Tesis para optar al Grado de Magíster en Ciencias Animales y Veterinarias / La hembra canina presenta características reproductivas particulares
comparado con las otras especies de mamíferos domésticos, donde destaca el
arresto meiótico prolongado del ovocito reanudando la meiosis posterior a la
ovulación. El desarrollo del ovocito es regulado por señales entre el ovocito y
las células foliculares que le rodean mediante conexones constituidos por
conexinas, de ellas la Conexina 43 es la proteína con mayor expresión en el
ovario. El objetivo de este trabajo fue estudiar la expresión génica de Cx43 y de
su proteína en células foliculares de perra durante el desarrollo folicular y a lo
largo del ciclo estral. Usando un lupa estereoscópica se aislaron células de
folículos preantrales y antrales de ovarios de perra en anestro, proestro, estro y
diestro. Se utilizó q-PCR para la evaluación de los niveles de mARN y Western
Blot e lnmunohistoquímica para la cuantificación y localización de la proteína
respectivamente. Los valores de expresión génica y densidad óptica de las
bandas de Western Blot se analizaron con ANOVA; además, se hicieron
correlaciones de Pearson. La Cx43 se encontró en todos los folículos desde
folículo primordial hasta preovulatorio, la expresión del gen de Cx43 y su
proteína codificante varió a lo largo del ciclo estral, presentando los mayores
niveles de mARN en anestro (P<0,05) y los mayores niveles de Cx43 en diestro
(P<0,05), adicionalmente la expresión de mRNA y de Cx43 no disminuyeron en
folículos preovulatorios, sugiriendo que la comunicación entre el ovocito y las
células foliculares se mantienen, lo que podría explicar el arresto meiótico
prolongado de la perra. La correlación entre mARN y proteína fue negativa en la
mayoría de etapas del ciclo, lo que se podría asociar a los mecanismos de
control traduccional a las que son sometidas las conexinas. / The female canine has particular reproductive characteristics compared to the
other species of domestic mammals, where it stands out the prolonged meiotic
arrest of the oocyte that resumes meiosis after ovulation. Oocyte development is
regulated by signals between the oocyte and follicular cells that sorround it by
connexons constituted of connexins, of these, Connexin 43 is the protein with
the highest expression in the ovary. The objective of this work was to study the
gene expression of Cx43 and its protein in dog follicular cells during follicular
development and throughout the estrous cycle. Using a stereoscopic magnifying
glass, cells were isolated from preantral and antral follicles of the ovaries of
bitches in anestrus, proestrus, estrus and diestrus. q-PCR was used for the
evaluation of mRNA levels and Western Blot and lmmunohistochemistry for the
quantification and localization of the protein respectively. The values of gene
expression and optical density of the Western Blot bands were analyzed with
ANOVA; in addition , Pearson correlations were made. The Cx43 was found in all
the follicles from primordial to preovulatory, the expression of the Cx43 gene
and its coding protein varied throughout the estrous cycle, presenting the
highest levels of mRNA in anoestrus (P <0.05) and the highest levels of Cx43 in
diestrus (P <0.05), additionally the expression of mRNA and Cx43 did not
decrease in preovulatory follicles, suggesting that communication between the
oocyte and follicular cells is maintained, which could explain the prolonged
meiotic arrest of the dog. The correlation between mRNA and protein was
negative in most stages of the cycle, which could be associated with the
mechanisms of translational control to which connexins are subjected. / Financiamiento: Proyecto Fondecyt 1171670
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UCHILE/oai:repositorio.uchile.cl:2250/151243 |
| Date | January 2018 |
| Creators | Espinoza Páez, Roberto José |
| Contributors | Reyes Solovera, Mónica de los, Fernández Garay, María Soledad, Peralta Troncoso, Oscar |
| Publisher | Universidad de Chile |
| Source Sets | Universidad de Chile |
| Language | Spanish |
| Detected Language | English |
| Type | Tesis |
| Rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Chile, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/cl/ |
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