Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / Los fibroblastos cardíacos (FC) son células capaces de mantener la homeostasis de
la matriz extracelular (MEC), regulando la estructura tisular, así como también participan de
la señalización química y eléctrica del tejido cardiaco. Además, los FC están en estrecha
relación con el proceso inflamatorio, manteniendo un rol clave en la homeostasis del tejido
posterior a una injuria o daño tisular.
En el proceso inflamatorio, producido por daño celular o por invasión microbiana, las
células del sistema inmune son atraídas desde la circulación sanguínea al sitio de injuria,
siendo los neutrófilos la primera línea de defensa del organismo. La llegada de neutrófilos
al sitio de daño genera gradientes quimiotáxicos que atraen células del sistema inmune,
gatillando el reclutamiento leucocitario, el cual es dependiente de las proteínas de adhesión
molecular VCAM-1 e ICAM-1, generando una respuesta inflamatoria sostenida. En ese
contexto, evidencias sugieren que un nuevo tipo de mediador lipídico, la Resolvina D1
(RvD1), ha demostrado moderar la respuesta inflamatoria, promoviendo el cese de la
infiltración leucocitaria, además de mejorar la fagocitosis en macrófagos para así permitir la
remoción de células y tejido apoptótico en la zona de injuria, finalizando así el proceso de
inflamación. Hasta la fecha, la RvD1 no ha sido utilizada en modelos cardíacos, y por lo
mismo, se desconoce su utilidad como agente antiinflamatorio en el corazón,
específicamente en el FC.
El objetivo de este trabajo fue caracterizar los efectos de RvD1 en la viabilidad y
proliferación celular de FC neonatos (FCN), para así estudiar el efecto de RvD1 sobre FCN
bajo un contexto inflamatorio, inducido por estímulo con LPS, midiendo los niveles de
expresión de proteínas de adhesión VCAM-1 e ICAM-1, y consecuentemente, la adhesión
de leucocitos a FCN. Además, se estudió si la RvD1 es capaz de mostrar un efecto citoprotector frente al daño provocado por un estímulo de isquemia/reperfusión simulada
(I/Rs).
Los resultados mostraron que en FCN la presencia de RvD1 no afecta la
proliferación ni viabilidad de éstos; sin embargo, no previnieron la muerte celular inducida
por I/Rs. Se demostró además que el pre-tratamiento de FCN con RvD1 y posteriormente
tratados por LPS, disminuyó la expresión de VCAM-1 e ICAM-1, y como consecuencia de
ello, previno la adhesión de SMC a FCN.
De esta forma, la RvD1 se transforma en una potencial y valiosa herramienta
terapéutica capaz de disminuir la respuesta inflamatoria luego de algún evento de injuria
cardiaca como lo puede ser una miocarditis, o bien, un infarto al miocardio / Cardiac fibroblasts (FC) are cells capable of maintaining the homeostasis of the
extracellular matrix (ECM), regulating tissue structure, as well as participating in the
chemical and electrical signaling of cardiac tissue. In addition, FCs are closely related to the
inflammatory process, maintaining a key role in tissue homeostasis following injury or tissue
damage.
In the inflammatory process, presented by cellular damage or by microbial invasion,
the cells of the immune system are attracted from the blood circulation to the site of the
lesion, with neutrophils being the first line of defense of the organism. The arrival of
neutrophils to the site of damage to genomes chemotactic gradients that attract cells of the
immune system, triggering the leukocyte recruitment, which is dependent on molecular
adhesion proteins VCAM-1 and ICAM-1, generating a sustained inflammatory response. In
this context, evidence suggesting a new type of lipid mediator, Resolvin D1 (RvD1), has
shown that the inflammatory response, the growth of leukocyte infiltration, in addition to
improving phagocytosis in macrophages to allow a separation of cells and tissue apoptotic
in the area of injury, thus ending the process of inflammation. To date, RvD1 has not been
used in cardiac models, and therefore, is unknown as the anti-inflammatory agent in the
heart, specifically in the FC.
The objective of this work was to characterize the effects of RvD1 on the viability and
cellular proliferation of neonatal FC (FCN), in order to study the effect of RvD1 on FCN under
an inflammatory context, induced by stimulation with LPS, measuring the levels of
expression of adhesion proteins VCAM-1 and ICAM-1, and consequently, the adhesion of
leukocytes to FCN. In addition, we studied whether RvD1 is able to show a cytoprotective
effect against damage caused by a simulated ischemia / reperfusion stimulus (I / Rs).
The results show that in FCN the presence of RvD1 does not affect the proliferation
or viability thereof; however, they did not prevent cell death induced by I/Rs. It was also
demonstrated the previous treatment of FCN with RvD1 and subsequently treated by LPS,
decreased the expression of VCAM-1 and ICAM-1, and as a consequence, prevented the
adhesion of SMC to FCN.
In this way, RvD1 becomes a potential and valuable therapeutic tool capable of
decreasing the inflammatory response after some event of cardiac injury such as
myocarditis or myocardial infarction / FONDECYT N° 1130300 y 1170425
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UCHILE/oai:repositorio.uchile.cl:2250/170152 |
| Date | January 2017 |
| Creators | Muñoz Silva, Natalia Camila |
| Contributors | Díaz Araya, Guillermo |
| Publisher | Universidad de Chile |
| Source Sets | Universidad de Chile |
| Language | Spanish |
| Detected Language | English |
| Type | Tesis |
| Rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Chile, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/cl/ |
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