATP, AMP and adenosine in the brain and serum of rats
infected with T. evansi in both periods, except that the levels of adenosine decreased on day 4
PI. The ADP concentration did not change in this study. Therefore, the infection by T. evansi
purinergic system components can be changed, may be involved in immune response, in
anemia and neurological signs. / O sistema purinérgico é conhecido por ser uma via de sinalização importante em diversos
tecidos. Entre os componentes desse sistema destacamos a adenosina, um modulador do
sistema nervoso central, circulatório e imunológico. A concentração de adenosina no
hospedeiro é controlada pela enzima adenosina deaminase (ADA), presentes em tecidos,
células e fluidos. Em virtude disso, os objetivos deste estudo foram (1) determinar a atividade
da ADA no Trypanosoma evansi; (2) avaliar a atividade da ADA no soro, eritrócitos,
linfócitos e encéfalo e (3) determinar a concentração de nucleotídeos e nucleosideos no soro e
córtex cerebral de ratos infectados com T. evansi. Para um primeiro estudo foram infectados
dois camundongos com T. evansi. Quando estes animais apresentavam elevada parasitemia
(±108 parasito/μL) foi realizada a coleta de sangue e separação dos flagelados por coluna de
DEAE-celulose, a fim realização dos ensaios enzimáticos no parasito. Atividade da ADA nas
formas trypomastigotas de T. evansi foi determinada por espectofotometria. Em um segundo
estudo foi utilizado 39 ratos, divididos em três grupos: grupo A e B (infectado) e grupo C (C1
e C2/controle). Amostras de sangue e encéfalo foram colhidas nos dias 4 pós-infecção (PI)
(grupos A e C1) e 20 PI (grupos B e C2). A partir do sangue total colhido com anticoagulante
foram separados os linfócitos e eritrócitos para mensuração da atividade da ADA, já o soro foi
obtido de amostras de sangue armazenadas em tubos sem anticoagulante. O encéfalo foi
separado em cerebelo, córtex cerebral, hipocampo e estriado para avaliar a atividade da ADA
em cada estrutura. Então, observou-se redução da atividade de ADA no soro e eritrócitos em
ratos infectados com T. evansi em comparação com não-infectados (P <0,05). A atividade de
ADA em linfócitos estava diminuída no dia 4 PI e aumentou no dia 20 PI. Não houve
diferença da ADA no cerebelo. No córtex cerebral, no hipocampo e estriado ocorreu redução
da atividade da ADA nos dia 4 e 20 PI, respectivamente. Em todas as estruturas do encéfalo
foi detectada a presença do parasito por PCR. Em um terceiro estudo foram utilizados 24
ratos, sendo 12 controles negativos e outros 12 infectados com T. evansi. Nos dias 4 (n=6 por
grupo) e 20 (n=6 por grupo) foram realizadas as coletas de sangue para obtenção do soro e
amostras do córtex cerebral para mensuração dos níveis de ATP, ADP, AMP e adenosina.
Neste estudo, foi constatado aumento das concentrações de ATP, AMP e adenosina no
encéfalo e soro de ratos infectados com T. evansi nos dois períodos avaliados, com exceção
dos níveis de adenosina que reduziram no dia 4 PI. Não houve alteração na concentração de
ADP. Portanto, na infecção por T. evansi os componentes do sistema purinérgico pode ser
alterados, podendo estar envolvido na resposta imunológica, na anemia e nos sinais
neurológicos.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufsm.br:1/4058 |
| Date | 09 December 2011 |
| Creators | Silva, Aleksandro Schafer da |
| Contributors | Lopes, Sonia Terezinha dos Anjos, Monteiro, Silvia Gonzalez, Leal, Daniela Bitencourt Rosa, Bagatini, Margarete Dulce, Moreira, Cleci Menezes |
| Publisher | Universidade Federal de Santa Maria, Programa de Pós-Graduação em Medicina Veterinária, UFSM, BR, Medicina Veterinária |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFSM, instname:Universidade Federal de Santa Maria, instacron:UFSM |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 500500000007, 400, 300, 300, 300, 500, 300, 300, 0e22bc1c-35eb-49dd-915f-0d5c7bca25b7, 5a715c1e-0c79-4f72-a603-9969593b23cc, 704b8779-c765-4497-a071-668b178b5bb3, c557ce44-0763-4865-8372-1163d96ba82b, 273abd78-5b59-457d-b813-1eec64454b6a, c969a0f8-91fe-4cee-87f0-3dfdc1425406 |
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