Orientador: Maria Terezinha Serrão Peraçoli / Resumo: A pré-eclâmpsia (PE) é uma síndrome específica da gravidez, associada com inflamação sistêmica exacerbada, o que poderia ser dependente da deficiência de fatores reguladores, como a silibinina (SB), progesterona (PG) e vitamina D (VD), que são capazes de modular essa resposta inflamatória. O objetivo do trabalho foi avaliar, in vitro, o efeito modulador da SB, PG e VD sobre os inflamassomas NLRP1 e NLRP3 e sobre a via de sinalização dependente de TLR4-MyD88 em monócitos de gestantes portadoras de PE e em linhagem celular de monócitos humanos THP-1. Monócitos obtidos do sangue periférico de 20 gestantes com PE, 20 gestantes normotensas e células THP-1 foram cultivados na presença ou ausência de urato monossódico (MSU), hialurona (HA), SB, PG ou VD por diferentes períodos: a) por 30 min para determinação da fosforilação de NF-κB e para expressão dos fatores intra-citoplasmáticos NF-κB e IκBα por citometria de fluxo, b) por 4h para a expressão gênica de TLR4, MYD88, NFKB1, NLRP1, NLRP3, CASP1, IL1B, IL18, TNF e IL10 analisada por RT-qPCR e c) por 18h para a determinação da concentração das citocinas IL-1β, IL-18, TNF-α e IL-10 por ELISA e para expressão do receptor de superfície TLR4 por citometria de fluxo. Foram determinados os níveis plasmáticos de ácido úrico, PG e VD em gestantes pré-eclâmpticas e normotensas. Os resultados foram analisados por meio de testes paramétricos e não-paramétricos com nível de significância de 5%. Os níveis plasmáticos de PG e VD foram significati... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Preeclampsia (PE) is a specific pregnancy syndrome, associated with exacerbated systemic inflammation, which could be dependent on the deficiency of regulatory factors, such as silibinin (SB), progesterone (PG), and vitamin D (VD), which are able to modulate this inflammatory response. The aim of this study was to evaluate the modulating effect of SB, PG and VD on the NLRP1 and NLRP3 inflammasomes and on the TLR4-MyD88-dependent signaling pathway in monocytes from pregnant women with PE and human monocyte cell line THP-1. Monocytes obtained from the peripheral blood of 20 pregnant women with PE, 20 normotensive pregnant women and THP-1 cells were cultured in the presence or absence of monosodium urate (MSU), hyaluronan (HA), SB, PG or VD for different periods: a) for 30 min for the determination of NF-κB phosphorylation and for the expression of the intra-cytoplasmic factors NF-κB and IκBα by flow cytometry, b) for 4 h for the gene expression of TLR4, MYD88, NFKB1, NLRP1, NLRP3, CASP1, IL1B, IL18, TNF and IL10, analyzed by qPCR and c) for 18h for the determination of IL-1β, IL-18, TNF-α and IL-10 cytokines concentration by ELISA and for expression of the surface receptor TLR4 by flow cytometry. Plasma levels of uric acid, PG and VD in preeclamptic and normotensive pregnant women were determined. The results were analyzed using parametric and non-parametric tests with a significance level of 5%. Plasma levels of PG and VD were significantly lower, whereas those of uric acid we... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UNESP/oai:www.athena.biblioteca.unesp.br:UEP01-000913847 |
| Date | January 2019 |
| Creators | Matias, Mariana Letícia. |
| Contributors | Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" Faculdade de Medicina. |
| Publisher | Botucatu, |
| Source Sets | Universidade Estadual Paulista |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | computer file |
| Relation | Sistema requerido: Adobe Acrobat Reader |
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