Made available in DSpace on 2015-04-14T13:34:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1
411557.pdf: 393589 bytes, checksum: 053a463b93c95b4c46c869360ae19192 (MD5)
Previous issue date: 2009-03-24 / As enzimas L-asparaginase do tipo II catalisam a hidr?lise de L-asparagina a Laspartato e am?nia e, em menor quantidade, a hidr?lise de L-glutamina. Escherichia coli e Erwinia chrysanthemi s?o as principais origens das L-asparaginases II utilizadas como agentes terap?uticos no tratamento da leucemia linfobl?stica aguda infantil. Entretanto, sua atividade de glutaminase tem sido relatada, causando graves efeitos colaterais. Felizmente, a L-asparaginase II obtida de Erwinia carotovora possui baixa atividade de glutaminase, representando uma importante terapia alternativa. Neste trabalho ? descrita a clonagem, express?o, purifica??o e determina??o dos par?metros cin?ticos em estado estacion?rio para duas constru??es de L-asparaginase II de E. carotovora: com (AspSP) e sem pept?deo-sinal (AspMP). AspMP foi purificada ? homogeneidade por um protocolo de uma etapa com 81% de rendimento, enquanto que AspSP por um protocolo de duas etapas com 35% de rendimento. Os valores de Km e kcat para as atividades de L-asparaginase e de L-glutaminase foram determinados para ambas as prote?nas. A an?lise de especificidade para os substratos indicou que a L-asparagina ? o melhor substrato que a L-glutamina para a AspSp quando comparado ? AspMP. Entretanto, a AspMP ? produzida por um protocolo de purifica??o simples que fornece um alto rendimento da enzima. Este processo pode ser adaptado para uma produ??o em larga escala e ser interessante para as pesquisas e companhias biofarmac?uticas.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:tede2.pucrs.br:tede/1502 |
| Date | 24 March 2009 |
| Creators | Wink, Priscila Lamb |
| Contributors | Santos, Di?genes Santiago |
| Publisher | Pontif?cia Universidade Cat?lica do Rio Grande do Sul, Programa de P?s-Gradua??o em Medicina e Ci?ncias da Sa?de, PUCRS, BR, Faculdade de Medicina |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da PUC_RS, instname:Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul, instacron:PUC_RS |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 7620745074616285884, 500, 600, -8624664729441623247 |
Page generated in 0.0017 seconds