Made available in DSpace on 2015-04-14T13:34:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 422772.pdf: 853974 bytes, checksum: 30f273a08c5bcc95899b572a9f7d1933 (MD5) Previous issue date: 2010-03-05 / Introdu??o: Ao longo da hist?ria o homem busca entender os mecanismos envolvidos no desenvolvimento dos Transtornos Mentais. O principal objetivo do presente trabalho foi investigar o papel do ?cido Valpr?ico na preven??o do preju?zo cognitivo em ratos Wistar submetidos ao estresse neonatal, induzido por separa??o materna, combinado ao tratamento com Anfetamina na idade adulta. Metodologia: Os animais foram subdivididos em estressados e n?o estressados do primeiro ao d?cimo quarto dia de vida. Foram utilizados apenas animais machos para prevenir vi?s com rela??o a altera??es hormonais em f?meas. Na idade adulta foram tratados com Anfetamina (D-AMPH) 2mg/kg e ?cido Valpr?ico (VAL, 400mg/kg/dia). Foram subdivididos em oito sub-grupos cada um contendo entre 10 a 13 animais por grupo. Um grupo recebeu solu??o Salina, outro recebeu D-AMPH e Salina, outro recebeu D-AMPH e ?cido Valpr?ico e outro grupo ?cido Valpr?ico e Salina, por um per?odo de sete dias. Duas horas ap?s a administra??o da ?ltima inje??o de anfetamina foram realizados os testes comportamentais, os quais foram repetidos oito dias mais tarde, no sentido de verificar se os efeitos cognitivos induzidos pelo tratamento cr?nico com anfetamina seriam persistentes mesmo ap?s a interrup??o do tratamento. Resultados: O experimento I (realizado 2 horas ap?s a administra??o da ?ltima inje??o), ambos os grupos n?o separado (NS) e separado (S) de animais que receberam D-AMPH na idade adulta demonstraram no n?mero de cruzamentos e n?mero de explora??es verticais quando comparados com o grupo NS que recebeu Salina na idade adulta. O VAL levou ? redu??o do n?mero de cruzamentos e explora??es verticais quando comparados aqueles grupos de animais NS e S que receberam D-AMPH. 7 No experimento II (realizado sete dias ap?s a ?ltima inje??o), n?o encontramos diferen?as estatisticamente significativas entre os grupos experimentais quanto aos par?metros analisados. A administra??o de D-AMPH produziu preju?zos cognitivos severos, que foram mais pronunciados nos animais submetidos ? priva??o materna, sugerindo que eventos adversos no in?cio da vida podem aumentar a vulnerabilidade a um pat?geno ambiental mais tardiamente. Al?m disso, nossos resultados indicaram que o VAL atenuou o preju?zo cognitivo induzido pela D-AMPH, mas n?o foi efetivo quando os animais foram expostos ? priva??o materna e ? D-AMPH. Conclus?es Nosso trabalho vem ao encontro dos trabalhos anteriores refor?ando o papel dos estabilizantes do humor como ?cido Valpr?ico no mecanismo de neuroprote??o dos transtornos do humor como o transtorno bipolar.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 458575.pdf: 2405331 bytes, checksum: 33fd1d0ad3d3f11fcf5b9cd9b9bff218 (MD5) Previous issue date: 2014-02-27 / Introduction: Psychiatric disorders are among the most common diseases and represent an important public health problem. The neurobiological processes implicated in the pathophysiology of neuropsychiatric disorders are not fully known. Exposure to adverse events in early life increases the risk of developing neuropsychiatric conditions in adulthood, including affective disorders and psychosis. In rodents, maternal separation (MS) is commonly used as a model of exposure to stress in early life. MS may cause long-term effects on brain function, including cellular, neurochemical and behavioral changes. The involvement of pro -inflammatory cytokines in neuropsychiatric disorders has attracted increasing interest from researchers. Topiramate is an antiepileptic drug that has proven to exhibit neuroprotective properties in animal models of brain injury, reducing neuronal damage in animal models of neonatal hypoxic ischemia and attenuating memory deficits. Objectives: To investigate the effect of Topiramate (Top) in reversing cognitive impairment in rats submitted to neonatal stress induced by MS and compare with Valproic Acid (Val), which was previously studied by our research group. Furthermore, to investigate the effects of neonatal stress with and without treatment with Val and Top on BDNF, TNF- α, and Interleukin 10 (IL-10) levels. Methodology: Study on animal model of stress exposure in neonatal period (method of MS), in male rats. Treatment with Top and Val in adulthood: one group received 10mg/kg of Top orally once a day for 14 days, the other group received 100mg/kg of Top in the same period, another group received Val 200mg/kg orally in the same period, and the other group received the same corresponding amount in milliliters also orally of saline solution (control group). Behavioral tests (motor/exploratory activity, recognition memory), and analyzes of BDNF, TNF- α , and IL-10 levels were performed in adulthood. Results: The MS during the neonatal period causes memory impairment in adult rats. The treatment in adults with Top caused injury to memory when used, independently of maternal separation. Likewise, it also failed to reverse the damage caused by MS. Pharmacological treatment with Val in adulthood reversed long-term (LTM) memory deficits induced by MS and caused an improvement in short-term memory (STM) in rats separated from the mother. The MS induced a significant increase in IL -10 when the separated-saline (MS - Sal) was compared with the control group (non-separated-saline, NS-Sal). Statistical comparisons of TNF-α levels, indicated that the group subjected to MS which received saline (MS - Sal) showed a significant increase in the levels of TNF-α in the hippocampus when compared with the control group. Similarly, the levels of TNF-α in the group MS-Sal were also increased in cortex, compared to NS-Sal group. The MS induced a significant decrease in BDNF levels in the hippocampus, when the group MS-Sal was compared with the control group. No statistically significant difference was observed in the comparison of BDNF in prefrontal cortex. Conclusions: MS leads to persistent memory deficits and increases levels of the anti-inflammatory cytokine, IL-10, and of the pro-inflammatory cytokine, TNF-α, and decreases levels of BDNF in adulthood. Val partially alleviated these memory deficits, while Top was ineffective. Surprisingly, the two drugs were able to recover levels of cytokines in brain regions studied. / Introdu??o: Os transtornos psiqui?tricos est?o entre as doen?as mais comuns e representam um importante problema de sa?de p?blica. Os processos neurobiol?gicos implicados na fisiopatologia dos transtornos neuropsiqui?tricos ainda n?o s?o totalmente conhecidos. A exposi??o a eventos adversos no in?cio da vida aumenta o risco de desenvolvimento de condi??es neuropsiqui?tricas na idade adulta, incluindo transtornos afetivos e psicose. Em roedores, a separa??o materna (SM) tem sido correntemente utilizada como um modelo de exposi??o ao estresse no in?cio da vida. A SM poder causar efeitos ? longo prazo na fun??o cerebral, incluindo altera??es celulares, neuroqu?micas e comportamentais. O envolvimento das citocinas pr? e antiinflamat?rias nas doen?as psiqui?tricas tem despertado cada vez mais o interesse dos pesquisadores. O topiramato ? um medicamento anti-epil?ptico que provou apresentar propriedades neuroprotetoras em modelos animais de les?o cerebral, reduzindo o dano neuronal em modelos animais de isquemia hip?xica neonatal e atenuando os d?ficits da mem?ria. Objetivos: Investigar o efeito do Topiramato (Top) na preven??o do preju?zo cognitivo em ratos Wistar submetidos a estresse neonatal, induzido pela SM e comparar com o ?cido Valpr?ico (Val). Investigar o efeito do estresse neonatal com e sem o tratamento com Top e Val sobre os n?veis de BDNF, TNF- α e Interleucina 10 (IL-10). Metodologia: Estudo com modelo animal de exposi??o a estresse no per?odo neonatal (m?todo SM), em ratos machos. Tratamento com Top e Val na idade adulta: um grupo recebeu 10mg/Kg via oral de Top uma vez ao dia por 14 dias, o outro grupo recebeu 100mg/kg de Top no mesmo per?odo, outro grupo recebeu 200mg/kg via oral de Val no mesmo per?odo, e o outro grupo recebeu a mesma quantidade correspondente em mililitros tamb?m por via oral de solu??o salina (grupo controle). Testes comportamentais (atividade motora/explorat?ria, mem?ria), an?lises de BDNF, TNF α, IL10 foram realizados na idade adulta. Resultados: A SM durante o per?odo neonatal causa preju?zo de mem?ria em ratos adultos. O tratamento na idade adulta com Top ocasionou preju?zo ? mem?ria quando utilizado independente da SM. Assim como, tamb?m n?o conseguiu reverter os danos ocasionados pela SM. O tratamento farmacol?gico com Valproato (Val) na vida adulta reverteu os d?ficits de mem?ria de longa- dura??o (LTM) induzidos pela priva??o materna e provocou uma melhora na mem?ria de curta-dura??o (STM) nos ratos separados da m?e. A SM induziu um aumento significativo nos n?veis de IL-10 quando o grupo separado-salina (S Sal) foi comparado com o grupo controle n?o separado-salina (NS-Sal). As compara??es estat?sticas dos n?veis de TNF-α, indicaram que o grupo submetido ? SM que recebeu solu??o salina (S-Sal) apresentou um aumento significativo nos n?veis de TNF-α no hipocampo quando comparado com o grupo de controle. Do mesmo modo, os n?veis de TNF-α de animais do grupo S -Sal foram tamb?m aumentados no c?rtex, quando comparado com o grupo de NS Sal. A SM induziu um decr?scimo significativo nos n?veis de BDNF no hipocampo, quando o grupo S-Sal foi comparado com o grupo controle. Nenhuma diferen?a estatisticamente significativa foi observada na compara??o do BDNF no c?rtex pr?-frontal. Conclus?es: A SM induz a d?ficits de mem?ria persistentes e aumenta os n?veis da citocina anti-inflamat?ria, a IL-10, e da citocina pr? - inflamat?ria, o TNF-α, e diminui os n?veis de BDNF na idade adulta. O Val parcialmente amenizou esses d?ficits de mem?ria, enquanto que o Top foi ineficaz. Surpreendentemente, as duas drogas foram capazes de recuperar os n?veis das citocinas nas regi?es cerebrais estudadas.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:28:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JulianaABMS_DISSERT.pdf: 2223845 bytes, checksum: 223f33020eca4ef9f2713bc27ef300ca (MD5) Previous issue date: 2013-08-23 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Autism comprises a heterogeneous group of neurodevelopmental disorders that affects the brain maturation and produces sensorial, motor, language and social interaction deficits in early childhood. Several studies have shown a major involvement of genetic factors leading to a predisposition to autism, which are possibly affected by environmental modulators during embryonic and post-natal life. Recent studies in animal models indicate that alterations in epigenetic control during development can generate neuronal maturation disturbances and produce a hyper-excitable circuit, resulting in typical symptoms of autism. In the animal model of autism induced by valproic acid (VPA) during rat pregnancy, behavioral, electrophysiological and cellular alterations have been reported which can also be observed in patients with autism. However, only a few studies have correlated behavioral alterations with the supposed neuronal hyper-excitability in this model. The aim of this project was to generate an animal model of autism by pre-natal exposure to VPA and evaluate the early post-natal development and pre-puberal (PND30) behavior in the offspring. Furthermore, we quantified the parvalbumin-positive neuronal distribution in the medial prefrontal cortex and Purkinje cells in the cerebellum of VPA animals. Our results show that VPA treatment induced developmental alterations, which were observed in behavioral changes as compared to vehicle-treated controls. VPA animals showed clear behavioral abnormalities such as hyperlocomotion, prolonged stereotipies and reduced social interaction with an unfamiliar mate. Cellular quantification revealed a decrease in the number of parvalbumin-positive interneurons in the anterior cingulate cortex and in the prelimbic cortex of the mPFC, suggesting an excitatory/inhibitory unbalance in this animal model of autism. Moreover, we also observed that the neuronal reduction occurred mainly in the cortical layers II/III and V/VI. We did not detect any change in the density of Purkinje neurons in the Crus I region of the cerebellar cortex. Together, our results strengthens the face validity of the VPA model in rats and shed light on specific changes in the inhibitory circuitry of the prefrontal cortex in this autism model. Further studies should address the challenges to clarify particular electrophysiological correlates of the cellular alterations in order to better understand the behavioral dysfunctions / O autismo compreende um grupo heterog?neo de desordens do neurodesenvolvimento que afetam a matura??o cerebral e produzem d?ficits sensoriais, motores, de linguagem e de intera??o social no in?cio da inf?ncia. Diversos estudos tem demonstrado um importante envolvimento de fatores gen?ticos que levam ? predisposi??o ao autismo, que s?o possivelmente afetados por modula??es ambientais durante a vida embrion?ria e p?s-natal. Estudos recentes em modelos animais indicam que altera??es no controle epigen?tico durante o desenvolvimento podem gerar dist?rbios na matura??o neuronal e produzir um circuito hiper-excit?vel, resultando em sintomas t?picos do autismo. No modelo animal de autismo induzido por ?cido valpr?ico (VPA) durante a gesta??o de ratas, foram observadas altera??es comportamentais, eletrofisiol?gicas e celulares semelhantes ?s observadas nos pacientes com autismo. Entretanto, ainda s?o poucos os estudos que correlacionam altera??es comportamentais com a suposta hiper-excitabilidade neuronal desse modelo. O objetivo desse estudo foi de gerar o modelo animal de autismo por exposi??o pr?-natal ao VPA e avaliar o desenvolvimento e comportamento p?s-natal e pr?-p?bere (PND 30). Al?m disso, quantificamos a distribui??o neuronal de interneur?nios parvalbumina-positivos no c?rtex pr?-frontal medial (CPFm) e de c?lulas de Purkinje no cerebelo de animais VPA. Nossos resultados mostraram que o tratamento com VPA induziu altera??es no desenvolvimento, que foram observadas em altera??es comportamentais quando comparadas com os animais controle. Animais VPA mostraram claras altera??es comportamentais, como hiperlocomo??o, estereotipia prolongada e redu??o na intera??o social com animal n?o-familiar. A quantifica??o celular revelou uma diminui??o no n?mero de interneur?nios parvalbumina-positivos no c?rtex cingulado anterior e no c?rtex pr?-l?mbico, sugerindo um desbalan?o na excita??o/inibi??o nesse modelo animal de autismo. Tamb?m observamos que essa redu??o ocorreu principalmente nas camadas corticais II/III e V/VI. N?o observamos modifica??o na densidade de c?lulas de Purkinje na regi?o Crus I do c?rtex cerebelar. Em conjunto, nossos resultados fortalecem a validade de face do modelo VPA em ratos e relatam modifica??es espec?ficas na circuitaria inibit?ria do CPFm nesse modelo de autismo. Novos estudos devem abordar correlatos eletrofisiol?gicos particulares com altera??es celulares, de forma a esclarecer as disfun??es comportamentais encontradas nesse modelo animal

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-10-04T23:54:46Z No. of bitstreams: 1 CarolinaAraujoSousa_DISSERT.pdf: 4069494 bytes, checksum: 9b768a46fbe08e2407ed147faed6bc74 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-10-16T20:38:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 CarolinaAraujoSousa_DISSERT.pdf: 4069494 bytes, checksum: 9b768a46fbe08e2407ed147faed6bc74 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-16T20:38:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CarolinaAraujoSousa_DISSERT.pdf: 4069494 bytes, checksum: 9b768a46fbe08e2407ed147faed6bc74 (MD5) Previous issue date: 2017-08-31 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / A forma??o de circuitos neurais durante o desenvolvimento se d? atrav?s de uma complexa intera??o entre fatores gen?ticos e ambientais, que influenciam m?ltiplos eventos como a neurog?nese, a sinaptog?nese e a mieliniza??o. Em transtornos do desenvolvimento, como o transtorno do espectro autista (TEA), intercorr?ncias nesse processo levam ? m?-forma??o da circuitaria neural e, consequentemente, a d?ficits de intera??o social, interesses restritos e movimentos estereotipados, entre outros. Recentemente, realizamos em nosso laborat?rio a an?lise do transcriptoma do c?rtex frontal no modelo animal de autismo induzido por exposi??o a ?cido valpr?ico (VPA) in utero. Observamos que ratos com 15 dias de idade (P15) apresentam aumento da express?o de genes relacionados ? estabilidade sin?ptica e redu??o de genes relacionado ? mielina, sugerindo poss?veis mecanismos moleculares para as varia??es comportamentais previamente observadas nestes animais. Portanto, o objetivo desta disserta??o foi aprofundar este estudo investigando o padr?o de mieliniza??o no enc?falo de animais tratados com VPA em diferentes idades p?s-natais (infantil: P15 e adulta: P60). Para tanto, os grupos experimental e controle foram gerados, respectivamente, atrav?s da inje??o de VPA (500 mg/kg i.p.) ou salina em f?meas gr?vidas durante o dia embrion?rio 12.5 (E12.5). A an?lise da integridade da mielina foi realizada por duas abordagens: (1) an?lise da express?o de genes relacionados ? mielina (Mobp, Plp1, Mag e Klhl1), por PCR quantitativo, no c?rtex frontal de animais em P15; e (2) quantifica??o histol?gica da distribui??o de mielina em cinco sub-regi?es do c?rtex frontal e corpo caloso de animais P15 e P60. Dos quatro genes avaliados, observamos significativa diminui??o na express?o de Mobp e Mag em animais VPA em P15. A an?lise histol?gica de mielina mostrou redu??o significativa na intensidade de marca??o no c?rtex cingulado anterior em animais VPA em P60, por?m n?o detectou diferen?a na intensidade de marca??o em animais VPA em P15 quando comparados aos controles. Conclu?mos assim que animais VPA neonatos t?m reduzida express?o de genes relacionados a compacta??o da mielina, por?m sem altera??es no conte?do lip?dico da mielina nas ?reas analisadas. Animais adultos, por sua vez, apresentaram altera??es no conte?do lip?dico da mielina no c?rtex cingulado anterior. Em conjunto, estes resultados sugerem que dist?rbios na comunica??o entre circuitos frontais neste modelo de autismo podem ocorrer inicialmente devido altera??es na organiza??o da mielina, levando a redu??es de mielina no adulto. / The formation of brain circuits during neural development occurs through the interaction between timely regulated genetic and environmental signals, which influence multiple events such as neurogenesis, synaptogenesis, and myelination. In developmental disorders, such as autism spectrum disorders (ASD), deficits in these processes may lead to neural circuitry malformations and, in consequence, to social interaction deficits, restricted interests, and stereotyped movements, among others. Recently, we performed a transcriptome analysis of the frontal cortex of an animal model of autism induced by valproic acid (VPA) in utero in our lab. We observed that VPA animals at the postnatal age 15 (P15) show an increased expression of genes related to synaptic stability and a decrease in the expression of myelin-related genes, suggesting possible molecular mechanisms for the behavioral deficits previously observed in these animals. Therefore, the aim of this Master?s thesis was to further investigate the myelination pattern in the forebrain of VPA-treated rats at different postnatal ages (infant: P15 and adult: P60). For that, experimental and control groups were generated by injecting pregnant dams with 500 mg/Kg i.p. VPA or saline, respectively, on embryonic day 12.5 (E12.5). Analysis of myelin integrity was conducted by two different approaches: (1) gene expression analysis of myelin-related genes (Mobp, Plp1, Mag, and Klhl1) in dissected samples of the frontal cortex of P15 rats by quantitative real-time PCR; and (2) histological quantification of myelin distribution in five sub-regions of the frontal cortex and corpus callosum of P15 and P60 animals. Of all genes analyzed, we observed a significant decrease in Mobp and Mag expression in P15 VPA animals. Myelin analysis showed a significant reduction in myelin staining in the anterior cingulate cortex of VPA animals at P60, but no differences were observed at P15. In conclusion, infant VPA rats showed reduced expression of genes related to myelin assembly, without alterations in the lipid content of myelin in the areas analyzed. Adult animals, in contrast, showed a decrease in lipid content of myelin in the anterior cingulate cortex. Together, these results suggest that communication abnormalities in frontal circuits in this animal model of autism may occur initially due to alterations in myelin organization, leading to myelin reduction in adulthood.