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Previous issue date: 2015-04-14 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A infecção pelo rotavírus A (RVA) é responsável por cerca de 453.000 mortes anualmente e aproximadamente 40% das hospitalizações por diarreia em crianças menores de cinco anos em todo o mundo, sendo o principal causador de gastroenterite aguda nesse grupo populacional. O desenvolvimento de um método de diagnóstico rápido, barato, sensível e específico para a detecção de RVA é importante do ponto de vista epidemiológico porque permite identificar surtos no local de ocorrência. O uso da imunoglobulina Y (IgY), anticorpo purificado a partir da gema de ovo, vem crescendo nos últimos anos, devido às características vantajosas quando comparada com a imunoglobulina G (IgG), como a obtenção de anticorpos de forma não invasiva e a produção de anticorpos em grandes concentrações. Este trabalho objetivou a adaptação de um teste de diagnóstico através da substituição do anticorpo de captura IgG pela IgY específica para o antígeno de RVA (LATEXY-ROTA). Para isto 09 frangas poedeiras foram imunizadas com o RVA, os ovos foram coletados e a IgY purificada a partir da gema do ovo por polietileno glicol 6.000, seguida da purificação adicional por cromatografia de troca iônica
A IgY anti-RVA purificada foi ligada covalentemente à partículas de poliestireno e usada como insumo na adaptação de um teste de aglutinação em látex, sendo testada em um painel de amostras fecais sabidamente positivas e negativas previamente selecionadas pelo Centro Regional de Referência para Rotaviroses do Laboratório de Virologia Comparada e Ambiental (LVCA/IOC-FIOCRUZ). Foi obtida uma sensibilidade de 75% e uma especificidade de 87,5% quando o LATEXY-ROTA foi comparado com um teste imunoenzimático comercial disponível (padrão ouro). Quando comparado com dois testes comerciais de aglutinação em látex testados no painel de amostras utilizando a IgG, o LATEXY-ROTA obteve uma sensibilidade de 100% e especificidade de 88,24%. Baseado nos dados obtidos, sugerimos a viabilidade da substituição da IgG por IgY no ensaio de aglutinação pelo látex / The infection
by
rotavirus (RV
) is responsible for
approximately
453,000 de
aths
annually and approximately 40
% of hospitalizations
by
diarrhea in children under five
years worldwide
, being the major cause
of acute gastroent
eritis in this population
group
. The development of
a
rapid
method, inexpensive
, sensitive and specific for
rotavirus diagnosis is important from
the disease
because it allows
the identification
of
outbreaks
in the site of
occurrence
.
The
use of Immunoglobulin Y (IgY
) antibody
purified
from
egg yolk,
has been grow
n
in recent
years
, due to the advantageous
features compared
to
immunoglobulin G (IgG)
,
as
a noninvasive
recovery of
antibodies
and production
in
high concentrations
.
The aim of t
his
method
was
to
adapt
a diagnostic test by replacing the IgG capture antibody by specific IgY for
RVA
antigen
(LATEXY
-
ROTA).
For that, 09 laying hens were immunized with
RVA
, the
eggs were
collected and
IgY purified from egg yolk by polyethylene glycol 6
,000,
followed by purification
by ion exchange chromatography.
The
purified
anti
-
IgY
RVA
was covalently bound to polystyrene particles
, being tested in a p
anel
of
positive and
negative fecal samples previously
determined
by
the R
otavirus
Regional
Reference
Center
of
Compa
rative
and Environmental
Virology Laboratory (LVCA
/
IOC
-
FIOCRUZ
)
. A
sensitivity
of 75%
and specificity
of 85,7%
was observed
when
the
adapted test was
compared
to a
commercial available enzyme immunoassay (golden
standard).
When compared
to
two commercial l
atex agglutination tests
using the IgG
tested on the panel of samples
, the
LATEXY
-
ROTA
had a sensitivity
of 100% and
specificity of 88.2
%.
Based on the obtained data, we
suggest
the
feasibility of
replacing the IgG by IgY in the latex agglu
tination assay.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/12063 |
| Date | January 2014 |
| Creators | Lanzarini, Natália Maria |
| Contributors | Santos, Flavia Barreto dos, Cavalcanti, Silvia Maria Baeta, Freitas, Mônica Santos de, Pinto, Marcelo Alves |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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