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Previous issue date: 2012 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / O vírus Influenza é o agente infeccioso que mais afeta o trato respiratório dos
seres humanos, resultando em altos índices de morbidade e mortalidade. Este vírus
pertence à família Orthomyxovirida, apresenta RNA fita simples, octa-segmentado,
de polaridade negativa e possui um envelope lipoproteico no qual estão inseridas as
glicoproteínas hemaglutinina e neuraminidase. Já foi demonstrado que a infecção
por Influenza gera alterações no metabolismo celular, porém, não foi descrito, até o
momento, qual seria o mecanismo de ação relacionado. Em nosso trabalho,
decidimos analisar mais a fundo essas alterações metabólicas relacionadas à
infecção por Influenza A. Para tal, resolvemos investigar os efeitos da inibição da via
glicolítica e do silenciamento da enzima chave de regulação da via, a enzima PFK-1,
sobre a replicação viral. Inicialmente, utilizamos células MDCK infectadas com MOI
de 5,0 e verificamos o efeito da inibição de umas das etapas finais desta via
metabólica sobre a replicação do vírus. Observamos que, em 24 horas pós-infecção,
a inibição da glicólise provocou uma redução da replicação do vírus Influenza,
porém, em 48 horas pós–infecção, a inibição desta via promoveu um aumento da
replicação viral. Verificamos, também, que o silenciamento das isoformas L, M e P
da enzima PFK-1, em 24 horas pós-infecção, promoveu uma significativa diminuição
do título viral. Diante disto, decidimos investigar quais as etapas do ciclo replicativo
estariam sendo afetadas pelo silenciamento desta enzima e observamos que, tanto
a adsorção como a penetração de material genético no núcleo celular foram
afetadas pelo silenciamento da PFK-1, principalmente pela inibição da isoforma P.
Esses resultados sugerem que a enzima PFK-1 tem um importante papel na
infecção pelo vírus Influenza podendo, inclusive, ser um possível alvo terapêutico. / The Influenza virus is the major infectious agent that affects the respiratory tract of
humans, resulting in high morbidity and mortality. This virus belongs to
Orthomyxovirida family and presents single-stranded, octa-segmented, negative
polarity RNA and has a lipoprotein envelope in which are inserted the hemagglutinin
and neuraminidase glycoproteins. It has been shown that Influenza infection causes
changes in cellular metabolism, however, not been described up to now, which would
be related mechanism of action. In our work, we decided to further analyze these
metabolic changes related to infection with Influenza A. To this end, we decided to
investigate the effects of inhibition of glycolytic pathway and the silencing of key
regulatory enzyme of this pathway, the enzyme PFK-1, on viral replication. Initially,
we used MDCK cells infected with m.o,.i.5.0 to check the effect of inhibition of some
final stages of this pathway on virus replication. We observed that, in 24 hours postinfection,
the inhibition of glycolysis resulted in a reduction of the replication of
Influenza viruses, but at 48 hours post-infection, the inhibition of this pathway leads
to an increase in viral replication. We also verified that silencing of L, M and P
isoforms of PFK-1, at 24 hours post-infection, caused a significant decrease in viral
titer. So, we decided to investigate which steps of the replicative cycle were being
affected by the silencing of this enzyme and found that both the adsorption and
penetration of genetic material in the cell nucleus were affected by the silencing of
PFK-1, mainly by inhibiting P isoform. These results suggest that the enzyme PFK-1
plays an important role in the Influenza virus infection and may it also be a potential
therapeutic target.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/6939 |
| Date | January 2012 |
| Creators | Alves, Cristiane Maia |
| Contributors | Motta, Fernando Couto, Silva, Daniel da, Almeida, Helena Carla Castro Cardoso de, Volotão, Eduardo de Mello, Abrantes, Juliana, Souza, Thiago Moreno Lopes e, Siqueira, Marilda Agudo Mendonça Teixeira |
| Publisher | Instituto Oswaldo Cruz |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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